Способ количественного определения бактерий

иоритет Государственный комитетСовета Министров СССРяо делам изобретенийи открнтнйвано 15,1278.Бюллетень % убли 4 о) Дата опу икования описания 1512 торбретен) Заявит аучно-исследовательскийальной гигиены им. А.Н.Х евскии коья 4 у 4) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННО 1 О ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИЙ ТЪ 1 ОЬлсЮоь Оиосчапох к 3 спьдо дят иди ойВырав тонает б осущес СпобразоОтб00 мланиятбора яется след сточной воды по й Флакон. Исследо осредственно посл посева пробу воды пробы рильн ят неДля совро аИзобретение относится к микробиологии и касается микробиологическогоисследования сточных вод.Известен способ количественногоопределения бактерий ТЬюПасИоь 1 Ь 1 осч- оапох 1 дапь в сточных водах путем раститровывания исследуемой пробы в пита-,тельной среде, содержащей роданиды,споследующей инкубацией полученныхдецимальных разведений проб и определением концентрации бактерий 11 .Однако известный способ длителени не обеспечивает высокой точностиопределения бактерий ТЫобсКлИоь Ю 1 осчопох 1 дстпь. 1Цель изобретения - повышение точности определения.Это достигается тем, что по предлагаемому способу исследуемую пробураститровывают в питательной средес содержанием роданидов 1-2 мг/л иопределяют концентрацию бактерий через 3-4 дня инкубации,во флаконе тщательно перемешивают, продувая ее стерильной пипеткой.Затем иэ исследуемой пробы путем ее раститровки готовят ряд последовательных децимальных разведений 10 -20 , Раститровку пробы прово непосредственно в элективной ж родановой среде, разлитой по 9 мл в ряд пробирок. Для этого использую питательную среду, предварительно разведенную в 100 раз стерильной во допроводнойводой. При этом концент рация роданидов в питательной среде снижается до 1-2 мг/л. Последнее ускоряет рост, развитие и биохимиче кое окисление роданидов и создает возможность обнаружения ТМоЬас 1 Иоь 1 Ьюсчапох 1 сЬпь в более короткие срокиПосевы выращивают в термостате при 28-30 С в течение 3-4 сут.щив ание ТйюодсИиь 1 Иосчстповдапь ком слое питательной среды созд для этих микроорганизмов высокоатро ные условия, способствующие ускорению их роста, развития и бнохимичес кого окисления роданидов.Об наруже ни е ТЪ 1 о Ьас 1 Иць тЬвсчотюхм 3 ап в исследуемых децимальных объемах пробы проводят после 72 ч выращивания посевов. О присутствии ТЫоЬас 1 ИОьб 37428 Формула изобретения Составитель С.МалютинаТехред З.Фанта Корректор Н.Золотовская Редактор Е.йковчик Заказ 7045/1 Е Тираж 52 б Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Ююмопоидодэ в ксследуеьщх объемах Пробы судят на основании исчезновения из этих объемов родаНИдОв Ксторые биохимически окисляются указанными бактериями. Обнаружение роданкдов проводят путем постановки качественной пробы непосредственно в пробирку с выращенными посевами. Для обнаруже иия роданидов в каждую пробирку добавляют 2 капли 1-ного хлорамина и спустя 3 мин 6 капель смешанного реактиваа Отсутствие Окраски среды указывает на полное окисление в ней )О роданидов, что свидетельствует о нахождении в данном разведении пробы бактерий ТЬ 1 ОЬас 1 Иоэ Юосопочдапь.Исследование обязательно должко сопровождаться не менее чем 3-5 контролями, представляющими собой среду того же химического состава, разлитую в пробирки по 1 мл, но не засеянную исследуемой пробой. При учете результатов анализа в контрольных прОбирках ООДаниДЫ должны пОстоянно обнаруживаться. Последнее подтверждает, что их исчезновение в среде с посевами происходит за счет биохимического окисления бактериями Тй 1 О 11 О- сИмэ М 1 осыпох 1 допь. 25При расчете результатов анализа учитывают ТОлькО пробиркир в которых обнаружено биохимическое окисление роданидов.Результаты анализа просчитывают 30 следующим образом.Определяют число пробирок в каждом из трех последовательных разведений, в которых произошло биохимкчес- кое окисление роданидов. Прк этом по лучают трехзначное число, по которому, пользуясь специальнымк таблицами, определяют соответствующее ему наиболее вероятное число (НВЧ) клеток. ,Цля установления числа бактерий, содержащихся в 1 мл, найденную величину НВЧ клеток умножают на значение первого кз трех последовательных разведений, использованных при Определении НВЧ клеток.П р и м е р. Биохимическое окисление роданидов обнаружено в пяти пробирках второго разведения, в четырех пробирках третьего разведения и в двух пробирках четвертого разведения (в пятом разведении окисления роданидов не произошло). В соответствии с полученными результатами получают трехзначное число 542. По таблице находят, что этому числу соответствует НВЧ клеток, равное 22. В 1 мл исследуемой пробы НВЧ клеток бактерий ТЬк)ЪасИов Оиосзапох 1 дапэ равно 2200 (22 м 100 - первое разведение, принятое при расчете).Предлагаемый способ позволяет более чем в 3 раза уменьшить время анализа по обнаружению в воде бактерий ТЮОЬос 1 Ииэ Ю 1 осюпох Ыапэ и обеспечивает высокую точность определения. Способ количественного Определения бактерий ТЬ 1 ОЬас 1 Киэ Оиосзопок 1 йсез в сточных водах путем раститровыванкя исследуемой пробы в питательной среде, содержащей роданиды с последующей инкубацией полученных децимальных разведений проб и ОПРеделением концентрации бактерий, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения, исследуемую пробу раститровывают в питательной среде с содержанием роданкдов 1-2 мг/л и определяют концентрацию бактерий через 3-4 дня инкубации.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:1. Микробиологический контроль биохимической очистки фенольных сточных вод коксохимических предприятий. Черметинформация", 1971, с.б,14.