Способ определения эффективности лечения туберкулеза

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Респубник(61) Дополнительное к авт, свид-ву(22) Заявлено 170676 (21) 2374776/28-13с присоединением заявки РЙ 238263 у/13(45) Дата опубликования описания 10,12.78(51) М. Кл. А 6 В 10/00 Государственный комитетСовета Министров СССРио делам изобретенийи открытий(72) Автор изобретен Ю,И.Лебедев ский государственны ицинский инсти явитель 54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТ ЛЕЧЕНИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА 2 т Изобретение относится к области медицины, в частности к биохимическимисследованиям, и может быть использовано для определения эффективностилечения туберкулеза в динамике, 5Известен способ определения эффективности лечения туберкулеза путемвыявления противотуберкулезных антител в сыворотке крови больных туберкулезом с помощью серологических тестов: реакции непрямой гемагглютинации,реакции связывания комплемента 11,Известен также способ определенияэффективности лечения туберкулеза пуем инкубирования пробы гепаринизиро- фванной крови с туберкулином, отделения надосадочной жидкости и определением степени гемолиза 21.Однако известные способы не обеспечивают высокой точности определения.фЦелью изобретения является повышение точности определенияЭта цель достигается тем, что равные количества надосадочной жидкостивводят в равные объемы бензидиновогореактива и по разности интенсивностигемолиза до и после лечения определяют эффективность лечения,Способ осуществляют следующим образом. Инкубации подвергают пробы исследуемой гепариниэированной крови в присутствии возрастающих доз туберкулина в Физиологическом растворе, После ннкубации отделяют надосадочную жидкость которую помещают в одинаковые коли- честна бенэидинового реактива, в результате чего получают растворы разной степени окраски, характеризующие выраженность гемолиза. Фотоэлектроколориметрическим способом объективно и точно оценивают степень окрашивания во всех пробах и, путем сравнения показателей, выявляют пробу с максимальным гемолизом, количество туберкулина в которой пропорционально количеству антител. Пробу с максимальным гемолнзом условно выражают в единицах концентрации туберкулина. Это позволяет путем сравнения оценивать иммунологическую реэистентность организма в процессе лечения для одного больного,Максимальный гемолиз наступает в пробе с пропорционально одинаковыми количествами антигена и антител. При пропорционально одинаковых количествах антнгена и антител их взаимодействие приводит к агглютинации эритроци тов и лиэису последних под влиянием комплемента. Нарушение пропорциональ635970 Формула изобретения Составитель С.МалютинаТехред О.Андрейко Корректор Д.Мельниченко евихи.и.,а Заказ 6824/4 Тираж 661 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035 Москва ЖРа ская набд ц 45Филиал ППП фПатентф, г.ужгород, ул.Проектная, 4 ности в ту или иную сторону уменьшаетстепень гемолиза, а вместе с тем иокраску раствора, так как избыточныеантитела, блокируя антиген, препятствуют его адсорбции на эритроцитах,Это уменьшает агглютинацию эритроцитов и их гемолиз, Избыток же антигена блокирует активные центры антител,благодаря чему агглютинация становитсяменее выраженной, и уровень гемолизападает,Установлено,что максимальный гемолиэ в пробах с максимальной концентрацией туберкулина на взятые дозы исследуемой среды с предельно высоким уровнем противотуберкулезных антител является показателем высокой иммунологи ческой резистентности организма. Максимальное окрашивание в пробах с минимальными концентрациями туберкулинасоответствует низкому уровню антители низкой иммунологической резистентности,Смещение зоны максимального гемолиза от малых концентраций туберкулина к большим в процессе леченияявляется показателем нарастания иммунологической реэистентности и объективным критерием эффективности проводимого лечения,ПримерВ начале лечения пробы гепаринизированной крови по 0,02 мл помещают 30в возрастающие концентрации туберкулина от 0 до 4,0 мг/мл с интервалом0,5 мг/мл в одинаковых количествахфизиологического раствора, напримерпо 0,3 мл, Смесь инкубируют 2 часа в 35отермостате при температуре 37 С, периодически помешивая. Инкубация заканчивается в последующие 2-3 суток.притемпературе 20-25 ОС до появления первых визуальных признаков гемолиза в 40любой из опытных проб.После этого отделяют надосадочнуюжидкость в количестве 0,1 мл из каждойпробы и помещают в одинаковые количества бензидинового реактива, например по 1,5 мл. Степень окраски оценивают количественно на фотоэлектроколориметре ивыявляют пробу с максимальным гемолизом, количество туберкулина в которойявляется показателем уровня антител ихарактеризует исходное состояние иммунологической резистентности организма.В процессе лечения с интервалом15-30 суток исследование повторяют,вычитают предыдущий показатель изпоследующего и, если разность меньшенуля, лечение считают эффективным, апри разности большей или равной нулюпри максимальных концентрациях туберкулина - лечение неэффективно,Способ позволяет объективно и свысокой точностью судить об эффективности проводимого лечения уже через15-30 суток от начала леченияЭто дает возможность своевременно,не ожидая результатов рентгенологического исследования, менять лечениепри его неэффективности,Способ определения эффективности лечения туберкулеза путем инкубирования пробы гепаринизированной крови с туберкулином, отделения надосадочной жидкости и определением степени гемолиза, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения, равные количества надосадочной жидкости вводят в равные объемы бензидинового реактива и по разности интенсивности гемолиза до и после лечения определяют эффективность лечения,Источники информации, принятые вовнимание при экспертизе:1, Проблемы туберкулеза, 1976,Р 5, с.40-43,2, Авторское свидетельство СССРФ 271726, кл. А 61 В 10/00, 1966,