Способ определения функционального состояния кроветворения у экспериментальных животных

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК А 61 В 10/О ЕТЕН ВТОРСКОУУ СВ ЕЛЬСТВУ ственныи медиурденко рюкова наборов оводстНКЦИО- ТВОРЕ- ЛЬНЫХ енетике й четкой ункцио- метафазСпособа дующим об вляюГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТПРИ ГКНТ СССР ИСАНИЕ И(71) Воронежский государцинский институт им. Н.Н.Б(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ КРОВЕНИЯ У ЭКСПЕРИМЕНТАЖИВОТНЫХ(57) Изобретение относится к цитои разработано на основе выявленносоподчиненности между типами фнально-структурной организации Изобретение относится к цитогенетике и может быть использовано в медико-биологических исследованиях.Цель изобретения - выявление на более ранней стадии функционального состояния костномозгового кроветворения, на более ранних стадиях развития кроветворных клеток. Способ позволяет осуществлять контроль за направлением перестройки в организме на основе интенсивности дифференцирования мегакариоцитарного, лейкоцитарного и эритроидного рядов кроветворных клеток. 1697747 А 1 ных хромосомных наборов и образованием определенных типов кроветворных клеток в костном мозге. С целью осуществления контроля за направлением гемопоэза и выявления патологии осуществляют отбор хромосомных наборов без выбора по степени спирализации, выявляют типы хромосомных наборов и подсчитывают их соотношение. Затем определяют митотическую активность костного мозга. Результаты по интенсивности образования различных типов хромосомных наборов и митотической активности, полученные при действии экстремальных факторов, сравнивают с контролем и вь 1 являют патологию и адаптивные изменения в организме на доклеточном-хромосомном уровне по направлениям дифференцировки профилирующих родоначальных кроветворных клеток. зом.На стандартно приготовленных микро- препаратах хромосом из популяции клеток костного мозга проводят анализ метафазных пластинок без выборки по степени Спирализации, но с полным числом, минимальным наложением и четко различимой морфологией хромосом, выявляют их морфологические типы. Путем подсчета в каждой метафазной пластинке числа субтелоцентрических, акроцентрических и метацентрических хромосом определяют типы1697747 му способу. У нее насчитывали 18,70 хромосомных наборов 1 типа, 43,80 - 11 типа, 37,5% - П типа, митотическая активность 14,2 на 1000 клеток. Количество лейкоцитовв периферической крови 7,56 109/л. На большом фактическом материале - пяти экспериментальных моделях (гипоксия, спленэктомия, асептическое воспаление, кровопотеря, рентгеновское облучение), прослеженных в динамике, до казано, что по предлагаемому способу возможно точнее осуществлять диагностику состояния костномоэгового кроветворения при изучении экстремальных воздействий физической, химической и биологической природы на организм млекопитающих в медико-биологических исследованиях. 10 15 20 Формула изобретения 25 30 35 40 Составитель А.ДревальРедактор М.Кобылянская Техред М,Моргентал Корректор И.Муска Заказ 4341 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб;, 4/5Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 хромосомных наборов в статически достоверных количествах и считают их соотношение. Затем определяют митотическую активность клеток костного мозга путем подсчета клеток в митозе на 1000 просмотренных. Данные митотической активности при различных экстремальных воздействиях сравнивают с результатами обследования контроля и выявляют отклонения.П р и м е р 1. Крысе (самец массой 180 г) вводили подкожно скипидар из расчета 1 мл на 100 г массы. На третьи сут. после введения скипидара животное умертвляли, готовили препараты хромосом из костного , мозга по общепринятой методике,Отбор метафазных пластинок хромосом проводили без выборки по степени спирализации, но с полным числом, минимальййм наложением и четка различимой морфологией хромосом. В каждой такой метафазной пластинке считали общее число и количество субтелоцентрических, акроцентрических и метацентрических хромосом.Из 42 хромосом набора насчитывали в типе(мегакариоцитарного ряда) 26 акроцентрических и 14 метацентрических, в типе 11 (лейкоцитарного ряда) - 24 акроцентрических и 16 метацентрических, в типе Н (эритроидного ряда) - 22 акроцентрических и 18 метацентрических и, кроме того, в каждом из них - по одной паре крупных субтелоцентрических аутосом. Затем вычисляли процентное соотношение типов хромосомных наборов. Так, у обследованного животного на третьи сутки в состоянии асептического воспаления обнаружили 22,70 хромосомных наборов 1 типа, 68,2% И типа и 9,10 - Ш типа.Далее определяли митотическую активность путем подсчета клеток в митозе на 6000 просмотренных и делали пересчет на 1000 клеток костного мозга - 25,0 на 1 ООО.Содержание лейкоцитов в периферической крови 9,8 х 109/л.П р и м е р 2. Крысе(самец массой 180 г) контроль и анализ проводили по описанноСпособ определения функционального состояния кроветворения у экспериментальных животных при экстремальном воздействии, заключающийся в отборе для анализа метафазных хромосомных наборов из популяции клеток костного мозга экспериментальных животных, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью раннего выявления изменений, осуществляют отбор метафазных хромосомных наборов без выбора по степени спирализации, подсчитывают в них количество различных морфологических типов хромосом, устанавливают типы хромосомных наборов, определяющих дифференцировку основных рядов кроветворных клеток, и высчитывают их соотношение, при этом определяют митотическую активность клеток костного мозга, а затем сравнивают интенсивность образования различных структурно-функциональных типов хромосомных наборов в контроле и при действии экстремальных факторов по ее изменению определяют функциональное состояние кроветворения,