Способ дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных менингитов

агара отечественного производства на 0,1 М бифталатном буфере или 0,5%-ном гипотоническом растворе НаС 1 с рН 6,2, Готовят раствор полимиксина М сульфата в концентрации 2-4 тыс. ЕД/мл, для чего берут навеску порошка или таблетку антибиотика, содержащую 500 тыс. ЕД и раство ряют в 250-175 мл буфера или солевого раствора. Навеску сухой массы тест- , культуры М. 1 узодегклспз берут из расчета О,5% к общему объему среды и тшательно растирают в ступке с 1-2 каплями буфера или гипотонического раствора. В расплавленный 2%-ный агар добавляют равное по объему количество приготовленного раствора полнмиксина, смесь охлаждают до температуры44-55 С, гьсле чего соединяют с при , готовленной навеской культуры йикро, кокка и наносят по 4 мл на предметные стекла. В застывшей среде делают лунки диаметром 2 мм на расстояниисм одна от другой. 5Перед исследованием предметные стекла со средой предварительно подогревают в термостате в течение 15- 20 мнн. Лунки заполняют испытуемыми образцами спинно-мозговой жидкости 30после чего предметные стекла выдерживают в термостате в течение 1520 мин. 0 наличии лизоцима судят по появлению зоны лизиса. вокруг лунки в течение указанного периода времени. При обнаружении лизиса в течение 15-120 мин диагностируют бактериальную этиологию менингита, а при отсутствии лизиса в течение указанно-" го времени - вирусную. 40П р и м е р 1, Больной Н., 12 лет,поступил с предварительным диагнозом: острый менингит неучтенной этиологии. Больному произведена спинномозговая пункция, При исследованииспинно-мозговой жидкости установлено: ликвор прозрачный, цитоз 981 О кл/л, нейтрофилы 48%, лимфоциты652%, белок 0,33 г/л, сахар 2,4 ммоль/л, 50хлориды 25 ммоль/л. С целью установ-ления этиологии менингита изученализоцимная активность спинно-мозговой жидкости больного. Гельбактериальную смесь готовили впрок на 20предполагаемых исследований. За едиЪицу расчета принимали 4 мл среды, необходимые для одного предметногостекла, и оптимальное число возможых исследований на нем (2-3 пробыликвора), Для выполнения намеченного количества исследований потребовалось 28 мл гельбактериальной смеси.14 мл 2%-ного раствора агара готовили из простого агар-агара отечественного производства на 0,5%-ном растворе хлористого натрия, рН 6,2. Раствор полимиксина М сульфата, содержащий4 тыс. ЕД/мл, готовили путем растворениятаблетки антибиотика (500 тыс,ЕД) в 75 мл 0,5%-ного раствора хлористого натрия.Навеску сухой культуры М. 1 узодейсй 1 сцз (42 мкг) тщательно растирали вступке с 1-2 каплями гипотоническогораствора МаС 1. К 14 мл расплавленного2%-ного агара добавляли 14 мл приготовленного раствора полимиксина "осульфата, смесь охлаждали до 50 С,после чего соединяли с навеской культуры микрококка. Среду разливали по4 мп на 7 предметных стекол. В застывшей среде делали по 3 лунки на расстоянии 1 см одна от другой. С помощью пастеровской пипетки заполнялилунку исследуемым образцом ликвора,после чего предметное стекло клалина дно чашки Петри и просматриваличерез каждые 10-15 мин в течение 2 ч.Появление зоны лизиса, визуальновоспринимающееся как просветлениесреды вокруг лунки, началось через115 мин, что позволило сделать заключение о бактериальной природе менингита у данного больного и назначить. этиотропную терапию. Результатыбактериологического исследования спин"но-мозговой жидкости больного подтвердили менингококковую этнологиюзаболевания на третьи сутки,Н р и м е р 2. Больной К., 6 лет,госпитализирован с диагнозом: менингококковая инфекция менингит. Ликворологические данныег цитоз 7001 О кл/л, нейтрофилы 55%, лимфоциты45%, белок 0,48 мг/л, сахар2,8 ммоль/л, хлориды 115 ммоль/л.Результаты бактериоскопии мазка ликвора отрицательные. Определение лнзоцимной активности спинно-мозговойжидкости проводили по предлагаемомуспособу Гельбактериальную смесь готовили так же, как в примере 1, заисключением того, что доза полимикси"на в среде была 1 тыс. ЕД/мл. Ход исследования. тот же. Появление зоны лизиса вокруг лунки с ликвором больноФормула изобретения Способ дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных менингитов, включающий определение лизоцима в биологической жидкости методом диффузии в агаре с тест-культурой М. 1 узойеИсцз, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности, упрощения способа и сокращения сроков исследования, определение проводят в спинно-мозговой жидкости, при этом в агар добавляют 1-2 тыс. ЕД/мл полимиксина М сульфата, после чего визуально определяют зоны лизиса среды и при обнаружении лизиса в течение 15-120 мин диагностируют бактериальную этиологию менингита, а при отсутствии лизиса в течение указанного времени - вирусную,Из нихобнаруженлизоцим,абс.Х Время появления зонлизиса, мин Способ обнаруже- Больныения лизоцима менингитом Всегообследовано 1 15-60 61-120 121-180 48 48 100 30 18 Бактериальным Вирусным Бактериальным Вирусным Предлагаемый 22 0 0 48 32 66,6+2,3 26 4 Известный 22 Составитель Г.Чуич Редактор В.Петраш Техред М,Дидык Корректор С.ШекмарПодписное Заказ 39 Тираж 503 ИНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж; Раушская наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101 5153439 го отмечено через 15 мин инкубации в термостате. Сделано заключение о бактериальной природе заболевания. До постановки окончательного диаг 5 коза в очаге проведен врачебный осмотр общавшихся, выявлены и изолированы больные с характерными клиническими признаками назофарингита. На 3-й день бактериологического обследования из носоглотки больного был выделен менингококк, а в РНГА на 7-й день отмечено нарастание титров антител к мениигококковому полисахариду, Окончательный диагноз: менингококковая ин фекция, менингит. Количественное определение у данного больного лизоцима, проведенное известным способом, показало наличие его в дозе 16 мкг/мл.Использование предлагаемого спосо ба позволяет повысить чувствительность диагностики менингитов на ЗОХ, упростить способ за счет простоты подготовки и учета реакции и сократить сроки проведения исследований до 2 ч. 25 В таблице приведено количествообнаруженного лизоцима предлагаемым ии известным способами,