Способ стимуляции физиологических процессов у рыб на ранних стадиях развития

12861Изобретение Относится к рыбоводству а именно к способам стимуляции физиологических процессов у рыб на ранних стадиях развития при искусственном рыборазведении, и может быть5 использован в основном при разведении лососевых рыб,Целью изобретения является повышение выживаемости, сокращение продолжительности эмбрионального разви О тия и повышение темпа роста молоди.В указанном способе в качестве биологически активного соединения используют синтетический суперактивный аналог лей-энкефалина-(5-Лла) 15ь(П-Арг) -лей-энкефалин, который спос 0 бт с т Хэ 5 те т и 3 ме 11 е н хптэ Б е й р О э нд 0 кр 1111 " Ной 1 ХЕГ 5;1 ХЯХТТ 111 111 ЭСТТЕССОН жИЗТХЕ;сЕЯ" 38 2кают в раствор (э-Ала) (Х-Арг) -лей-энкефалина концентрацией 1 мкг/л на 0,5, 1, 4, 16 ч, а 4 - в чистую воду. По истечении каждой из экспозиций инкубаторы с икрой переносят в чистую воду для промьхвки и последующего продолжения инкубации. После завершения эмбрионального развития оказалось, что обработка Оплодотворенной6икры (П-Ала)(О-Арг) -лей-э нкефялицом приводит к снижению ее гибели на 11,6-37,47, по сравнецию с контролем (табл, 1). Наибольшее снижение гибели икры наблюдается при экспозиции 16 ч, сходные результаты получены при -часовой экспозиции. Быдержитэание объектов в течение 0.5 ч также приводитк снижению ГЕбели, но в мепьшей сте ТЕЛЬ 1 ОСТИ, 0 ИО соб Ос 1 т"-Г 1 РЕХяеэт с 11 еду 101 им О 0" 20РаэомсКттт; ХХО Е ЦТХЦ Чт 1 тт ОК ИЛИ ЛИИИЦОК рыб, помс".щают В любьХе ВНХкОГти с Во дай, к 5 тда чпя стимуляХтии Аизиолог 11- ческих процессов добавляют раствор 25 (0 -АТЕЯ) - (э-Лр 1)" -пей-энтхефалина до концепт 1 тации х ГредеОт 1 до О мкг/л, Икру, предпичинок и личинок Въ Дек 11 иваОт В этОЙ среДе От 1 доч для осуществления полного контак- ЗО та с веЩестеэомс После птомь 1 вки НОД протосом 111 тта, предпичинки и личинки х 10 с т/ха ют В хэ 11 б Ов ОДЯЬЕХХ х 1 роце с с,(т.-Лля) - (П-Арг) -лей-энкефяпин поротдок белого цвета, легко раство рюьхй в воде. Иехах 1 изм действия этого вещества изучен очень слабо, СпоГоб ОГЕ 10 встц Е 1;1 томт 1 ТО ОХТИОИХТТХые ПЕХ 1 ХА Хс,т К К 0 Т 00 ЫХЧ О 1 Ц О 1111 СЕТ ПТЯП с. тэят., НОГрсдством хопх 1;:131 згптХесх,НТХ их 40 (1:.1111:"ЕХХТЕХт 1 ЭЭГИЧ ":С тХХТХ 1 11 ЕХя 1111 МОБ МО гУт -тнел 11 тт 11 вххть секттедчю 111 НОАцзатэ. НЫХ ЯНХХХСТРЕССОТТЕГс 11 ГОРМОНОВЯ таКЖЕОТВЕТСХВ "ЦХ 1 ЬТХ За РОСТ ОРТЯ- низма тпреотропХого и самототропного 45 гохэх 1011 ав, ттролактина. Возможен путь и опосредованного влияния опиодных пептидов ца сееХреХТИЕп гипофизарньхх гормонов через гипоталамус ВЭЯХХмодействие цейроэндокрицной и нейропептидных систем организма В частности энкефялинов обеспечивает регу- ПЯЦИЮ ЯтЯПтЭс 1 ХБ 10 цтТЫХ 1 ТР 01 ЕГ СОН Б ОР ГЯНИЗМЕ С ТХЕМ 1 НЯЗЯЦО ПОНЬХШЕНИЕ ЖИЗ - нестОЙХ".Оси 11 кры и личцх 10 к, 55П р и и е р 1 с с 11 цОХХОтворенх 1 ую ик 1 ру си 1 хьх 110 НХехаю. на ппавутХЕХе инкубато 1 эы с сетньхм де 10 м: 4 ин 1 субатора Опуспени, чем прэ:;. 1-часоХэой экспозиции, хо-видиХому гследстезие недостаточно полного контакта вещества с объектом. Использование экспозиции В 16 ч представляется нецелесообразным так как за это Время препарат может быть частично или полностью разрушен, Таким образом, оптимальным интервалом экспозиций следует считать 1-4 ч.П р и м е р 2. Оплодотворенную икру балтийского лосося помещают на плавучие инкубаторы с сетцым дном и опускают по одному инкубатору В растворыб11,1 э-АХа)" (Э-АрГ) -ЛЕЙЭНКЕфалица КОН- цептрацией 0,01, 1 и 10 мкг/л, а 1 в чистую воду дпя Хэыдеркивация В течечце 1 ч, По истечении этого Времени Х 111 кубаторы с икрой переносят в чистую воду для промыьки и последующей ицкубации. Постте завер 111 ения эмбрионального развития оказалось, что наименьшая гибель икры произошла В среде с концентрацией раствора 1 и 10 мкг/л (табл. 2) . В среде с кон - центраХтией раствора 0,01 мкг/л умепхтпеецхХя гибели икры по сравнению с контролем не отмечено. Использование коЕхцентрации свыше О мкг/л является 11 еХХелесообразных 1, так как увеличение концентрации це приводит к донолцитепхтному эффекту. Таким Образом, рекомендуется использовать раствор с концентрацией 1-10 мкг/л, при оптимальной концентрации 1 мкг/лс Выбор опытных концентраций ОСУЩССТНПЕН ИСХОДЯ ИЗ 5 сдобСтца ИХ 110 тГУТХЕХТИЯ В 11 Р 01 ЗБОДСТВЕЦНЫХ УСЛО ХЭ ИЯХ 115 сТЕМ РИЗ ОссБЛЕНИЯ Рс 1 СТВОРОВ юП р и и е р 3 с Оплодотворенную икру радужной форе 111 обрабатывают1286138 Та блица 1 Контроль Опыт Экспозиция, ч Погибло Количество икрыв инкубаторе в инкубаторе шт.7 952 . 47,3 1800 1156 64,226 21,2 38 31,6 1800 6,6 1 120 4 120 121 24 20,0 120 49 41 5 121(Р-Ала) (Р-Арг)о -лей-энкеАалином при оптимальной концентрации 1 мкг/л и экспозиции 1 ч аналогично примерам 1 и 2. После выпупления опытных и контрольных предличинок рассадили по 450 шт. для подращивания. В течение 20 дней гибель личинок в опыте составила 136 шт, (30,2 Х), а в контроле - 284 шт. (63, 1 Х), т.е. в опыте гибель была ниже на 32,9 Х.П р и м е р 4. Предличинок карпа6 обрабатывают (Р-Ала) (Р-Арг) -лей-энкеалином, как в примере 3, После окончания обработки их рассаживают в аппараты системы ВНИИПРХ для подращивания, В течение 9 дней выращивания выживаемость личинок в опыте составила в среднем 88 Х (80-100 Х), а в контроле - 74 Х /70-85 Х), т,е, была выше в среднем на 14 Х (табл. 3).П.р и м е р 5, Оплодотворенную икру лососевых рыб обрабатывают, как в примере 3, Послезавершения эмбриогенеза оказалось, что обработка оплодотворенной икры (Р-Ала) (Р-Арг) -лей-энкеАалином сокращает продолжительность эмбриогенеза на 1-5 сут (табл. 4). Имеется видоспециАичность влияния препарата на продолжитель ность эмбрионального развития,П р и м е р 6. Предличинок балтийского лосося сразу после вылупления обрабатывают раствором (Р-Ала)6(Р-Арг) -лей-энкейалина как в примере 3 (1 эксперимент), а личинок при переходе на активное питание по той же схеме (11 эксперимент). После 99 сут наблюдений масса опытных личинок в 1 эксперименте превышает "массу контрольных на 19 Х, а длина - на 6,8 Х (табл. 5). После 69 сут наблюдения за мальками (11 эксперимент) их масса превьшает контрольных на 22,8 Х, а длина - на 7,6 Х (табл, 5). Количество икры Погибло Таким образом, для повышения жизнестойкости икры, предличинок и личинок, сокращения продолжительности эмбрионального развития и стимуляции роста молоди рекомендуется использовать раствор (Р-Ала) (Ра-Арг) -лей-энкеАалина при концентрациях от 1 до 10 мкг/л и экспозиции 1-4 ч; оптимальная концентрация 1 мкг/л, экспозиция - 1 ч. В табл. 6 приведены данные, иллюстрирующие преимущества предлагаемого способа по сравнению с прототипом. Из табл. 6 видно, что при использовании предлагаемого способа достигается увеличения массы молоди, ее выживаемости, а также уменьшается продолжительность эмбрионального развития. Формула и з обретения25 Способ стимуляции Аизиологическихпроцессов у рыб на ранних стадияхразвития, преимущественно у лососевых, путем добавления в воду биологически активного соединения и выдерживания икры и личинок в этойсреде,о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения выживаемости,сокращения продолжительности эмбрио нального развития и повышения темпароста молоди, в качестве биологически активного соединения используютсинтетический суперактивный аналоглей-энкеалина-(Р - Ала) (Р - Арг) 40 -лей-энкеАалин, при этом добавлениепроводят до концентрации его в водеот 1 до 10 мкг/л, а выдерживаниеобъектов осуществляют в течение отдо 4 ч.1286138 Таблица 2,и Контроль Опыт Концентрация, мкг/л шт. 20 150 17,3 0,01 30 26 0,1 21,6 120 6,6 200 10,0 Таблица 3 Контроль Опыт Дата массово- Количество Дата массового вылупления о/дн разви- го вылуплениятия 2.11.83 7.П.83 516 585 Сима Балтийскийлосось 15.02.82 486 14.02.82 Таблица 4 Продолжение табл.4 Аппарат Выход личинок после подращивания, тыс штВыход личичинок после подращивания, 4 ние,тыс.шт. Контрол 10 9 10 3 0 7 10 Опыт 10090 100100 120 100 Посаженона подращиваПогибло 7 шт. 135,14 Количествоо/дн развития1286138Таблица 5 Динамика массы и длины молоди балтийского лосося, обработанных (17-Апа)ф.(В-Арг) -лей-энкейалина на этапе выпупления (1) и прн переходе на активное питание (11) ос Масса онтрол1003онтр. ль опыт ---- 10 ОХ контр. 53 28, 3+0,4 26,610, 3 123 э 3+44 7,023,29,.4+0,4 28,8+0,3 181,1+8,5 165,8+679 29 35, 010;4 32,.1+О,08, 111 39,4+10, 1 88,4+15,5 26 36,3+0,4 33,2 Ю 362,815,5 99 87 ю 3117 эВ 328 юО+25 эВ 18 38,410,5 35,5+ 7,117,0+4 28,6+ 7 9 316,3+13,8 22 35,010,5 32,9+ 365,0+14,9 ЭОВ,0+16 9 36,8+0,4+О 99 4473+17, 1 9,810 бэ 5+0,7 9 а блиц Преимуществопредлагаемого ага оказатели Прототип посравнению сконтролем,принятым за1003 посо сравнению с контролем, нятым за 10 посо 2 2 ыживаемость величение длин 6,8-7 5 Нет преимущест чин Увеличение масмолоди 0 шение продолжи- ости эмбриональ- развития м тельнного 58 69 81,3+6,4 58,4+12,18 27,7 й 0,4 26,4+03 26 31, 303 29,2+0,31