Устройство для извлечения ооцитов из изолированного яичника

(21) 4835873 (22) 06,06,90 (46) 30.07.92 (71) Главный (72) В,И. Лим (56) Вгаспей М 1, с. 189-2 Бюл, М 28ботанический сонов и Н.И. ЛиВ.б, 1980, Во05. АН СССРнову Кергоб, 23. ВЛЕЧЕНИЯ ННОГО ЯИЧ- льскохоэяйстдству, испольживотных, дника, к кото(54) УСТРО ООЦИТОВ И НИКА (57) Устройст венной биол зуется для Устройство с ИСТВО ДЛЯ ИЗ3 ИЗОЛИРОВА во относится к се ОГИИ И ЖИВОТНОВОразмножения остоит из перехо ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР Изобретение относится к области сельскохозяйственной биологии и животноводству и может быть использовано для извлечения ооцитов из изолированных яичников в лабораторных условиях с целью культивирования, оплодотворения и использования их для последующей трансплантации,Значимость этих исследований обусловлена необходимостью использования огромного резерва зародышевых клеток (ооцигов) от выдающихся по продуктивным гоказателям коров. За весь период хозяйственного использования от таких животных получают не более 7 - 8 потомков, в то время как в яичниках каждого животного содержится порядка 200 тысяч зародышевых клеток и этот ценный генетический резерв теряется сосдачей животного на мясокомбинат. В настоящее время во многих лабораториях мира ведутся эксперименты по рому жестко прикреплены иглы 2 и 3 одинаковой длины. Иглы 2 и 3 посередине их дли ны жестко фиксированы фиксаторам 4. обеспечивающим устойчивое положение игл и необходимый зазор между ними. Игла 2; наружный диаметр которой равен 0,3 мм, сообщается с каналом шприца 5 и служит для подачи среды в полость фолликула. Игла 3 с наружным диаметром 0,5 мм через гибкий катетер 6 служит для отвода промывной жидкости 7 из полости фолликула в приемник 8. Расстояние между внешними краями игл 2 и 3 составляет 1,5 мм, что позволяет извлекать ооциты из фолликулов имеющих диаметр не менее 2,0 мм, 1 ил. использованию этого резерва с целью получения достаточно большого количества зародышей, а от пересадки последних самкам-реципиентам добиться многократного увеличения количества потомков от ценных в генетическом плане коров. Реализация этой проблемы требует разработки и усовершенствования новых методических приемов. в том числе и по вопросу извлечения ооцитов из изолированных яичников.Известны два устройства для извлечения ооцитов из изолированных яичников. Одно из них представляет собой блок параллельно вставленных бритвенных лезвий, которым надрезают поверхность яичникэ, затем многоразовым обмакиванием яичника с надрезами в чашке Петри со средой смывают ооциты из разрезанных фолликулов, Данное устройство позволяет сравнительно быстро производить извлечение ооцитов. Недостатком его является то, что1750679 5 О 15 20 Устройство функционирует следующимобразом,5Перед использованием его стерилизуюткипячением в разобранном виде, а послестерилизации и сборки внутренние каналыустройства промывают стерйльной средой.В шприц 5 емкостью 10 м набирают среду .7 и насаживаютна наконечйик шприцапереходник 1 с йараллельно спареннымииглами 2 и 3, На тыльный конец отводящей иглы 3 подсоединяют приемник 8 посредством гибкого катетера 6. Берут изолированный яичник и фиксируют его в удобном для манипуляции положении. Собранным устрой. ством производят прокол стромы яичйика касательно к дну фолликула, После входа острых концов игл 2 и 3 в полость фолликула легким нажатием на шток шприца 5 подаютв фолликул среду 7 через канал иглы 2. Объем среды, достаточный для смыва ооцита из фолликула, составляет 2 мл и подается в один прием, Под воздействием возникаю-щего давления жидость из полости фолликула через канал отводящей иглы 3 и гибкого катетера 6 поступает в приемник 8, при этом в самой полости фолликула в период подачи среды возникает вихревая циркуляция жидкости, подвоздействием которой ооцит легко срывается с фиксирующей его ножки.Благодаря большему сечению внутреннего канала отводящей иглы 3 относительно иглы 2 исключается риск разрыва стенки фолликула при подаче среды в его полость, В таком порядке производят промывание других поверхностных фолликулов, причем одной заправки шприца средой достаточно для обработки 5 фолликулов, Насадку с па 30 параллельно спаренных игл одинаковой 35 40 45 50 лы ограничивает увеличение давления промывной жидкости в полости фолликула ипредохраняет стенку фолликула от разрыва,одновременно с ооцитами смывается из надрезов и тканевая жидкость, содержащая ряд продуктов распада. которые негативно влияют на качество извлеченных ооцитов,Другое устройство представляет собой шприц с насаженной иньекционной иглой, Извлечение ооцитов с помащью этого устройства производится следующим образом, В шприц набирают около 5 мл среды, конец иглы вводят через строму яичйика в полость фолликула и Ь - б кратным приемом отсос-заполнение-отсос достигают извлечения ооцита из фолликула. Данное устройство.позволяет производить эту процедуру более асептично и исключает возможность попадания тканевой жидкости в среду с извлеченными ооцитамиНедостатками устройства являются длительная процедура извлечения из-за необходимости многократной аспирации, возможность разрыва стенки фолликула при подаче жидкости в его полость и сравнительно низкий показатель извлечения ооцитов.Целью изобретенияявляется ускорение процесса извлечения ооцитов из иэолированного яичника без нарушения правил асептики. обеспечение высокого уровня извлечения ооцитов и исключение возможности попадайия в вымывную среду тканевой жйдкости.Поставленная цель достйгается устройством, включающим шприц с насадкой для прокола стенки фолликула, отличительным признаком которого является наличие двух длины, жестко фиксированных к переходнику, игла меньшего диаметра предйаэначена для подачи среды в фолликул, а игла больщего диаметра служит для отвода жидкости из фолликула в приемник Новым в устройстве является насадка с двумя параллельно расположенными иглами, Иглы ступого конца жестко фйксированы к переходнику, а посередине их длины установлен дополнительный фиксатор, который обеспечивает необходимый зазор между иглами, Канал иглы меньшего диаметра через переходник сообщается с каналом шприца, Параллельное расположение игл создает вихревой поток промывной жидкости в полости фолликула, который обрывает ооцит от фиксирующей его ножки. Большее внутреннее сечение отводящей игАпробация предлагаемого устройства вэксперименте более чем на 500 фолликулах с диаметром от 2 мм и более показала предельно возможную эффективность (100извлекаемости ооцитов).На чертеже показано предлагаемое устройство,Устройство состоит из переходника 1, ккоторому жестко фиксированы иглы 2 и 3одинаковой длины, Иглы 2 и 3 посерединеих длины жестко фиксированы фиксатором4, обеспечивающим устойчйвое положениеигл и необходимый зазор между ними. Игла2, наружйый диаметр которой равен 0,3 мм,сообщается с каналом шприца 5 и служитдля подачи среды в полость фолликула, Игла .3 с наружным диаметром 0,5 мм через гибкий катетер 6, служит для отвода промывнойжидкости 7 из полости фолликулав приемник 8. Расстояние между внешними краямиигл 2 и 3 составляет 1,5 мм, что позволяетизвлекать ооциты из фолликулов, имеющихдиаметр не менее 2,0 мм.1750679 Составитель О.КонстантиновТехред М.Моргентал Ре Т,Пилипченко ректор В,Гирн Заказ 2639 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 оизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгор Гагарина, 10 раигольной системой можно подсоединить к шприцу через стандартный трехходовой краник, что позволит производить заправку шприца средой без предварительного снятия насадки, Простота конструкции устройства способствует быстрому приобретению навыка по извлечению ооцитов, а время, затрачиваемое на обработку одного яичника, не превышает таковое при использова.нии устройства для надрезов поверхностияичника; Формула изобретения Устройство для извлечения ооцитов изизолированного яичника, включающее шприц с насадкой для прокола стенки фолли 5 кула, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что, с цельюповышения Эффективности эксплуатации, насадка Состоит из двух параллельно спаренных игл одинаковой длины; при этом игла, предназначенная для подачи среды а фолли кул, имеет диаметр, меньший, чем игла дляотвода жидкости из полости фолликула.