Способ определения абсолютно сухой биомассы галофильных микроводорослей

/02, С 4 С 0 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ я к микроользованоомассы галоЦелью изоб" нныи уние точности ает ре уральной вательно роваство м хло ствоысушивании Ю ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬС(56) Перт С.Дж. Основы культивиния микроорганизмов и клеток, М,:Мир, 1978, .с,27,(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АБСОЛЮТНОХОЙ БИОМАССЫ ГАЛОФИЛЬНЫХ МИКРОВОДОРОСЛЕЙ(57) Изобретение относит биологии и может быть ис для определения выхода б фильных микроводорослей, ретения является повышени определения. Способ закл делении биомассы от куль ды фильтрованием, послед промывке 2,5-3,57-ным ра ристого натрия и насыщен ром углекислого аммония, и взвешивании. 3 табл.Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано дляопределения выхода биомассы галофильных микроводорослей.5Цель изобретения - повышение точности определения,Способ заключается в следующем,Биомассу галофильных водорослей,отделяют от культуральной среды фильтрованием, промывают в течение 3 -5 мин 2,5-3 -ным раствором хлористого,натрий, а затем насыщенным растворомуглекислого аммония, высушивают при10512 С в течение 1 ч, охлаждают до 15;(по 1 О мл суспензии) отделяют от культуральной жидкости на предварительнопромытых, взвешенных и высушенных 20мембранных фильтрах 9 10 в аппаратеЗейтца. Затем биомассу промывают втечение 3-5 мин З -ным раствором хлористого натрия, после этого - насыщенным раствором углекислого аммонияв течение 3 - 5 мин, Контроль полнотыудаления хлористого натрия осуществляют качественной реакцией на ион,хлора азотнокислым серебром. Фильтрыбиомассой помещают в сушильный шкаф 30при 105+2 С, высушивают в течениеч до постоянного веса, охлаждаютдо комнатной температуры, взвешиваютна аналитических весах и определяютабсолютно сухую биомассу, делая соответствующий пересчет на 1 л суспекФзии микроводорослей. Часть фильтроввысушивают сразу после промывки раствором хлористого натрия,Сравнение результатов определенияабсолютно , сухой биомассы дуналие.л;по известному и предлагаемому способам приведено в табл.1Известный способ дает завышенныерезультаты иэ-за остатков хлористого 5натрия в биомассе водорослей и менеевоспроизводим по сравнению с предлагаемым. П р и м е р 2. Промывку биомассы проводят раствором хлористого натрия различных концентраций.Зависимость процента лиэиса клеток из-за осмотического шока от концентрации раствора хлористого натрия приведена в табл.2.Из таблицы видно, что отсутствие лизиса наблюдается при концентрациях хлористого натрия 2,5-3,0 и вьппе; использование более высоких концентраций не отражается на результатах определения.П р и м е р 3. Промывку биомассы проводят раствором карбоната аммония.Результаты определения биомассы дуналиеллы при промывке раствором карбоната аммония различных концентраций приведены в табл.3.Потери биомассы в результате осмо" тического шока и лизиса клеток при промывке раствором карбоната аммония исключаются при использовании его насыщенного раствора.Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить точность определения абсолютно сухой биомассы галофильных водорослей за счет полного удаления загрязняющих биомассу примесей солей и предотвращения лизиса клеток, вызываемого осмотическим шоком,Формула изобретенияСпособ определения абсолютно сухойбиомассы галофильных микроводорослей,включающий отделение биомассы от культуральной жидкости фильтрованием, удаление остатка солей промывкой солевымраствором, высушивание и взвешивание,о г в , и ч а ю щ и й с я тем, что, сцелью новь "чя точности определения,удаление остатка солдй осуществляютпоследовательной промывкой биомассы2,5 - З -ным раствором хлористогонатрия и насыщенным раствором углекислого аммония,1402940 Т а б л и ц а 1 Биомасса, г/л ГКоэффиСпособ Среднеезначеторностей ние отклонение 1,43 0,38 26,6 Известный 10 Предлагаемый 4,8 1,25 0,06 10 Таблица 2 1,0 1,5 4,0 4,5 2,0 3,0 2,5 Процент лизиса от общего числаклеток 37,9 0 0 0 0 Таблица 3 Концентрация раствора карбоната аммоЕ 10,0 40,0 20,0 45,0 47,5 50,0 30,0 Биомасса, г/л 0,45 1,54 1,68 1,73 0,77 1,30 Составитель Е.ЗолотухинаРедактор И,Рыбченко Техред М.Дидык Корректор Л.Пил).пенко Заказ 2851/34 Тираж 847 Подписное ВИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретении и открытий 113035, Москва, Ж, Раушснаб., д. 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4 Концентрацияхлористогонатрия, Е Коли- чество пов Среднеквадратическое циентвариации, Х