Способ расфасовки спермы в соломинки

Союз СоветскихСоциалистических,Республик1 ОП ИСАНИЕизовитенилК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ и 856455(5 )М. Кл, А 6107/02 Ъоударставннмй комитет СССР ао делам иэобретений и открытий(72) Авторы изобретения И, Х. Хабибулин, А. А, Луканенков и Г, М. Кузнецов Башкирский научив-исследовательский институт сельского хозяйства о(54) СПОСОБ РАСФАСОВКИ СПЕРМЫ В СОЛОМИНКИ Изобретение относится к искусственному .осеменению животных, в частности к способам расфасовки спермы перед ее замораживанием.Известен способ расфасовки спермы в сопоминки путем предварительного ваку- ф умирования камеры и последующего взаимодействия соломинок с поверхностью спермы 11.Недостатком способа является го, что после вакуумирования камера наполняется воздухом, который попадает в соломинки и насыщает сперму кислородом воздуха (явление оксигенации). Кроме та о,в сопоминках после их заполнения спермойтЗ остаются открытыми вторые концы, что нарушает правила стерильного хранения спермы и приводит к ухудшению оплодотворяющей способности спермиев,ЗфИзвестен также способ расфасовки разбавленной спермы путем вакуумирования емкости со спермой с размещенными в ней соломинками 2. 2Недостаток способа заключается в том,что при заполнении соломинок, воздух изпоследних проходит через слой спермы,вызывая ее аксигенацию, что ухудшаег качество спермиев,Цель изобретения - повышение стерильности спермы,Поставленная цель достигается тем,что заполнение соломинок спермой на 8 О 85% их обьема осуществляют путем наполнения камеры инертным газом до давле фния 225-230 мм рг.сг., затем соломинки -переводят в газовое пространство камерыи на 5% обьема заполняют инертным газом путем дальнейшего увеличения давления в камере до 300-305 мм рг.ст., затем соломинки погружают в поаотретыйжелатин и оставшийся свободный обьем ихзаполняют жепатином при нормапьном давлении,Способ осуществляется следующим образом.Соломинки закрепляют в вакуумной камере надемкосгью со спермой и камерутерильно 2 3 9 34 2 6 3 8564 вакуумируют до 15 мм рт.ст. Соломинки открытыми концами опускают до взаимодействия с поверхностью спермы. Затем в камеру медленно подают инертный газ и увеличивают давление до 225 мм рт.ст,5 В результате соломинки заполняются спермой на 85% объема. Затем соломинки переносят в газовую среду и подачей инертного газа увеличивают давление в камере до 300 мм рт.ст., что обеспечивает наполкение соломинок инертным газом на 5% обьема.Наполненные спермой и инертным газом соломинки опускают в подогретый до 36. С желатин, который вводят в соло-15 минки путем увеличения давления в камере с 300 мм рт.ст. до атмосферного, )Келатин затвердевает и образует защитную пробку, В процессе низкотемпературного замораживания происходит расширение 20 пробки, что обеспечивает надежную герметизацию спермы в жидком азоте.П р и м е р 1. Две партии соломинок закрывают желатиновыми пробками (опыт), а две оставшиеся партии оставляют с от крытым с одной стороны концом соломинки(контроль).Расфасованню в опытные и контрольные соломинки стерильную жидкость замораживают. в парах жидкого азота, а затем пог- З 0 ружают в жидкий азот (-196 С) на длительное хранение, Через 4 мес, расфасованную в опытных и контрольных соломин 58 4ках жидкость размараживают при 38 оС вводяной бане.Одну партию опытных и контрольныхсоломинок оставляют в жидком азоте дпяболее продолжительного хранения.В стерильном боксе поверхность размороженных соломинок обрабатывают тампоном, смоченным спиртом-ректификатом.Стерильными ножницами обрезают конецсоломинки, вводят его в стерильную пробирку, а затем обрезают верхний конец.Содержимое соломинок выливают в пробирки, затем дополнительно разбавляютстерильным изотоническим раствором лиминнокислого натриядоведя до разведений 1: 10 и 1: 100.Для определения общего числа микроорганизмов применяют стерильный 2%-ныймясо-пеп тонный агар ( М ПА ), Материалы изразведения 1:10 и 1;100 высевают вобьеме 1 мл в чашки Петри с МПА, которые инкубировали при 37 С в течениео24 ч, Количество микробных тел определяют по среднему значению в одном миллилитре,Из каждой парии опытных и контрольных соломинок исследуют по 20 проб,Микробная загрязненность изотонического раствора лимоннокислого натрия, расфасованного в соломинках разной степени герметизации, после четырехмесячногохранения в"жидком азоте при.-19 УСпредставлена в таблице856455 Продолжение таблицы Количество микробных тел в 1 мл исследуемого материала Проба,%Контроль Опыт 74 22 18 20 4Составитель А. ФилипповаРедактор Н, Егорова Техред М. Коштура, Корректор Н. Стец гЗаказ 7033/3 Тираж 687 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Из таблицы видно, что в загерметизированных желатиновыми пробками соло минках загрязнения жидкости практически не происходит,оФормула изобретения Способ расфасовки спермы в соломинки, включающий вакуумироеание камеры до .10-15 мм рт.ст., погружение соломинок в сперму и их заполнение спермой при 0 наполнении камеры газом, о т л и ч а - ю щ и й с я тем, что, с целью повышения стерильности спермы, заполнение соломинок спермой на 80-85% их объема осуществляют путем наполнения камеры инертным газом до давления 225-230 мм.рт.ст., затем соломинки переводят в газовое пространство камеры и на 5% объема заполняют инертным газом путем дальнейшего увеличения давления в камередо 300-305 мм рт.ст., затем соломинкипогружают в подогретый желатин. и оставшийся свободный объем их заполняют желатином при нормальном давлении.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Авторское свидетельство СССР