Способ контроля генетической структуры колоний неинбредных мышей

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ(56) Авторское свидетельство СССРУ 1223429, кл. А 01 К 67/00,03.04.84,(54) СПОСОБ КОНТРОЛЯ ГЕНЕТИЧЕСКОЙСТРУКТУРЫ КОЛОНИЙ НЕИНБРЕДНЫХ МЫШЕЙ(50 4 А 01 К 67/02, С 09 В 23/28 роля генетической структуры колонийнеинбредных мышей по комплексу геновгистосовместимости Н(комплекс Н)Целью изобретения является повьппениеконтроля генетической структурыпопуляции неинбредных мьппей с широким охватом идентифицируемых генов.В заявленном способе при скрещиваниис конгенно-резистентными линиями(КР) с последующей трансплантациейкожи потомкам (Р ) от других КР-линий появляется возможность контролировать структуру популяции нелинейных мьппей более, чем по 100 аллелямкомплекса Н, включающего 8-10локусов.Изобретение относится к генетике животных в частности к способу контроля генетической структуры колоний неинбредных мышей по комплексу ге 5 нов гистосовместимости Н(комплекс Н"2).Цель изобретения - повышение точности контроля генетической структуры популяции неинбредных мышей с широким охватом идентифицируемых генов.В предлагаемом способе при скрещивании с конгенно-резистентными мы шами (КР) и последующей трансплантацией кожи потомкам (Р) от других КР-линий появляется воэможнъсть контролировать структуру популяции нелинейных мышей более, чем 100 аллелям комплекса Н, включающего 8-10 локусов.П р и м е р 1, Исследуемых неинбредных мышей скрещивают с мышами конгенно-резистентной линии В 10.МТ(Н)Получают гибридных мышей 25Риндивидуально от каждой исследуемой неинбредной мыши, на которых пересаживают кожу других конгенно-реэистентных линий, выведенных в данном случае на основе линии С 57 В 1/10 Бп. На каждого реципиента трансплантиру- . ют кожу 3-4 доноров КР-линии с разными гаплотипами. Приживание одного иэ трансплантатов, кроме контрольного считают результатом идентичносУ35 ти гаплотипов Ндонора и реципиента. Если генотип неинбредных мьппей не удалось определить по результатам первой трансплантации, тем же реципиентам трансплантируют кожу 3-440 других доноров КР-линий через 30 дн. Эту операцию повторяют по исчерпанию набора КР-линий. 20 Гомоэиготами по Нсчитают мышей,. если у всех гибридов Рприживалсятрансплантат только одной КР-линии,Гетероэиготами по Нсчитают мышей,если у одной части потомков Р прижился трансплантат одной КР-линии,у другой части гибридов Р- трансплантат другой КР-линии или трансплантат не прижился,По результатам приживления кожиу мышей Р определяют частоту гап 55лотипов и генотипов. В случае выявления мьппей с неизвестными гаппотипами по Нзакладывают новую линиюмьппей и изучают ее гаплотип с по" мощью других иммуногенетических методов.Установленная таким образом генетическая структура популяции неинбредных мышей по Ндает воэможность контролировать стабильностьструктуры популяции неинбредных мышей по первоначально установленнымчастотам генотипов Н, используяобщепринятый метод статистическойобработки,Положительный эффект предлагаемого способа состоит в том, что расширяется возможность исследования иконтроля генетической структуры популяции неинбредных мышей по большему число локусов, что обеспечиваетвоспроизводимость результатов в экспериментах, тем самым повышаетсяэффективность исследования, выполненного на неинбредных мышах. Кроме того, знания о генофонде популяциидают возможность закладывать новыелинии мышей для медико-биологическихисследований,В разработке предлагаемого способа использовано 28 КР-линий 20 аллелей Нколлекции СССР, сосредоточенной в НИЛбиомоделей АМН СССР, вт,ч. 9 из них выведены авторамипредлагаемого изобретения, Всего жемировая коллекция включает более200 конгенно-резистентных линий.1Для получения гибридов Р 1 при раз"работке предлагаемого способа использованы три типа КР-линий; на генетической основе В 10/Бп - В 10,М Н суВ 10.ВИ (Н) и сама линия В 10 (Н),ана генетической основе А/Бп (Н)А.СА(Н), АБО (Н), А,СА-Ешна генетической основе СЗН/БпСЗН,:ПС(На ) СЗНН В(Н)СЗ Н,ОН (Н). Это дало возмож"ность типировать Нкомплекс у неинбредных мышей по результатам трансплантации кожи от доноров-мьппейвсех КР-линий, которые имелись в коллекции со следующими аллелями Н,а, Ь, д, Г, Гш 1, я 1, Ь 2, 5, 1.7,хц 5, 1, 1 с, ш, о 2, р, с 1, г, з, ч, у 1Формула изобретенияСпособ контроля генетической структуры колоний неинбредных мышей путем определения генотипов полиморфных систем, о т л и ч а ю -1353380 Составитель Н,Кузенкова Техред Л,Сердюкова Корректор С,Шекмар Редактор В.ДанкоЗаказ 5623/3 Тираж 628 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 щ и й с я тем, что, с целью повышения точности контроля генетическойструктуры популяции неинбредных мышей с широким охватом идентифицируемых генов, неинбредных мышей скрещивают с конгенно-резистентной линиейс известным гаплотипом Н, полученным гибридным мышам первого поколения трансплантируют кожу других конгенно-резистентных линий с разными .гаплотипами Ни по результатам 5приживления трансплантата устанавливают гомо- и гетерозигот по Нв колонии мышей и вычисляют частоты гаплотипов и генотипов по комплексу генов гистосовместимости.