Способ выращивания микроорганизмовi2

О П И С А Н И Е 3784 ОБИЗОБРЕТЕН ИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Соеетсииз Социалистическиз РеспубликЗависимое от авт, свидетельства-Кл. С 12 Ь 1/0 С 12 с 11/ М 1610132/28-13) явлено 07.1,197 присоединением заявкиюитет ло дела иорите изобретений и открыти ори Совете Министров СССР, И. Козлова, М. И, Рожкова, В. А, и О. И. Великославинская Е. Попо есоюзный Заявите чно-исследовательскии институт ои белковых веществ нтез СП льши п2,4 г 0,9 г0,15 г о 1000 л Изобретение относится к микрооиологической промышленности, в частности к выращиванию микроорганизмов на углеводородныхфракциях, и включает способ микробиологической депарафинизации углеводородного 5сырья.Известны способы выращивания микроорганизмов, например дрожжей, на питательнойсреде, содержащей углеводородные фракции,соединения азота, фосфора, калия, магния, 1 Опри аэрации с последующим отделением биомассы микроорганизмов от депарафинизированных углеводородов,Цель изобретения - увеличить выход био.массы и снизить температуру застывания углеводородной среды.Это достигается тем, что в питательнуюсреду непрерывно добавляют картофельныйсок - отход крахмало-паточного производствав количестве, преимущественно равном 0,1 - 1 20вес. %, и поддерживают рН в процессе выращивания, преимущественно равным 4,0 - 4,2.Предлагаемый способ заключается в следующем. Культивирование микроорганизмов,например дрожжей, осуществляют и периодическим и непрерывным способами,Культивирование микроорганизмов непрерывным способом проводят в ферментаторахпри перемешивании и аэрации в нестерильныхусловиях в водной питательной среде с нефтя ЗО ными дистиллятами в присутствии небо х количеств отходов крахмало-паточной ромышленности - картофельного сока.В качестве источника углерода используют нефтяные дистилляты парафинистой и высокопарафинистой нефти, содержащие 10 - 45% нормальных парафинов.Водная питательная среда состоит из раствора солей, содержащих ионы аммония, фосфата, калия, магния. В процессе выращивания поддерживают температуру 25 - 45 С (для дрожжей 32 - 34 С), а рН 3 - 9 (для дрожжей - 4 - 5), регулируют добавлением раствора едкого натра, В ферментаторы непрерывно подают углеводородное сырье и водную питательную среду, причем отбирают дрожжевую суспензию в таком же количестве. Коэффициент разбавления среды изменяют в процессе от 0,07 до 0,5 час-,П р и м е р 1. Культивирование дрожжей Сапд 1 да зр. Нв условиях периодического оыа проод в коисих колба на 500 лтл, содержащих 50 лтл водной питательной среды следующего состава:Сернокислый аммоний 6 г Калий фосфорнокислыйоднозамещенныйМагний сернокислыйКальций хлористыйВода водопроводная д лСостав питательной среды:Нефтяной дистиллятСульфат аммонияОртофосфорная кислота (70%)Калий хлористыйМагний сернокислыйЖелезо сернокислоеМарганец сернокислыйЦинк сернокислыйМедь сернокислаяВодаКартофельный сок Предмет изобретения 150 мл 12,74 г 1,99 мл 0,637 г 0,321 г 4 мг 8 мг 8 мг 0,8 мг до 1 л 0,75% к протоку 40 45 50 55 Составитель В. ЯкубинаТехред Т. Миронова Корректор Е. Сапчнова Редактор Л. Народная Заказ 338/1075 Изл,478 Тираж 467 ПодписноеЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Тип. Харьк. фпл. пред. Патент Нефтяной дистиллят,фракция 240 - 360 С изнефти ставропольскогоместорождения, содержащей40% комплексообразующихуглеводородов 10 об, %Картофельный сок 1% к объемукультуральноисреды В качестве посевной культуры используют дрожжи, смытые с агаризованных сред, в количестве 0,06 мг/л (в пересчете на сухое вещество),Дрожжи культивируют в стерильных условиях на круговой качалке (240 об/мин) 48 час по 32 С и рН, равном 4,0 - 4,5.Биомассу дрожжей отделяют от среды центрифугированием в присутствии неионогенного ПАВ из расчета 0,1% активного вещества к объему среды а затем промывают от остатков ПАВ водой, подогретой до 40 С, При добавлении 1% картофельного сока к объему среды прирост биомассы в пересчете на сухое вещество составляет 10,9 г на килограмм среды, т. е. по сравнению с контролем, принятым за 100%, равен 178,8%, Температура застывания нефтяного дистиллята снижается на 12 С по сравнению с контрольным опытом.П р и и е р 2. Дрожжи Сапйс 1 а дц 1111 еггпопдй Нвыращивают непрерывным способом в ферментаторах с аэрацией и перемешиванием на нефтяных дистиллятах с содержанием 46% -н-парафинов и температурой застывания плюс 6 С. Процесс ведут при рН среды, равном 4,0 -- 4,2, температуре 31 - 32 С, удельном расходе воздуха 60 об/об, час, коэффициенте разбавления 0,2 час-. 5 10 15 20 25 30 35 Процесс контролируют через каждые два часа по концентрации дрожжей в ферментаторе, рН, температуре, остаточному содержанию азота и фосфора в среде,Дрожжевую суспензию из ферментатора подают в сборник, где происходит расслоение суспензии на два слоя: верхний - биомасса дрожжей в нефтяном дистилляторе и нижний - водный.Верхний слой обрабатывают раствором неионогенного ПАВ из расчета 0,1% активного вещества к объему слоя, Смесь перемешивают и разделяют на сепараторе с 5000 оборотов в минуту. Нефтяной дистиллят собирают в сборник и определяют температуру его застывания, Дрожжи после сепарации сушат на распылительной сушилке при 105 С.Производительность ферментера в среде, содержащей 0,75% картофельного сока, составляет 6,24 кг с тонны среды в час, а в контрольном варианте - 4,34 кг/т. час. Следовательно, при добавлении к среде картофельного сока производительность аппарата возрастает до 143,8% по сравнению с контролем, принятым за 100%. Выход дрожжей с 1 т нефтяного дистиллята в контроле составляет 180,8 кг, а при добавлении картофельного сока - 260,0 кг. В контрольном варианте температура застывания нефтяного дистиллята снижается на 5 абс., а при добавлении 0,75% картофельного сока - на 13 абс, Содержание комплексообразующих углеводородов снижается в контрольном варианте с 46 до 34%, а при добавлении картофельного сока - до 17%, т. е, степень депарафинизации возрастает в 2,8 раза. Способ выращивания микроорганизмов, например дрожжей, на питательной среде, содержащей углеводородные фракции, соединения азота, фосфора, калия, магния, в условиях аэрации с последующим отделением биомассы микроорганизмов от депарафинизированных углеводородов, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода биомассы и снижения температуры застывания углеводородной среды, в питательную среду непрерывно добавляют картофельный сок - отход крахмало-паточного производства в количестве, преимущественно равном 0,1 - 1 вес. %, и поддерживают рН в процессе выращивания, преимущественно равным 4,0 - 4,2.