Способ взятия крови из сердца эмбрионов коров

СО 03 СОВЕТСКИХсдцйдйстическихРЕСПУБЛИК ССУДДРСТВЕННЫй КВ,1 ИТЕТПО 1 ЛЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗОБРЕ ГЕБУ,фАВ ГОРСКОМУ СВД П=ЛЬСгВУ рина о ускои жизови русоцаю Оиовышение э е(53) 578.089,822 (088,8)56) Методические рекомендации иренному получению сыворотки кровтных для куль,ивирования клето илогических исследований методомфугирования. гл 985, с, 2 - 5,Изобретение относится к биотехнологии, в часгности к способам сбора крови у эмбрионов коров,Цель изобретения - и фф ктивности способа,На фиг.1 изображена система для взятия крови у эмбрионов с массой выше 3 кг; на фиг.2 - то же, у эмбрионов с массой меньше 3 кг.Устройство для взятия крови содержит одну или две иглы 1 для взятия крови, которые изготовлены из нержавеющей стали с внутренним диаметром 3 мм, длиной 120 - .50 мм, острие иглы имеет косой серповидный срез для предупреждения тромбообраэования, две селиконовые трубки 2 надеты на резиновые пробки 3, которые посредством отверстий укреплены на иглах на расстоянии 15 - 20 мм от концов, противоположных их остриям, а противоположные отверстия селиконовых трубок 2 закрыты реам я 51 К 35/14 Г 12 И 5 ч, С ОСОь ВЗЯТИч КРОВИ И 3 СЕРДЕЦ 5 ЭЬ ОРИОНОВ КОРОБ,57) Изоб; етенив Относится к биотехнологии, Цель изобретения - повышение эффекгивности спосеоа. Способ ьзятиЯ крэви из сердца эмбрионоч коров включает извлечение 5 - 9-месячных эмбрионов иэ матки, подвешивание их вниз головой за задние конечности, проведение кардиопункций в Области углубления у кран.апьной части грудной кости и сбор крови поэтапно: само- текОМ, с помощью массажа от конечности к сердцу при подъеме головы и шеи выше проекции сердца и массажа головы и шеи в сторону сердца. 2 табл., 2 ил. зиновь ми пробками 4, таким Образом достигается изОляция игл От Внешней среды, два сепиконовых шланга 5 длиной 250 мм, диаметром 4 мм, по которым кровь поступает в стеклянный флакон б емкостью 250 - О 500 мл; селиконовые шланги 5 соединены с фь концами игл, противоположными их остри- ф ям, резиновую пробку 7, которая укорочена сО на 10 мм у вершины усеченного конуса ее; О, резиновая пробка 8 служит для перекрытия у флакона для сбора крови и имеет два отверстия, через которые протянуты селиконовые шланги 5 и одно отверстие для трубки 9 из нержавеющей стали, на которую надета селиконовая трубка ватного фильтра 10, круг из клеенки 11 с тремя отверстиями дпя селиконовых шлангов 5 и трубки из нержавеющей стали, он служитдля и редуп реждения загрязнениЯ пробки и горлышка флакона для сбора крови.П р,. м е р 1. Взятие крови у эмбрионов коров по прототипу.Готовят к работе закрытые, исключающие контакт крови с внешним воздухом системы: одинарные и типа "елочка". ВФлаконы наливают 20-ный раствор йаО израсчета 4 - 5 мл на 100 мл крови, пробки,герметично вставленные ео Флаконы, обертывают ватой, а сверху бумагой. Смонтированные системы для взятия крови автоклавируют при 2 атм. 60 мин. У клиническиздоровых коров после убоя (при нутроеке)извлекают эмбрионы и подвешивают за задние конечности на высоте 1,5 м. Делаютразрез кожи между 3 - 4-м ребрами с левойстороны эмбрионов. Через проведенныйразрез кожи проводят лееостороннюю кардиопункцию иглой от закрытых систем: Одинарной у маленьких эмбрионов или типа"елочка" у больших эмбрионов, и кровь свободно до. окончания стекает во Флаконы.Флаконы заполняют кровью на 50 - 60;4 ихобьема, после чего селиконовые трубкй перекрывают кроеоостанавливающими зажимами, а ватные фильтры - пружиннымизажимами.По прототипу кровь взята у 28 эмбрионое коров с живой массой 1,0 - 20,5 кг.В табл.3 йриеедены результаты эффективности обескроелиааиия.Как видно из табл.1, процент взятойкрови к живой массе по прототипу незначителен (если учесть, что теоретически объемкрови составляет 8 от живой массы плода коровы и составляет у эмбрионое с живоймассой до 5 кг 3,07 + 0,23;4: 5 - 10 кг2,87 + 0,16;4; свыше 10 кг 2,33 + 0,26,Кроме того, отмечается высокий коэффициент вариации (превышает 27, что говорито нестабильности результатое при взятиикрови.Взятие крови у змбрионое коров с использованием описанных устройств осуществлением прокола ткани В области углубления у краниальной части грудной кости (способ 1),Во флаконы систем взятия крови налиВают 5 фД-ный раствор ИаО иэ расчета 2 - 3мл на 100 мл крови, Кровь стекает ео Флаконы до прекращения из эмбрионов, подвешенных е вертикальном положении, как попрототипу,По способу 1 кровь Взята у 62 эмбрионов коров с живой массой 1,0 - 33,2 кг(табл,1), Как видно из табл,1, процент Взятойкрови к живой массе по способу 1 больше,чем по прототипу и составляет у эмбрионовс живой массой до 5 кг 4,77 + 0,11;4: 5 -10 кг 3,93 -0,14;Д; свыше 10 кг 3,31+0,23,Ио существуют существенные различияпроцента взятой крови е зависимости от живой массы эмбрионов - чем больше жи вая масса эмбрионое, тем ниже процентВЗЯТОЙ крОви.Взятие крови по предлагаемому спосо 5 бу устройством проводится следующим образом.фПуповину эмбриона пережимают кровоостанавливающим зажимом перед извлечением эмбриона из матки, эмбрион подее 10 шиеают за задние конечности, делают разрез кожи е области углубления около краниальной части грудной кости, место разрезакожи обрабатывают спиртом, Флакон 6 системы Взятия крови устанавливают на под 15 ставке, с ватного фильтра 10 убирают пружинный зажим, ИГлоЙ для Взятия кровипроводят кардиопункцию врез углублениеоколо краниальной части грудной кости,убирают зажим с селиконОВОГО шланГа Б, и20 кровь начинает поступать Во Флакон 6, который заполняют кровью до 80 Я, его обьема,после чего селиконовый шланг 5 и ватныйфильтр 10 перекрывают пружинными зажимами; если кровь от эмбриона не помести 25 лась в один Флакон, то берут вторую систему(СВКили СВК) и иглой 1 второй системыделают прокол трубки у СВК, дальнейшиеОперации те же, ТО и при заполненли перВого Флакона, и т,д, после свободного стека 30 ния крови (до прекращения) из эмбрионапроводят принудительное удаленис крови,заключающееся е массаже тела, поднятииголовы и шеи выше проекции сердца дополнОГО Обескровливания,35. По предлагаемому способу кровь взятау 32 эмбрионое коров с живой массой 1,9 -29,1 КГ.Процент взятой крови к живой массе попредлагаемому способу составляет у эмбри 40 оновс живой массойдо 5 кг 5,35 .0,23510 .520018 о.с е 10 .500. 013 оа различия по проценту Взятой крови е заВисимости От живой массы эмбрионоВ практически Отсу Г стеуют.45 Кроме ТОГО, при Взятии крови РО предлагаемому способу у 15 эмбрионов с живой массой 3;0 - 21,2 кг объемы крови, эабираемой на первом и втором этапах, регистрировалиСь отдельно.50 8 табл.2 приведены результаты эффективнос".и обескровлиеания по проценту взятой крови к живой массе на первом и втором этапах и по предлагаемому способу.Из табл,2 видно, что процент взятой 55 крови к живой массе эмбрионов составил5,14 - 0,10;, в т.ч. на первом этапе 3,66 - 0,10 и на втором этапе 1,48+ 0,070 или в среднем 1/3 объема от забираемой у эмбрионов крови, Ф о р мул а изобретения Способ Взятия крови из сердца эмбриО- нов коров, включающий извлечение иэ матки 5 - 8-месячных Эмбрионов, подвеши- Б вание их вниз головой за задние конечности, проведение левосторонней кардиопункции иглой, подсоединенной к емкости, внутри которой создано Отрицательное давление, исбор крови,отл ич а ю щийся 1 О тем, что, с целью повцяения Эффективности способа, кардиопункцию проводят в области углубления у краниальной части грудной кости, а сбОр крови ОсущестВляют поэтапно В результате следующих операций: поступления крови в сердце самотеком, массажа тела в направлении от задней конечности к сердцу, подьема головы и тела эмбриона Выме проекции сердца и массажа головы и шеи в сторону сердца.тор С,Шекма Про твенно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина эказ 1307 Тираж 472 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при 113035,Москва,Ж, Раушская наб., 4/5