Способ получения инвазионных личинок стронгилоидес

(др А 01 К 67/00 АНИЕ ИЗОБРЕТЕН ЕТЕЛЬСТ 5ЫХ о Крмия ен и тр ым ли но арли. ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬ 1 ТИЙ(71) Московская ордена Трудовогного Знамени ветеринарная акаде)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНВАЗИОНвключаювыращивание личинок на субстраи выделение их, о т л и ч а юй с я тем, что, с целью ловы" ия выхода культуры инвазионных чинок и упрощения способа, выра- ание личинок осуществляют на суб ате, покрытом увлажненным цорисматериалом в виде 1-5 слоев мара выделение инвазионных личиосуществляют из 2 в . 5-го слоевПосле завершения культивирования емкость с инвазионной культурой вынимают из термостата, снимают крьппку и с поверхности субстрата удаляют 1-4 верхних слоя марли. Затем окунают в емкость с подогретой до 35-36 С водой, 5-й нижний слой марли не используют, так как он загрязнен субстратом. Из емкости, в которую окунают пористый материал с инвазионными личинками, сливают излишки воды, в осадке обнаруживают только чистую культуру личинок,П р и м е р 2. В 1-литровую стеклянную банку на 1/3 ее заполнения вносят 250 г субстрата, состоящего из фекалия животных, больных стронгилоидозоМ, и смешивают с дре- весными опилками в соотношении 1:2 и поверх субстрата накладывают увлажненный пористый материал 1-5 слоев, банку закрывают и ставят в термостат при 28 О на 2 дня . Следующие манипуляции с культурой производят согласно примеру 1.П р и м е р 3. В 1-литровую стеклянную банку на 1/3 ее заполнения вносят 300 г субстрата, состоящего из фекалия животных, больных стронгилоидозом, и смешивают с древесными опилками в соотношении 1:1 и поверх субстрата накладывают увлажненный пористый материап 1-5 слоев, банку закрывают и ставят в термостат при 27 С на 3 дня, Следующие манипуляции с культурой осуществляют согласно примеру 1.Диагностика стронгилоидоза, От 20 животных исследуют фекапии на наличие заболевания их стронгилоидозом как описано в примере 2 и 3, Установлено: сильная степень заражения 5, средняя 8, слабая 5 поросят.Использование предлагаемого способа позволяет получить культуру инвазионных личинок, не загрязненных субстратом, увеличить срок жизни личинок в два раза, повысить выход инвазионного материала, исключить заражение оператора и в случае необходимости использовать его для постановки диагноза на стронгилоидоэ. При заражении животных инвазионным материалом, полученным предлагаемым способом, наблюдаем высокую интенсивность инвазии, При изготовлении антигена исключается необходимость в дополнительной очистке культуры инвазионных личинок. 4 В118326 аИзобретение относится к биологии. и может быть использовано дпя получения инвазионной культуры стронгилоидес и для диагностики строгилоидоэа.5Известен способ получения инваэионных личинок стронгилоидес, включаю.щий внесение субстрата с инваэионными яйцамис крьппкой на 1/3 егозаполнения и помещение его в термо- Встат при 26-28 ОС на 5-6 сут с после"дующим перенесением субстрата синваэионными личинками на марлю ивнесения марли с субстратом в воронку, залитую водой, подогретой до36 С, с присоединенной к ней черезрезиновую трубку пробирки. Попадаяв. подогретую воду личинки интенсивно передвигаются, выходят иэ субстрата и проваливаются в пробиркуСубстрат с марлей удаляют из воронки и через 10"15 мин пробирку отворонки отсоединяют, осевшие на днопробирки личинки используют в работе для заражения животных или 25для исследования или полученияантигена3.Недостатком известного способаявляется значительное загрязнениекультуры инвазиенных личинок субЗО-стратом и посторонней микрофлорой,большая гибель инвазионного материапа, опасность работы оператора,с инвазионной культурой, патогеннойдля человека во время перенесениясубстрата на марлю и в воронку. 35Цель изобретения - повышение выхода культуры инвазионных личинок,повьппение выживаемости и упрощениеспособа.Поставленная цель достигаетсятем, что выращивание личинок осущест"вляют на субстрате, покрытом увлажненным пористым материалом в виде1-5 слоев марли, а выделение инвазионных личинок осуществляют из 452 - 5-го слоев марли,П р и м е р 1. В 1-литровую стеклянную банку л на 1/3 ее заполнениявносят 200 г субстрата, состоящего из фекалия животных (свиней, 5 Всильнар степень заражения ), больныхстронгилоидозом и смешанного сдеревянными опилками в соотношении 1:1, поверх субстрата накладывают увлажненный пористый материал 55марля ) 1-5 слоев, банку .закрывают крьппкой .чашкой Петри) и ставятв термостат при 26 С на 4 дня,Заказ 7303/2 Тираж 721 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССРФилиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная,4 Для более полного освобождения субстрата от инвазионного материала проводят подогрев с субстратом и инваэионным материалом с донной части емкости до температуры 38-39 градусов. При отмеченной температуре подвижность инвазионных личинок усиливается и они ухо 11183264дят с нижних слоев субстрата болеетеплого в прохладюп, избегая отповышенной температуры и в конечном счете собираются в пористомматериале, покрывающем субстрат,Культуру инвазионных личиноквыделяют выше описанным образом.