Способ диагностики силы роста подвоев плодовых культур

(51)5 А 01 альный натитут садо Сч Е ос 1 егп гхопа 1опйоп,ОСТА Л к сельск адо но в Изобрхозяйств сельскомути садоьэовано в ени о тно сит ся енно к обл т быть исп аи м водства,научно -иведущихкультур.Е ель еждени овательскихцию подвое сле плодовь зоб и у мщение достооба диагноплодовых о ен рощение спо ста подвоев ернос илы сти культур, Способ заклю иагностике сил еляют в побега в фазу интенсивроста судят поотношения РНК/ДНстандартных подЮмый подвой отнотой группе, от ОСУДАРСТВЕННЦЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬГГИЯМПРИ ГННТ СССР(22). 1 .08,88 (46) 07,07.90. Бюл. 1 Р 25 (71) Северо-Кавказский зон учно-исследовательский инс водства и виноградарства (72) Т. Н. Дорошенко (53) 631.541(088,8) (56) Коуа 1 Ног 1.сц 1 гцга 1 8 рогг. оГ Ье гМггеепЬ ТпгНоггусц 1 гцга 1 сопргезз 951952, р. 152, (54) СПОСОБ ДИАПОСТИКИ СИ ПОДВОВВ ПЛОДОВЫХ КУЛЬТУР (57) Изобретение относится му хозяйству, а именно к с ву, и может быть использов чается в том, что при ы роста подвоев опрех отношение РНК/ДНК ного роста, а о силе результатам сравнения К у испытуемого и ноев, причем испытуесят по силе роста к стандарта которой он но-исследонательских учреждениях, ведущих селекцию подвоев плодовых культур, 11 ель изобретения - повышение достоверности и упрощение способа диагностики силы роста подвоев плодовыхкультур, В фазу интенспвного роста вверхушечных меристемах побегон диагностируемых подноев и стандартныхподвоен с известной силой роста измеряют содержание РНК и ДНК Рассчитывант отношение РНК/ДНК, Сопоставляютотношение РНК/ДНК у диагностируемогои стандартных подноев н анализируемыйподвой относят по силе роста к тойгруппе, о стандарта которой он вменьшей степени отличается по величине отношения, 1 табл. в меньшей степени отличается по величине отношения РНК/ДНК.Исследуют подвои плодовых культур в контролируемых (климатической камере, теплице) или в полевых условиях. При этом в контролируемых условиях определяют генетически обусловленную силу роста подноев, а н полевых - силу роста для конкретных почвенно-климатических условий. В качестве стандарта используют подвои с известной силой роста (в полевых условиях конкретно для данных почвенно-климатических условий).Подвои яблони чаще всего делят по силе роста на следующие четыре группы: карликовые, полукарликовые, среднерослые и сипьнорослые. Поэтому при оценке силы роста у подвоев ябло 1576040ни необходимо подбирать четыре стандартных подвоя, относящихся к каждойиз перечисленных групп. У других плодовых пород, в частности у косточко-вых, такой группировки подвоев по силе роста не существует, В данном случае в качестве стандарта следует испольэовать общепринятый, наиболеераспространенный подной для каждойконкретной плодовой породы, напримердля персика - сеянцы персика, для че-.решни - сеянцы черешни и т.д, В качестве физиологического параметраггри оценке силы роста подвоев испольВуют отношение нуклеиновых кислотРНК/ДНК, являющееся косвенным показателем функциональной активности ДНК,характеризующим уровень ростовых,синтетических процессов в организмерастения и его функциональное состояние. Указанный параметр определяютв верхушечных меристемах побеговобразованных, регулирующих физиологобиохимический режим растения н целом. 25Различия между вариантами по силероста наиболее четко обнаруживаютсяв фазу интенсивного роста. (через 11,5 мес после начала вегетации), когда н растительном организме активнопротекают ростовые и синтетическиепропессыеП р и м е рДля осуществленияспособа используют поднои яблони ичерешни разной силы роста. Предварительно излучают вегетативно размножаемые подвои яблони; И 27, ММ 106, М 4.,П-1, П-50 и клоновый подвойчерешни ВЦ,В качестве стандартон используют 40известные по силе роста подвои, поодному из каждой группы: И 9 - карликовый подвой, М 7 - полукарликоный,М 2 - среднерослый, сеянцы культурныхсортов СКС - сильно рослый, Стандартным подвоем черешни являются сеянцычерешни (сильнорослый подвой), Расте -ния выращивают в контролируемых услоовиях климатической камеры (с = 2528 С, освещенность 35 тьк., лк, относительная влажность воздуха 757) впочвенной культуре (20 кг воздушносухой почвы на сосуд пять растенийн одном сосуде).Кроме того, испытуемь 1 е.поднои состандартами выращивают на первом полепитомник а фПодбирают средчие по развитию растениястандартных и испытуемых подвоен. В период интенсивного роста (через 1 мес после начала вегетации) у этих растений отделяют верхушечные меристемы побегон (в каждом варианте 6-8 растений). Порядок выделения верхушечных меристем следующий. Прищипывают верхушку главного побега растений, с помощью препаровальной иглы удаляют зачаточные листья, оснобождая таким образом апекс побега (верхушечную меристему), После этого отщипыва- . ют кончик длиной 2-3 мм и отобранную ткань взвешивают. Выделяют две навески по 01 г каждая. Нанески количест - ценно переносят впробирки с 5 мл 96 Х-ного этилового спирта. В лабораторных условиях пробирки с отобранными образцами кипятят и течение 3 мин, Фиксированный материал анализируют на содержание нуклеиновых кислот. Обработку образцов для определения в них содержания нуклеиноных кислот, включающую удаление кислоторастноримых веществ и липидов, а также разделение РШ( и ДНК осуществляют известным методом, В дальнейшем концентрацию нуклеиновых кислот н растворе определяют спектрофотометрическим методом, Повторность анализа двухкратная.Значения отношения РНК/ДНК н нерхушечных меристемах побегов стандартных и испытуемых подноен, а также результаты оценки силы роста последних представлены н таблице. Как видно из приведенных данных, у подвоен И 27, П-50 отношение РНК/ДНК в нерхушечных меристемах побегов н большей степени приближает ся к таковому у карликового подвоя М 9. Следовательно, подвои И 27, П- 50 - карликовые, Согласно проведенной оценке подвои ИИ 106, 1-48-41 - полукарликоные, И 4 и ИЗ - среднерослые, а Н - 25-1 - сильноросл 1 ж, Гила роста клонового подвоя В 11-13 ниже, чем у стандарта - сеянцен черешни.1Результаты оценки силы роста подвоен по физиологическому параметру (отношению РНК/ДНК) совпадают с результатами наблюдений в саду за высотой деревьев яблони и черешни, привитых . на перечисленных подвоях.В таблице представлены результаты оценки силы роста некоторых клоновых подвоен яблони и черешни.Применение предлагаемого способа диагностики силы роста подноев плодо1576040 формула изобретения Способ диагностики силы роста подвоев плодовых культур, включающий измерение физиологических показателей Стандартный Сила роста стан- РНК/ДНК Испытуемый РНК/ДНК Сила роста нс- НСРподвой дартного подвоя стандар- подвой подвоя пытуемого поддГта воя Яблоня (климатокамера)Карликовый .4,4 М 27Полукарликовый 5,6 ММ 1 Об Карликовый 0,2 Полукарли,5 ковый 4,2 5,8 М 9 Г 17 М 2СКС 7,5 9,7 Среднерослый 0,8 Сильно ро слый 0; 4 6,8 8,8 М 4ПСреднерослый Сильнорослый Яблоня (питомник) КарликовыйПолукарликовый П-50 1-48-41 Карликовый О,Полукарли- ковый 6,3 б,б 6,2 6,6 М 9 Г 17 Среднерослый 0,4 7,5 СКС 7,2 МЗ8,9 Среднерослый Сильнорослый Черешня (питомник) Сильнорослый Черешня 14,3 Сила роста 1,2ниже, чем устандарта 19, 0 ВЦСоставитель Е. ИкрадюкРедактор А, Козориз Техред М.Дидык Корректор С. Черни Заказ 1804 Тираж 484ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открьггиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 вых культур обеспечит объективноеопределение еще в молодом возрастефункциональной активности растений,в частности интенсивности ростовыхпроцессов. Способ .даст возможностьдиагностировать силу роста подвоевеще в питомнике (или в контролируемыхусловиях), что позволит заранее подо"брать подвои со сдержанным ростом,которые целесообразно использоватьпри закладке высокоурожайных садовинтенсивного типа, а также существенно сократить селекционный процесс привыделении подвоев,растительной ткани и диагностику силы роста по значениям показателей,о т л и ч а в щ и й с я тем, что, 5с целью повьппения достоверности и упрощения способа, в качестве физиологических показателей измеряют содержание РНК и ДНК, которое проводят вфазу интенсивного роста, в качестверастительной ткани используют верху -шечные меристемы побегов диагностируемых подвоев и стандартных подвоевс известной силой роста, относящихсяк различным по силе роста группам, 15 рассчитывают отношение РНК/ДНК, сопоставляют отношение РНК/ДНК у диагностируемого и стандартных подвоев ианализируемый подвой относят по силероста к той группе, от стандарта ко торой он в меньшей степени отличается по величине отношения РНК/ДНК.