Способ отбора форм озимой ржи, устойчивых к предуборочному прорастанию

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 049 А 9) (1) 51)5 А 01 Н 1/04 с ( О ОБРЕТЕНИЯ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ ледовательскии ,Лаврукович и иц - МКо ОРМ ОЗИМОЙ ЕДУБОРОЧНОИзобрете гии, в частнос белков растен но в селекции ие относится к биотехнолои к биохимическим анализам ий, и может быть использована повышение качества зер ааааа Рожь обладает наибольшей из всех зерновых культур склонностью к предуборочному прорастанию на корню. Прорастание зерна в колесе снижает не только технологические, но и посевные и урожайные свойства, приводя в отдельные годы в 500-ной потере урожая озимой ржи,Цель изобретения - повышение точности анализа и ускорение отбора.Способ состоит в том, что отбор ведут, оценивая активность ингибиторов протеаэ, участвующих в инактивировании группы амилазного комплекса, т.е. оценивая степень ингибирования "амилаэы прорастания", что позволяет вести целенаправленный отбор высокоустойчи) ОСУДАР СТВ Е ННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИРИ ГКНТ СССР(57)Изобретение относится к биотехнологии и касается биохимического анализа белков растений. Возможно применение в сельском хозяйстве при селекции на повышение качества зерна. Целью изобретения является повышение точности анализа и ускорение отбора, Способ состоит в том, что анализируют спектр ингибиторов протеаз, полученный в результате диск-электрофореза белков ржи, при этом отбирают формы, содержащие компоненты с максимальной выраженностью, шириной и минимальной подвижностью для данной популяции. 1 табл. вых форм с генетически обусловленной устойчивостью к предуборочному прорастанию.Способ включает экстракцию белков, их диск-электрофорез с получением белкового спектра, последующий анализ на содержание ингибиторов протеаз, оценку компонентов, участвующих в ингибировании амилаз прорастания и отбор форм, содержащих компоненты с максимальной выраженностью, шириной и минимальной подвижностьюдля данной популяции.П р и м е р 1, Зерновки каждого образца по 50 шт раздавливают, заливают трис-глициновым буфером рН 8,3, оставляют на холоде на 3 чперед электрофореэом добавляют сахарозу до 40-ной концентрации, электрофореэ проводят в пластинах ПААГ, 8,5;, 1,5-2 ч, Белки окрашивают амидошварцем в смеси с кумаси голубым.Приготовление реактивов геля: АщрН 891 Ь.НС 1 48 млтрис 36,6 гтэмэд 0,23 млВода димирализованная До 200 млБщАкЗОгМБА 0,8 гВода димирализованная До 200 млВщПСА 0,56 г,Вода До 100 млГщНС 48 млтрис 6 гтэмэд 0,46 млВода Цо 100 млДщАК 10 гМБА 2,5 гВода До 100 млЕщСахароза 40 гВода До 100 млРфРибофлавин 4 мгВода До 100 млНижний гель: 2 объема Ащ, 4 объемаБщ, 1 объем Вщ,Верхний гель: 1 объем Гщ, 3 объема,Дщ,1 объем Ещ, 1 объем Рф,.Отбирают обраЗцы с преобладанием генотипов с достаточной выраженностью, шириной и низкой подвижностью фракцийверхней части спектра.Изучены 32 образца озимой ржи по подвижности компонентов в верхней частиспектра, их выраженности и ширины, Отобраны 2 образца (Ганна и Жодино) с подвижностью 14, 13, выраженностью 5баллов, шириной 5 мм и высеяны в поле.Проведен трехкратный пересев и оценкапотомства в сравнении с неотобраннымиобразцами, данные приведены в таблице.Из таблицы видно, что образцы, выделенные по оценке показателей по предлагаемому способу, в провокационных условиях на8-е сут проращивания не имеют проросшихзерен (1985-1986 г) либо имеют самый низкий процент таких зерен (1987 г). При оцен 5 ке образцов по известным способамточность недостаточная: активность компонентов амилазы прорастания непостояннаяпо годам или отсутствует, например у образца Таловская в 1985 г 5 мм, в 1986 г 3 мм, в10 987 г отсутствует,Пример 2, Берутсемьисортаозимойпшеницы ржи Крупнозерная по 15 зеренкаждой семьи, Электрофорез полученногоматериала и анализ электрофореграмм про 15 водят аналогично примеру 1. Отобранысемьи с преобладанием генотипов с достаточной выраженностью, шириной и низкойподвижностью фракций ингибиторов протеаэ в верхней части спектра.20 Предлагаемый способ отбора форм озимой ржи устойчивых к предуборочному прорастанию, позволяет вести определениепотенциальной устойчивости к предуборочному прорастанию свежеубранного и поко 25 ящегося зерна, целенаправленно отбиратьвцсокоустойчивые к предуборочному прорастанию генотипов, повышает точностьанализа, позволяет отбирать формы с генетически обусловленной устойчивостью.30Формула и эо бр ете ни яСпособ отбора форм озимой ржи, устойчивых к предуборочному прорастанию,включающий экстракцию белков зерна с по 35 следующим диск-электрофорезом и отборустойчивых форм на основании полученногобелкового спектра, о т л и ч а ю щ и й с ятем, что, с целью повышения точности анализа и ускорения отбора, в полученном бел 40 ковом спектре анализируют компоненты, легкорастворимых белков в зоне, соответствующей амилазам прорастания, и отбор устойчивых форм проводят по максимальнойвыраженности, ширине и минимальной по 45 движности анализируемых компонентов.1650049 Базовый способ Образец Прототип Активность компонентовамилазы прорастания, мм Количество зерен, прооосших на 8-е сут проращивания ввижвока ионных ловиях 198 987 966 198 нтовныбй 1 2 2,5 0 20 16 13 35 17 ино е ч а н и е. " -" обозначает отсутствие указанного признака. Составитель В, Демк Техред М,Моргентал ректор С. Че ктор А. Мотыль Заказ 1558 Тираж 371 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ С 113035, Москва, Ж, Раушская наб 45