Способ определения жизнеспособности личинок i возраста подкожных оводов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1787402 с 5)5 А 01 К 67/02 10/О ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕ АВТО сследовательский томологии и арахлезни крупно ленном откор олос", 1977, с та тесЬп 9 цез сссез адапзт ЕхрегГпепта 102-106.Я ЖИЗНЕСПОЗРАСТА ПОДосится к ветеринарной Изобретение паразитологии и для определения стентности личин сектицидам. ходит длительГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОВЕДОМСТВО СССР(56) Р.Дженсен, Д,Маккей. Бого рогатого скота при промышме. Пер, с англ, Москва, "К250-259,Веезеу ЮЯ. Ехрегп 1 епаког ечаЦтоп о 1 зузтевс пзесох магЫе 1 в агчае//Рагазтооду, 1962, чо, 12, р.(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИСОБНОСТИ ЛИЧИНОК 1 ВОКОЖНЫХ ОВОДОВ может быть использовано чувствительности и резиок подкожных оводов к инИзвестен способ определения жизнеспособности личинок 1 возраста подкожных оводов, при котором насекомых культивируют в искусственной питательной среде Игла на основе солевого раствора Эрла, а смерность определяют визуально по цвету и внешней структуре особей, Недостаток известного способа - большая трудоемкость, так как необходимо рассматривать каждую особь в отдельности, малая точность и большая продолжительность выявления живых и погибших личинок, потому что между гибелью насекомых и заметным распадом тка(57) Изобретение относится к способам определения жизнеспособности насекомых различных стадий развития, в частности идентификации живых и погибших личиноквозраста подкожных оводов в искусственной питательной среде, Цель изобретения - сокращение срока и повышение точности индентификации живых и погибших особей. Для определения жизнеспособности оводов на них воздействуют световым раздражителем (освещенность 2 - 4 тыс, лк) в течение 9 - 12 ч, причем располагают личинок на границе светотени и по отрицательному фототаксису определяют выживаемость, Способ используют для определения чувствительности личинок оводов к инсектицидам, 1 з.п. ф-лы, 2 табл. неи с изменением цвета проный, от 1 до 3 суток, период,Цель изобретения - сокращение срока и повышение точности идентификации живых и погибших личиноквозраста подожных оводов.Поставленная цель достигается тем, что личинок культивируют в темноте в искусственной питательной среде Игла на основе солевого раствора Эрла при 37 - 38 С в течение 24 ч, затем после периода адаптации насекомых включают световой раздражитель с освещенностью 2 - 4 тыс, люкс (лк), располагая при этом личинок на границе светотени и оставляют их в таких условиях на 9 - 12 ч, При определении выживаемости особей в питательной среде используют физиологическую особенность личинок оводов - отрицательный фототаксис. При этом жи-.1787402 Таблица 1 Фотоактивность личинок 1 возраста падкокных оводов вые личинки во время культивирования мигрируют в темную часть площади, а погибшие остаются на освещенной,Наблюдения показали, что яркость света влияет на реакцию этих насекомых и скорость передвижения. При этом определен световой оптимум, при котором проявляется наивысшая активность, Наиболее быстрая (1,11 - 1,32 мм/ч) миграция личинок в сторону тени за 9 - 12 ч происходит при освещенности 2 - 4 тыс. лк при выживаемости 80 - 90 особей (табл,1). Дальнейшее увеличение освещенности не оказывает заметного влияния на скорость перемещения, а выживаемость личинок даже снижается.П р и м е р, Определение жизнеспособности особей после их обработки инсектицидами проводят на личинкахвозраста подкожных оводов крупного рогатого скота,Личинок собирают в эпидуральном жире спинномозговых каналов или в подслизистом слое пищеводов из туш только что убитых животных и отмывают в физиологическом растворе с антибиотиками, После чего личинок переносят в матрасы (по 10 - 15 особей в каждый матрасемкостью 250 мл) с искусственной питательной средой Игла (рН 7,2 - 7,4), образующей тонкий (2 - 3 мм) слой на их дней. Матрасы помещают в термальную комнату (или термостат) для инкубации в темноте при 37 38 С в горизонтальном положении, Через 24 ч матрасы вынимают из термостата и опытные группы личинок подвергают обработке в течение 30 мин водными растворами инсектицидов, а контрольную - водой.Затем матрасы с опытными и контрольными личинками помещают под источник света (освещенность 2 тыс, лк) и накрывают светонепроницаемым матеоиалом таким образом, чтобы на их дне образовалась светотень, Личинок размещают вдоль границы светотени на светлой стороне матрасов и продолжают культивировать при 37 - 38 С 12 ч. После этого подсчитывают количество личинок оставшихся на освещенной стороне матрасов, как в опытных, так и контрольной группах и считают их погибшими, а переместившихся за это время в темную часть - живыми. 10 15 20 25 30 35 40 45 Результаты опыта, отраженные в табл,2, показывают, что наиболее эффективным препаратом с быстрым ларвицидным действием является ДДВ Ф, который в 0,01 Д-ной концентрации вызывает полную гибель личинок, а в 0,002/,-ной - 60,0 . Для достижения подобного эффекта при использовании хлорофоса необходима в 5 раз большая концентрация, а перметрин вообще не вызывает гибели личинок в сравнении с контролем, за взятый нами промежуток времени во всех разведениях.Данный способ обеспечивает точное определение жизнеспособности личинок, так как основан на физиологии личинок оводов данного возраста, Способ позволяет сократить время определения смертности личинок в 2 и более раз. Кроме того, этот способ менее трудоемок, так как нет необходимости исследовать каждую личинку.Использование способа в практике экспериментальной ветеринарной паразитологии облегчит проведение первичного скрининга инсектицидов, определения рациональных дозировок и эффективного времени воздействия, а в случаях возникновения у личинок устойчивости - ее выявление, что в конечном итоге послужит совершенствованию средств и методов борьбы с подкожными оводами и снизит ущерб, причиняемый этими насекомыми животноводству,Формула изобретения 1. Способ определения жизнеспособности личиноквозраста подкожных оводов, включающий культивирование их в искусственной питательной среде, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью сокращения срока и повышения точности идентификации живых и погибших особей, на личинок воздействуют световым раздражителем в течение 9 - 12 ч, причем располагают их на границе светотени и по отрицательному фототаксису определяют выживаемость.2, Способ по п,1, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что в качестве светового раздражителя используют источник освещения в(2-4) 10 лк.1787402 Продолжение т а б л, 1 П р и м е ч а н и е, В каждой группе находилось 10 личинок Таблица 2 Выживаемость личинок оводов в питательной среде после 30-минутного контактирования с инсектицидамиСоставитель А,ОкуневТехред М.Моргентал Корректор С,Патрушева Редактор Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Заказ 19 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5