Способ определения жизнеспособности эмбрионов млекопитающих
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Текст
. %38довател ьскийсостепи и Понститут радио тноводство. Сущеляют жизнеспоекопитающих по емости отдельных ныи интервал вреьэование бретенияэмбрио ю светоп ов заопр п,ф-лы, 1 нститут жиесья УССР лектроники: живо опред нов мл оница делен,Бугров, С,Ю,Шеховц указания по использоватехнологии транспланта- НПО по племенному делу М., 1986, с, 23-27, трансплантации эмбритого скота. ВНПО по плевотноводстве М 1987 г(Л ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ С 8 ИДЕТЕЛЬ(56) Методическинию Французскоции эмбрионов. ВВ ЖИВОТНОВОДСТВИнструкция ионов крупного ромен ному делу в жс. 36-38,(54) СПОС СОБНОСТ ЩИХ (57) Испол ность изо СОбнОСть изменени его участк мени. 1 з. ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПМБРИОНОВ МЛЕКОПИТАЮ10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к биотехнологии, и может быть использовано при трансплантацииэмбрионов сельскохозяйственных животных.Целью настоящего изобретения является повышение точности способа.Поставленная цель достигается тем, чтов способе"О 1 рГДВЫНЮГя ЯЩнеспособностиэмбрйонов млекбпйтвющй, включающемпроведение под микроскопом последовательно через интервал времени двух оценоккачества эмбрионов и определение жизнеспособности по результату сравнения этихоценок, согласно изобретению оценку качества эмбриона осуществляют по светопроницаемости различных участков эмбриона,а интервал времени между двумя оценкамикачества эмбрйонов выдерживают 1-3 мин,и по измененйю уровня светопроницаемости судят о жизнеспособности эмбрионов.Эмбрионы, йе имеющие изменений уровней светопройицаемости считают неоплодотворенными яйцеклетками Эмбрионы,имеющие равномерные изменения уровней светопроницаемости считают эмбрионами с протекающими в них процессамидегенерации, Эмбрионы, имеющие незначительные изменения уровней светопроницаемости, но с всплесками измененийуровней светопроницаемости в отдельныхучастках считают жизнеспособными эмбрионами,Предлагаемый способ основан на изменении светопроницаемости отдельных участков живого эмбриона, так называемых,активных зон, связанной со спонтаннымдроблением отдельных бластомеров, возникновением и увеличением блатополостивнутри эмбриона, протеканием различныхбиохимических процессов. Чем больше таких активных зон и чем они отчетливее проявляются, тем выше жизнеспособностьэмбриона.В связи с тем, что определение жизнеспособности производят по интенсивностиизменения светопроницаемости отдельныхучастков за короткий промежуток временимежду оценками в пределах одной стадииразвития эмбриона, то заявляемый способреализуется значительно быстрее нежелипрототип, Соответственно, эмбрион значительно меньше находится в искусственнойсреде вне организма животного, что не приводит к снижению его жизнеспособности.Кроме того, исключается длительный процесс культивирования (24-48 ч).Так как определение жизнеспособности в заявленном способе не зависит отперехода одной стадии развития в другую и способ позволяет определить жизнеспособность эмбрионов на любой стадии, включая позднюю бластоцисту, поэтому точность предлагаемого способа значительно выше по сравнению с прототипом,Кроме того, у способа-прототипа оценка качества эмбриона производится визуально и зависит от субъективных качеств оператора, А предлагаемый способ может быть реализован с помощью автоматических приборов, так как светопроницаемость отдельных участков можно определить только с помощью приборов. Это исключит субьективизм в оценке качества эмбриона и повысит точность определения его жизнеспособности,Предлагаемый способ совершенно безвреден для эмбрионов, позволяет определить дегенеративные а эмбрионы, так как у них дегенеративные процессы и изменения происходят практически равномерно по всей исследуемой части эмбриона, кроме прозрачной оболочки, и поэтому между двумя оценками качества нет резких изменений светопроницаемости отдельных участков,У неоплодотворенных яйцеклеток практически не наблюдается изменений светопроницаемости между двумя измерениями(оценками) и поэтому способ позволяет ихлегко выявить.При анализе патентной и научно-технической информации невыявлены объекты спризнаками, сходными с отличительнымипризнаками заявляемого способа, что даетоснование сделать вывод о соответствиипредлагаемого технического решения критерию "существенные отличия".Предлагаемый способ осуществляютследующим образом,Эмбрионы, вымытые у животного-донора, переносят в стерильную чашку с питательной средой, которую помещают подмикроскоп. Устройство для реализации способа работает совместно с микроскопом,Оценку жизнеспособности эмбрионов проводят отдельно для каждого эмбриона, помещая его изображение с микроскопа нафоточувствительный приемник, Затем через интервал времени в 1 - 3 мин снова проецируют изображение этих же участков нафоточувствительный приемник.Интервал времени для повторения измерений выбран исходя из того, что через1 - 3 мин в эмбрионе произойдет достаточномного изменений, чтобы достоверно изменилась светопроницаемость его отдельныхучастков,За интервал времени менее одной минуты еще не происходит в эмбрионе достаточных изменений для фиксации достоверной информации о жизнеспособности эмбриона.Интервал времени свыше 3 мин не поиводит к увеличению точности определения жизнеспособности эмбриона, а только затягивает сам процесс,Полученные сигналы двух измерений сравнивают и определяют разницу величинь, сигнала от каждого участка при первом и втором измерении. Полученные разностные сигналь 1 обрабатывают, анализируют, например, с помощью ЭВМ и определяют степень жизнеспособности эмбриона, которая прямо пропорциональна количеству активных зон и степени их проявления, Эмбрионы, не имеющие изменений уровней светогооницаемости, считают неоплодотворенными яйцеклетками, Эмбрионы, имеющие равномерные изменения уровней светопроницаемости считают эмбрионами с протекающими в них процессами дегенерации. Эмбрионы, имеющие незначительные изменения уровней светоп роницаемости, но с всплесками изменений уровней свето- проницаемости в отдельных участках считают жизнеспособными амбрлонами.П р и м е р. Предлагаемый способ реализуют с помощью устройства, представленного на чертеже (фиг, 1).Устройство содержит блок 1 преобразования оптической информации и электрические сигналы с предварительной их обработкой и блок 2 анализа и выдачи результата.Блок 1 включает светочувствительный приемник 3 (например, линейка ПЗС - прибор зарядной связи), линию задержки 4, соедине,".ную с выходом светочувствительного приемника 3, усилители 5 и 6 подключенные к выходам светочувствительного приемника 3 и линии задержки 4, соответственно, вычитающее устройство 7, подключенное входами к усилителям 5 и 6, а вы;:одом - к аналого-цифровому преобразователю 8, При этом светочувствительный и риемник 3, линия задержки 4 и аналогоцифровой преобразователь 3 соединены со схемой синхронизации 9.Блок 2 включает сумматор 10, подключенный к выходу аналого-цифрового преобразователя 8, сравнивающее устройство 11, соединенное с выходамл сумматора 10 и генератора 12 опорного сигнала, К выходам сравнивающего устройства 11 подключен индикатор 13 и схема совпадения 14, Второй вход схемы совпадения 14 подключен к выходу аналого-цифрового преобразователя 8. К выходу схеми совпадения 14 через узел согласования 1"; подключена ЭВМ 16,( 5 10 15 20 25 30 35 д 0 50 55 Способ реализуется следующим образом.Эмбрион в часовом стекле (чашке) с питательной средой помещают под микроскоп на чертеже не показан). Множество изображений отдельных участков эмбриона проецируют через микроскоп на светочувствительный приемник 3 блока 1, Затем через определенный интервал времени множество иэображений тех же участков эмбриона со светочувствительного приемника 3, в виде аналогового сигнала поступает через усилитель 5 на вычитающее устройство 7. Одновременно с этим на вычитающее устройство 7 поступают сигналы предыдущего измерения, задержанные в линии задержки 4 и усиленные с помощью усилителя 6,В вычитающем устройстве 7 получают разность аналоговых сигналов двух последовательн ых измерений-оценок Э(разность амплитуд сигналов), которые поступают в аналого-цифровой преобразователь 8 и преобразуются в цифровую последователь ность.Для синхронизации работы блока 1 служит схе а синхронизации 9,Далее сигналы в цифровом виде от аналого-цифрового преобразователя 8 поступают в сумматор 10 блока 2. ,где происходит их сложение, Суммарный сигнал с сумматора 10 поступает на сравнивающее устройство 11 и сравнивается с опорным:игналом, поступившим от генератора 12 опорного сигнала.Если величину сигнала на выходе с сумматора 10 не превышает опорного сигнала от генератора 12 опорного сигнала, дальнейшая обработка сигнала прекращается, что отражается на индикаторе 13.В этом случае оценке подлежала неоплодотворенная яйцеклетка, где уровень биохлмических процессов и мофологических измененлй крайне низкий,Если величина сигнала на выходе сумматора 10 превышает опорный сигнал от генератора 12 опорного сигнала, то сигнал с выхода сравнивающего устройства 11 поступает на схему совпадения 14. куда одновременно поступают сигналы в цифровом виде с аналого-цифрового преобразователя 8. С выхода схемы совпадения 14 сигналы через узел согласования 15 поступают на ЭВМ 16, где происходит их дальнейшая обработка по заранее заданной программе,Алгоритм обоаботки на ЭВМ 16 сводится к определению средней арифметической разностей амплитуд поступивших сигналов. Далее из средней арифметической величины поступивших сигналов вычитаются по1768153 30 35 40 45 50 Составитель Ю. МегельРедактор В, Трубченко Техред М,Моргентал Корректор М. Ткач Заказ 3598 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 отдельности величины каждого поступившего сигнала и результаты возводятсяв квадрат по отдельности. Полученные результаты суммируются.Жизнеспособность эмбрионов прямо пропорциональна сумме разностей средней арифметической поступивших сигналов с этими сигналами возведенных в квадраты, отражающих характер и степень измененйя светопронйцаемости отдельных участков эмбриона между двумя йзмерениями,Таким образом, предлагаемый способ, совершенно безвредный для эмбриона, обладает более высокой-точностью по сравнению с прототипом за счет объективной оценки с помощью высокоточных приборов и значительно сокращает время определения жизнеспособности эмбриона (в 300 - 400 раз), От оператора, обслуживающего устррйство для реализации способа, не требуется высокой квалификации и напряжения.За счет сокращения времени определения жизнеспособности уменьшается время от вымывания эмбриона от донора до его пересадки реципиенту, что не снижает жизнеспособность эмбрионов, повышая ее приживляемость (см, акт исследования зависимости времени хранения эмбрионов крупного рогатого скота на их приживляемость).Повышение точности определения жиз неспособности повышает выход приплодаот реципиентов и исключает потери живых эмбрионов. Формула изобретения 10 1, Способ определения жизнеспособности эмбрионов млекопитающих, включающий проведение двух оценок качества эмбриона, разделенных интервалом времени, и определение его жизнеспособно сти по результатам сравнения этихоценок, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа, качество эмбриона оценивают по показателю светопроницаемости различных его участ ков, и к жизнеспособным относят эмбрионы, которые имеют резкие изменения уровней светопроницаемости в отдельных участках.2. Способ по и, 1, о т л и ч а ю щ и й с я 25 тем, что интервал времени между оценкамиравен 1-3 мин,
СмотретьЗаявка
4814717, 16.04.1990
НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА ЛЕСОСТЕПИ И ПОЛЕСЬЯ УССР, ХАРЬКОВСКИЙ ИНСТИТУТ РАДИОЭЛЕКТРОНИКИ ИМ. ЯНГЕЛЯ
МЕГЕЛЬ ЮРИЙ ЕВГЕНИЕВИЧ, БУГРОВ АЛЕКСЕЙ ДМИТРИЕВИЧ, ШЕХОВЦОВ СЕРГЕЙ ЮРЬЕВИЧ, ШЕХОВЦОВА ЕЛЕНА ЮРЬЕВНА
МПК / Метки
МПК: A61B 10/00, A61D 19/04
Метки: жизнеспособности, млекопитающих, эмбрионов
Опубликовано: 15.10.1992
Код ссылки
<a href="https://patents.su/4-1768153-sposob-opredeleniya-zhiznesposobnosti-ehmbrionov-mlekopitayushhikh.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения жизнеспособности эмбрионов млекопитающих</a>
Предыдущий патент: Система для промывания матки
Следующий патент: Протез полого органа
Случайный патент: Дифференциальный электростатический вольтметр