Способ выделения нематод

11 852296 Союз Советских Социалистических РеспубликСССР по делам изобретений н открытий72) Авторизобретен ТихонОВ Всесоюзный ордена Трудового Красного Знамени инст гельминтологии им. К, И, Скрябина 54) СПОСОБ ВЪДЕЛЕ ЕМА 1ФМаЬЩС4(батям Изобретение относится к сельскому хозяиству, в частности к методам защиты растений, и может быть использовано в селекции при выведении резистентных форм растений к нематодозам. 5Известен способ выделения нематод, по которому исследуемый объект помещают в воронку, на нижний конец которой надевают резиновую трубку с энтомологической пробиркой или с зажимом, после чего в во- о ронку наливают воду. Через сутки или несколько больше на дне энтомологической пробирки собираются нематоды (1 и 2).Недостатком известного способа является то, что на дно пробирки наряду с актив ными нематодами попадают неполноценные особи и сбор нематод осуществляют не ранее чем через 18 - 24 ч.Целью изобретения является увеличение выхода нематод и сокращение сроков их 20 получения.Цель достигается тем, что в искусственную питательную среду помещают тигли, заполненные на 3/4 - 4/5 объема водой, и после перехода нематод из питательной среды в 25 тигли из них собирают нематоды.Способ осуществляют следующим образом.В искусственную среду, находящуюся в кристаллизаторах, помещают нематоды и выращивают их. На 2 - -и размножения нематод всреду помещают по 3 - 5 тиглей (диаметром 1 - 1,5 см и больше), вдавливая их в массу субстрата (среду) так, чтобы верхние края их возвышались над верхней поверхностью грибного мицелия на 3 - 5 мм. Тигли заполняют водой на 3/4 - 4/5 объема. Нематоды почти тут же начинают в них мигрировать из субстрата. Через 4 - 5 ч в каждом тигле насчитывается до 500 тыс. экземпляров нематод, через 10 - 14 ч - до 1,5 млн. особей, которые могут быть использованы для селекционных работ.Пример, Для разработки научно-обоснованной системы мер борьбы с особо опасными фитонематодами (листовые виды) сельскохозяйственных культур, в частности для проведения сортоиспытания и селекции в полевых условиях, необходимым и важным условием является создание провокационных фонов, требуется высокоинвазионный биоматериал в больших количествах в виде чистой однородной культуры нематод.Качество исходного инвазионного материала и время его получения проверяют в сравнительной оценке этого метода с общепринятым вороночным методом Бермана. Результаты приведены в таблице,852296 Сроки съема инвазионного материала и его инвазионная активность Метод Четвертый залив Третий залив Второй залив Первый залив Через каждые 14 ч Вороночный Активно-подвижных 40/ Пассивно. подвижных Обои Неподвижных 30Экспресс-метод Через 4 ч Акти в но. под ви жных 1 ООУФормула изобретения Составитель В. КосовецТехред А. Камышникова Корректор О. Тюрина Редактор 3. Бородкина Заказ 1824/9 Изд.49 Тираж 712 ПодписноеНПО Поиск Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Типография, пр. Сапунова, 2 Как видно из таблицы, разработанный экспресс-метод обеспечивает максимальный выход высокоактивного инвазионного материала из искусственйых сред (100 Я активных инвазионных особей нематод в каж дом съеме), резкое сокращение сроков съема исходного инвазионного материала (через каждые 4 - 5 ч). Пру, использовании метода Бермана всю среду с нематодами помеШают в воронки с водой, в связи с чЬ- О размножение нематод тут же лрекрашается, в то время как при экспресс-методе происходят одновременно съем инвазионного материала в тигли и интенсивное размножение нематод на среде, что увеличивает выход 15 биоматериала.Ускоренный съем инвазионного материала в больших количествах обеспечивается, начиная уже через 4 - 5 ч с момента внесения тиглей (с водой) в субстрат кристаллизатора. 20 Способ выделения нематод, включающийих выращивание в искусственной питательной среде и сбор в емкости, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью увеличения выхода нематод и сокращения сроков их получения, в искусственную питательную средупомещают тигли, заполненные на 3/4 - 4/5объема в ой, и после перехода нематодиз ртател реды в тигли из них собираютстВчаики информации,принятые во внимание при экспертизе1. Кирьянова Е. С. и Кралль Э. Л. Паразитические нематоды растений и мерыборьбы с ними, т. 1, Л 1969, с. 110 в 1.2. Авторское свидетельство СССРМо 530489, кл. А 01 К 67/00, 1975 (прототип),