Способ определения токсичности водной среды

(5)5 0 01 й 33/18 ИСАНИЕ ОБРЕ К ПАТЕНТ Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ ВОДНОЙ СРЕДЫ(57) Использование; в физико-химическом Изобретение относится к методам исследования водных сред с использованием составов для физико-химического анализа и может быть использовано в гидробиологии, гидрохимии и при контроле качества воды.Известен способ определения степени токсичности природных и сточных вод, основанный на ответной реакции гидробионтов различных систематических групп, дающих воэможность получения комплексной оценки токсичности водных сред, Недостатком известного метода является низкая чувствительность и скорость, а также сложность анализа.Целью изобретения является повышение чувствительности, упрощение и ускорение анализа,Для достижения укаэанной цели в способе определения токсичности водной среды путем добавления в нее лейкоформы красителя трифенилметанового ряда и пероксидазы, доведения величины рН до 2,2- 4,8 и физико-химического определения концентрации токсиканта, в воду дополнительно вводят пероксид водорода при соотГ," -Л Г,".1" ЫЮЬ- т: ЕНИЯ анализе, в частности в способе определения токсичности водной среды или контроля воды. Сущность изобретения: способ предусматривает обработку пробы лейкоформой красителя трифенилметанового ряда, пероксидаэой и пероксидом водорода при их соотношении, равном (3 - 10):(0,2-2):(100 - 1000). с доведением рН среды до 2,2 - 4,8 и физико-химическим определением токсиканта, Вода считается токсичной при величине адсорбции выше 0,3 мин экв/л. 4 табл,ношении лейкооснования красителя трифенилметанового ряда: пероксидазы: пероксила водорода = (3-10):(0,2-2,0):(100-1000), а токсичной считают воду с приведенной величиной адсорбции меньше 0,7.Введение пероксида водорода в смесь, состоящую из лейкооснования красителя трифенилметанового ряда и пероксидазы. в предложенном соотношении компонентов позволяет получить перекисно-пероксидаэный комплекс, взаимодействующий конкурентным образом с лейкоформой красителя трифенилметанового ряда и токсикантамивосстановителями, При этом появляется возможность фиксирования наличия токсичных веществ восстановительной природы в той концентрации, в которой они находятся в природной воде, поскольку константы взаимодеиствия красителя с перекисно-пероксидаэным комплексом меньше или равна константе взаимодействия токсикантов-восстановителей с перекисло-пероксидаэным комплексом, Данное свойство предложенной смеси позволяет исключить влияние нетоксичных веществ, имеющих2000569 Таблица 1 Сравнение исследования токсичности пробы, содержащей восстановительный эквивалент (гидрохинон) при различном соотношении компонентов тестирующий смесинизкую константу взаимодействия, и определить наличие только токсикантов-восстановителей в концентрации, в которой они находятся в природной воде.Граничные значения диапазонов, входящих в смесь веществ, определены исходя из следующего, При количестве компонент смеси ниже или выше граничных значений резко снижается чувствительность способа. В табл. 1 приведены данные, .доказывающие работоспособность предложенного диапазона компонент, входящих в предложенную смесь.Величина адсорбции для концентрации восстановителя, принятой за параметр токсичности и равной 3 мкг экв/л , соответствуек величине, приведенной (к единице длины оптического пути, 1 см) адсорбции анализируемой смеси, равной 0,7.Примеры конкретного выполнения.Реагенты готовят растворением 1 мл концентрированного пероксида водорода (10 м л) в дистиллированной воде (1;10000), нэвески фосфорнокислого калия одноэамещенного массой 68 г в 1000 мл дистиллированной воды (рН 4,5), навески массой 50 мг лсйкоосновэния красителя орто-фторпроизводного калахитового зеленого и 1 мл конценгрираванной соляной кислоты в 100 мл дистиллированной воды, навески массой 20 мг перс кс пдазы (удельной активностью 350. 500 ед/мг) в 10 мл дистиллированной воз,анализируемой пробе воды приливают растворы красителя, пероксидазы, пероксида водорода в соотношении обьемов, соогеетственно равных 8:0,5:400, доводят рН среды до 2,2-4,8 с помощью фосфатного буферного раствора. Интенсивность окраси устанавливается в течение 1 мин и сохраняется длительное время, Измеряют адссрбцию анализируемой смеси при дли 5 10 15 20 25 30 35 40 нах волн 633.и 714 нм, соответствующих максимальному и минимальному поглощению соответственно.Установлена линейная зависимость между величиной адсорбции и содержанием токсикантов-восстановителей.В табл, 2 и 3 приведены данные по исследованию предлагаемым способом содержания токсикантов-восстановителей с оценкой токсичности в соответствии с принятой шкалой токсичности, для исследования приняты растворы, содержащие гидрохинон и М-аминофенол,Способ позволяет избирательно оценить токсичность водных природных сред, обусловленную наличием токсикантов-восстановителей в концентрациях, превышающих физиологически опасный уровень, При этом определение токсичности проводится оперативно, с достаточной степенью точности, В табл. 4 приведены данные, отражающие время проведения работ по и редложен ному способу.Формула изобретения Способ определения токсичности водной среды, включающий приведение ее в контакт с тестирующим объектом и оценку параметра токсичности, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения чувствительности, упрощения и ускорения анализа, в качестве тестирующего объекта используют лейкооснование орто-фторпроизводного малахитового зеленого и пероксидазч, после приведения в контакт с тестирующим объектом добавляют пероксид водорода при соогношении лейкооснования, пероксидазы и пероксида водорода (3-10):(0,2- 2,0):(100 - 1000), доводят рН среды до 2,2 - 4,8, в качестве параметра токсичности используют величину адсорбции анализируемой смеси, а токсичной считают воду с величиной адсорбции меньше 3 мкг экв/ л2000569 Продолжение табл.1, - 1, Краситель: пероксидаза: пероксид водорода " 3: 0,2: 100 2, Краситель: пероксидаза: пероксид водорода - 10 . 2,0: 1000 Таблица 2 Результаты химического и биологического определения токсичности смеси, содержащей модельной токсикантвосстановитель гидрохинон;(, гибели рачков за время, чТоксичность анализируемой проЭффективныйвосстановительбы ный эквивалент,мкг экв/лтестируемойсмеси, мол л Не токсична 0,030 0,100 Токсична 0,300 1,000 Таблица 3 Результаты химического и биологического определения токсичности смеси, содержащей модельное вещество восстановительного характера М-аминофенол;(, гибели рачков за время, чЭффективный восстановитель Токсичность анализируемой пробы ный эквивалент, мкг зкв/л М-аминофенола,мол,лНе токсична То жеСодержание модельного токсикантавосстановителя (гилрохинона) в 03 101 103 101 10 ь Содержание модельного вещества0 3 10 1 10 3 10 1 10 Разность адсорбции контрольной и тестируемой смесиРазность адсорбции контрольной и тестируемой смеси