Способ определения жизнеспособных семян растений

(56) 1. Зерновые, бобовые и масличные кулЬтуры, ГОСТ 12038-66, М., Изд-во стандартов, 1976.2. Авторское свидетельство СССР Кф 372975, кл. А 01 С 7/00, 1970, (54)(57) 1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ СЕМЯН РАСТЕНИЙ, включающий воздействие на мертвые и определяемые семена факторов, вызывающих биохемилюминесцентное свече 1 1488 А ние и сравнение полученных показателей, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и ускорения определения, в качестве фактора, вызывающего биохемилюминесцентное свечение используют свет с длиной волны 400-700 нм, а в качестве показателя биохемилюминесцентного свечения определяют показатель радикалорекомбинационной люминесценции, причем воздействия оказывают на воздушно-сухие семена.2. Способ по п. 1, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что к кизнеспособным относят семена, имеющие показатель радикалорекомбинационной люми- Е несценции в 1,5-4,0 раза нике, чем у мертвых семян.1 1131Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть примененов селекции и растениеводстве в оценке семенного материала.Известен способ определения жиз5неспособности семян растении путемокрашивания их индигокармином, кислымфуксином, тетразолом и другими органическими красителями, заключающийсяв отборе и предварительном замачивании семян в воде в течение 7-.15,ч,разрезании их, помещении в растворкрасителя на 2-3 ч, сливании растворакрасителя, промывании семян водой иопределении их жизнеспособности поокрашиванию. К жизнеспособным относят семена, зародыш у которых неокрашивается индигокармином (в си"ний цвет) или кислым фуксином (в розово-красный цвет), а окрашиваетсятетразолом (в красный или малиновыйцвет) 111 .Недостатками этого способа являются низкая точность определения,субъективность определения, посколь-ку степень скрашивания определяетсявизуально, потеря семян для дальнейшего хранения или выращивания, чтоисключает использование способа длярешения целого ряда проблем генетики и селекции, поскольку способпредусматривает уничтожение анализируемого зерна.Известен также способ определения жизнеспособности семян растений,заключающийся в отборе 100-1000 семян 35их предварительном замачивании в течение 8-12 ч, помещении в темнуюкамеру квантометрической установки,приливании к ним раствора НОи регистрации в течение 5-15 мин возни Окающего сверхслабого свечения, по которому устанавливают жизнеспособностьсемян 2 488 2пользуют свет с длиной волны 400700 нм, в качестве показателя биохемилюминесцентного свечения определяют показатель радикалорекомбинационной люминесценции, причем воздействие оказывают на воздушно-сухиесемена.К жизнеспособным относят семена,имеющие показатель радикалорекомбинационной люминесценции в 1,5-4,0 раза ниже, чем у мертвых семян.Используемый для вызывания радикалорекомбинационной люминесценции(послесвечения) свет с длиной волны400-700 км представляет собой область"видимого света", Для получения егоиспользуют лампы накаливания.Определение жизнеспособности семянрастений проводят следующим образом.П р и м е р 1. Берут контрольнуюпробу предварительно убитых семянсои (или хранившихся в течение 810 лет), которые имеют жизнеспособность, равную 0 (не способны к прорастанию), помещают в установку длярегистрации радикалорекомбинационнойлюминесценции, которую индуцируютсветом с длиной волны 400-700 нм, изменяют величину радикалорекомбинационной люминесценции. Она равна128,0 + 5,1 отн. ед,Берут испытываемые семена в количестве 10 шт, неизвестной жизнеспособности, помещают в установку длярегистрации радикалорекомбинационной люминесценции, которую индуцируют светом с длиной волны 400-700.нм,Измеряют величину радикалорекомбинационной люминесценции для каждого из,10 семянРезультаты представлены в табл.1. Т а б л и ц а 1Отношение 34 3,7 2,4 Недостатками данного способа явля"ются длительность определения(с предСемена Интенсивварительным замачиванием определение сои занимает 9-12 ч), невозможность индивидуального отбора жизнеспособныхсемян, потеря зерна для дальнейшегохранения или выращивания, низкая 50точность определения. ценцииЦель изобретений - повышение точности и ускорение определения индивидуальной жизнеспособности. 1Поставленная цель достигается 55.тем, что согласно известному способу 2 46 в качестве фактора, вызывающегобиохемилюминесцентное свечение ис 53- нежизнеспособные.Из табл. 1 видно, что семена, им щне отношение показателя радикалорекомбинационной люминесценции ниж 1,5 (1,35), не прорастают, а имеющ показатель вьппе 1,5 (1,52) - прорастают. т.е. являютсяжизнеспособнП р и м е р 2. Берут контрольн пробу предварительно убитых семян которые имеют способность к прорас танню, равную О. Помещают в устано ку для регистрации радикалорекомби национной люминесценции, которую и цируют светом с длиной волны 400- 700 нм, измеряют величину радикало рекомбинационной люминесценции, он равна 83,0;Е 4,1,Берут испытываемые семена ржи 10 шт. неизвестной жизнеспособности, помещают в установку для регис рации радикалорекомбинационной люм несценции, которую индуцируют тем же светом.Результаты п О,30 я тиредставлены в табл. Таблица 7,2,75 ие Из табл. 2 видно, что семена ржи, имеющие показатель отношений радикалорекомбинационной люминесценции (РРЛ) ниже 1,5 (1,39; 1,4), не прорастают. т.е. являются нежизнеспособными. вПредварительное выдерживание семрастений в атмосфере с различной нд 35 влажностью показало, что при низкъй атмосферной влажности (при которой естественно и семена имеют также низкую влажность - воздушно-сухие семена) отношение РРЛ нежиэнеспособ 40 ных семян к жизнеспособным повышается и регистрируется в пределах 2,5-4 раза.Причем отношение РРЛ живых семяни мертвых при указанной влажности45 выше 4,0 в проведенных исследова, ниях не наблюдалось. При повышении влажности семян всегда сохраняется большая величина радикало" рекомбинационной люминесценции у а 50 нежизнеспособных семян, но отношение уменьшается до 15, что уменьшает точность определения.Предлагаемый способ обладает1003-ной точностью определения по 55 сравнению с 903-ной по известно" му, время определения сократилось до 15 мин для 100 семян по сравнению с 12 ч в известном способе.Заказ 9649/1 Тираж 721 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Предлагаемый способ обеспечивает сокращение ручного труда, возможность автоматизации процесса и определение индивидуальной жизнеспособности отдельных семян, проведение 5 отбраковки (сортировки) нежизнеспособных семян, которые нужно исключать из семенного материала и сортировки селекционного материала, полезных гибридов и мутантов, количество ко торых обычно ограничено и отбор жизнеспособных семян может позволить проводить биохимические исследования на нежизнеспособных семенах, а жизнеспособные использовать для дальнейшего.разМножения.Кроме того, по количеству жизнеспособных семян в партии, определенному предложенным способом, может быть рассчитан такой важный показатель, как жизнеспособность семян.Проведение исследования показали, что рассчитанный таким образом показатель жизнеспособности для семян сои, ржи, и риса имеет 1003-ную точность