C12N 1/21 — модифицированные введением чужеродного генетического материала

Штамм бактерий jersinia реsтis продуцент цамф связываюшего белка

Загрузка...

Номер патента: 1668386

Опубликовано: 07.08.1991

Авторы: Шевченко, Валенцев

МПК: C12N 1/21

Метки: штамм, реsтis, белка, jersinia, продуцент, цамф, бактерий, связываюшего

...белка в надосадочной жидкости, вносимой в пробу для определения цАМФ, составляет40 - 60 мкг.При определении цАМФ инкубацию образцов проводят на ледяной бане в течение 2 ч. Отделение белок-связанного цАМФ от несвязанного нуклеотида осуществляют адсорбцией свободного нуклеотида на угле марки "НоритА", для чего в каждую пробу добавляют 100 мкл угольной суспензии (2,60 раствор угля, 2 раствор БСА в буфе ре "А") с последующим центрифугированием при 10000 9 в течение 1 мин, Равные количества суспернатанта (200 миа)иэ аликвот помещают во флаконы и просчитывают на жидкостном сцинтилляционном счетчи ке, С помощью "слепой" пробы определяютуровень неспецифически сорбирующейся радиоактивности. Этот фон вычитают из значения радиоактивности в каждой...

Рекомбинантная плазмидная днк 22, кодирующая синтез интерферона -11 человека, и штамм бактерии рsеudомоnаs sp. -продуцентинтерферона -11 человека

Загрузка...

Номер патента: 1703690

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Стеркин, Монастырская, Скворцова, Юрин, Свердлов, Цыганков, Стронгин, Козлов, Чистосердов, Долганов, Евдонина, Народицкая, Царев, Еремашвили

МПК: C12N 15/21, C12N 1/21, A61K 37/66 ...

Метки: днк, человека, продуцентинтерферона, рекомбинантная, кодирующая, рsеudомоnаs, штамм, интерферона, синтез, плазмидная, бактерии

...вводят плазмиду 8751, которая обеспечивает устойчивость к триметаприму,Высев конъюгатов производят на минимальную агаризованную солевую среду Адамса, содержащую следующие компоненты: глюкоза 4 мг/мл; тизмингидрохло 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 рид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; лейцин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл; стрептомицин 75 мкг/мл; триметаприм 75 мкг/мл, В этих условиях вырастают только коньюгаты Е.со 1 С 600 (К 751, рИЧ 22), Затем проводят коньюгацию между Е,со 1 С 600(В 751, рЧМ 22) и Рзеобоаопаз зр, 31 с дефектным геном йг А Коньюгаты вырастают на минимальной агариэованной солевой среде следующего состава: глюкоза 4 мг/мл; тиамингидрохлорид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл, стрептомицин 200 мкг/мл,...

Рекомбинантная плазмидная днк 14, кодирующая полипептид, со свойствами лейкоцитарного интерферона 2 человека, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент полипептида со свойствами лейкоцитарного интерферона 2 человека

Загрузка...

Номер патента: 1703691

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Добрынин, Филиппов, Кравченко, Гилева, Коробко, Чувпило

МПК: C12N 15/21, C12N 1/21

Метки: свойствами, плазмидная, интерферона, еsснеriснiа, продуцент, штамм, днк, полипептид, полипептида, человека, лейкоцитарного, рекомбинантная, бактерий, кодирующая

...Из гибридизующихся с этой пробой клонов выделяют плазмидную ДНК, строение которой подтверждают рестриктным анализом с помощью рестриктаз Наб, Мзри Най+ЯаОК раствору 10 мкг ДНК плазмиды Р 6 А 23/Яа в 80 мкл буфера В без МаСГприбавляют 20 ед. каждой из рестрикционных нуклеаз Яаф и Крп и инкубируют 90 мин при 37 С, Анализ полноты гидролиза и выделение векторного Крп/ЯаГ-фрагмента (3,4 т,п о) проводят при помощи электрофореза в 1 -ном геле легкоплавкой агароэы, Одновременно 10 мкг ДНК плазмиды р ецГт 17 в 100 мкл буфера В обрабатывают 1,5 ч при 37 С 20 ед, каждой из рестриктаэ 89 г и ЯаГ, после чего фрагмент величиной около 500 п,о., содержащий синтетический ген а 2 интерферона, выделяют при помощи электрофореза в 5 ь-ном...

Рекомбинантная плазмидная днк -1 1-13, кодирующая синтез фибробластного интерферона ( i) человека, способ ее конструирования, штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент i-интерферона человека

Загрузка...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Дебабов, Янулайтис, Гервинскас, Евдонина, Стеркин, Изотова, Козлов, Костров, Юрин, Мочульский, Плотникова, Борухов, Болотин, Трухан, Подковыров, Бумялис, Стронгин, Скворцова, Лебедева, Рыжавская, Лившиц, Лапидус, Машко, Носовская, Алексенко

МПК: C12N 1/21, C12N 15/23, C12P 21/00 ...

Метки: синтез, i-интерферона, днк, бактерий, плазмидная, человека, конструирования, штамм, еsснеriснiа, рекомбинантная, интерферона, продуцент, кодирующая, фибробластного, 1-13

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...

Рекомбинантная плазмидная днк 2-19, кодирующая синтез интерлейкина-2 человека, способ ее конструирования штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент интерлейкина-2 человека

Загрузка...

Номер патента: 1703693

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Косиков, Дебабов, Носовская, Скворцова, Стеркин, Черновская, Романчикова, Козлов, Костров, Стронгин, Авот, Грен, Мазель, Юрин, Трухан, Мочульский, Машко, Циманис

МПК: C12N 15/26, C12N 1/21

Метки: синтез, 2-19, бактерий, рекомбинантная, человека, интерлейкина-2, конструирования, штамм, плазмидная, продуцент, днк, еsснеriснiа, кодирующая

...ДНК длиной =750 п.нвырезает и проводят элюцию ДНК. Для достройки о,;ноцепочечных концов ДНК с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы 1 Е со, выделенный из геля фрагмент обоа;э; .пгают в пробе объемом 20 мкл, содер,кэ.,ей 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 10 мМ МдС 1:, по ЗО мкМ дезоксирибонуклеозидтрифосфатов Реакцию останавливают прогреванием, ДНК из смеси переосаждают этанолом и растворяют в 20 мкл,Полученный препарат фрагмента плазмиды рАА 1213-23 В используют на дальнейших этапах конструирования для интеграции кодирующей части интерлейкиначеловека в векторную плазмиду рВВ 124 В.3 мкг ДНК плазмиды рВВ 124 В расщепляют рестриктазой ВагпН в пробе обьемс . 12 мкл, содержащей буфер для рестрикци:- Реакцию останавливают фенольной...

Штамм бактерий yersinia реsтis, предназначенный для проведения генетических и микробиологических исследований

Загрузка...

Номер патента: 1705342

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Сатыбалдиев, Сулейменов, Атчабаров, Исин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/01

Метки: проведения, реsтis, yersinia, штамм, предназначенный, генетических, исследований, микробиологических, бактерий

...было показанов опытах 1 и чтго. Активным началом ПМЛ иМФ являются дериваты кислорода: супероксидный анион (ОН), перекись водорода(Н 202) и др,Мутагенное действие фагоцитов на чумной микроб в опытах 1 п ч 1 тго продемонстрировано в работе Атчабарова с соавт 4),Мутант У.резтз КМ, получен из природного штамма. У.резт 1 з С1 п ч 1 чо поддействием стимулированных и резидентных ПМЛ и МФ в брюшной полости большой песчанки ВовЬогпз ор 1 тцз)основного носителя чумного микроба в пустынных очагах чумы.В опытах используют, как и 1 п чго,предварительную стимуляцию выхода вбрюшную полость большой песчанки ПМЛс последующим введением туда чумногомикроба и смывом его после умершвленияживотного. Оценку результатов взаимодействия фагоцитов и возбудителя...

Рекомбинатная плазмидная днк рвgнтrр 3, кодирующая гормон роста крупного рогатого скота, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гормона роста крупного рогатого скота

Загрузка...

Номер патента: 1708847

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Рубцов, Позмогова, Скрябин, Горбулев, Голова, Шульга, Чернов, Чупеева, Баев, Свердлова, Садиев

МПК: C12N 15/18, C12N 1/21

Метки: бактерий, кодирующая, продуцент, еsснеriснiа, рогатого, крупного, плазмидная, роста, скота, гормон, рекомбинатная, рвgнтrр, днк, гормона, штамм

...20 вМ, Реакционную смесь экстрагируют равным объемом смеси фенол:хлороформ. ДНК из водной фазы осаждают спиртом, высушивают, растворяют в водефракционируют в 1 Д агарозном геле, Нужный фрагмент ДНК (Рчц И - Есой - фрагмент размером 680 п,о.) элюируют из легкоплавкой агарозы с помощью стандартной процедуры осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде,0,5 мкг Рчц 1 - Есой - фрагмента инкубируют в 10 мкл срднесолевого буфера с 5 ед. рестриктазы Н 1 пб И 1 в течение 1 ч при 37 С, ДНК из реакционной смеси осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде.Для получения вектора из плазмиды зуп/рВй 327 4 мкг ДНК гидролизуют в 20 мкл инкубационной смеси на основе среднесолевого буфера, содеожащей 15 ед. Рчц И и 20 ед, Н 1 пб 1 И, в...

Рекомбинантная плазмидная днк, кодирующая кор-антигенвируса гепатита в, лишенный днк 39с концевых аминокислот с экспонированным на его поверхности эпитопом pre s 1-55, способ ее конструирования и штамм бактерий

Загрузка...

Номер патента: 1713930

Опубликовано: 23.02.1992

Авторы: Осе, Борисова, Петровский, Пумпен, Лосева, Пушко, Грен, Озолс, Берзин, Цибиногин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/51, C12N 15/70 ...

Метки: рекомбинантная, днк, бактерий, кор-антигенвируса, аминокислот, штамм, гепатита, 1-55, поверхности, концевых, эпитопом, кодирующая, плазмидная, конструирования, экспонированным, лишенный

...и инкубируют 30 мин при . 4 С, Лизат осветляют центрифугированием 30(10 000 д, 4 С, центрифуга). НВс Ад Ь - рге 52 (1-55) очищают следующим образом, Ли. зат подвергают фракционированию сульфатом аммония. НВс Ад Ь - рге 52 (1-55) собирают в осадке, полученном при 30% 35 насыщения. сульфатом аммония. Осадок растворяют в 0,04 М фосфате натрия, рН 8,0;0,15 М йаС, 0,1 тритоне Х 100 до конечйой концентрации белка 25-50 мг/мли 6-7 мл этого раствора наносят на колонку с Сефа-. 40 розой С 4 В (2,1 х 75 см), уравновешенную .тем же буфером, но без тритона Х 100, Фрак- ции. проявляющие НВсАд-активность, собирают и используют либо непосредственно, либо после концентриро вания переосаждением 50%-ным сульфатом аммония.Определение...

Рекомбинантная плазмидная днк 10fmd, кодирующая гибридный белок р204-as р с с vpi200-213 р р s р ( 131-160) и штамм бактерий еsснеriснiа coli -продуцент гибридного белка р204а р с с v pi200-213-р р s р vpi 131-160

Загрузка...

Номер патента: 1724691

Опубликовано: 07.04.1992

Авторы: Филиппов, Иванющенков, Добрынин, Микульскис, Коробко, Некрасова, Болдырева, Бурдов, Чепуркин, Дрягалин

МПК: C12N 15/42, C12N 1/21

Метки: р204а, продуцент, еsснеriснiа, рекомбинантная, штамм, белок, 131-160, белка, кодирующая, бактерий, р204-as, днк, плазмидная, vpi200-213, pi200-213-р, 10fmd, гибридный, гибридного

...Р 204, который представляет собой белок фактора1724691 некроза опухолей человека, слитый черездипептид АзрРго с последовательностьюантигенной детерминанты подтипа А 22 вируса ящура..Для получения бактериального штамма- продуцента иммуногенного полипептидаР 204 плазмидой р 10 РМО трансформируюткомпетентные клетки Е, соИ 3620050,Полученные таким образом штаммы Е.соИ 3620050/р 10 РМО (В КПМ В) характеризуются следующими признаками.Морфологические признаки.Клетки мелкие утолщенной палочковидной формы, грамьтрицательные, неспороносные.Культуральные признаки.Клетки хорошо растут.на простых питательных средах, При росте на агаре "Дифко"колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящие, серые, край ровный, Приросте в жидких средах (на...

Фрагмент днк, кодирующий гормон роста овцы, рекомбинантная плазмидная днк роgнтrр11, кодирующая синтез гормона роста овцы, штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гормона роста овцы

Загрузка...

Номер патента: 1730150

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Садиев, Баев, Рубцов, Горбулев, Скрябин, Шульга, Сагадиев

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: гормона, еsснеriснiа, овцы, роста, бактерий, кодирующая, продуцент, плазмидная, фрагмент, синтез, роgнтrр11, днк, гормон, рекомбинантная, кодирующий, штамм

...работы отобрали плазмиду, содержащую Есой 1-Н 1 пб И 1-фрагмент с геном ГР КРС размером 601 п.ообозначенную рВОН Ва 112;П р и.м е р 2. Получение фрагмента ДНК,кодирующего ГР овцы.А) Клонирование фрагмента ДНК, коди рующего ГР КРС, в векторе М 13(фиг, 6).10 мкг плазмидной ДНК рВОНВа 12гидролизовали рестриктазами Есой 1 и НпбИ 1 в 50 мкл инкубационной смеси следующего состава: 50 вМ йаС 1, 10 вМ 5 трисНС 1. рН 7,5,10 вМ МяС 2, 1 еМ дитиот-рейтола(ДТТ), 10 ед; рестриктазы Есойи 10 ед. рестриктазы Н 1 пбИ, в течение 2 ч при 37 С.Проводили разделениефрагментов ДНКв 1агарозном геле и выделяли из геля фрагмент раз мером 601 п,оиспользуя стандартный метод.5.мкг ДНК репликативной формы бактериофага М 13 вр 8 гидролизовалирестриктазами...

Рекомбинантная плазмидная днк р 9 f мд, кодирующая гибридный полипептид р199 asp pro cys cys vp1 200 213 pro pro ser pro vp1 131 152 pro cys gly и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гибридного полипептида р199 asp pro cys gly vp1 200 213 pro pro ser pro vp1 131 152 pro cys gly

Загрузка...

Номер патента: 1730151

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Коробко, Дрягалин, Иванющенков, Чепуркин, Микульскис, Добрынин, Болдырева, Некрасова, Бурдов, Филиппов

МПК: C12N 15/42, C12N 1/21

Метки: гибридного, кодирующая, р199, м.д, бактерий, днк, гибридный, полипептид, плазмидная, рекомбинантная, продуцент, еsснеriснiа, полипептида, штамм

...кодирует иммуногенный пептид Р 199, который представляет собой белок фактора некроза опухолей человека, слитый через дипептид АзрРго с последовательностями антигенных детерминант подтипа Аг 2 вируса ящура,Для получения бактериального штамма - продуцентов иммуногенного полипептида5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Р 199 плазмидой р 9 ЕМО трансформируюткомпетентные клетки Е. соИ 3620050.Полученный таким образом штамм Е.соИ ВКПМ Вхарактеризуется следующими признаками,Морфологические признаки, Клеткимелкие утолщенной палочковидной формы,грамотрицательные, неспороносные,Культуравьные признаки. Клетки хорошо растут на простых питательных средах.При росте на агаре "Дифко" колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящиесерые, край ровный. При...

Рекомбинантная плазмидная днк blv 51-3, кодирующая кор антиген вируса гепатита в с экспонированным на его поверхности эпитопом blv 51 (56-103), вируса лейкоза крупного рогатого скота способ ее конструирования и

Загрузка...

Номер патента: 1742331

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Платцер, Пумпен, Дрейлиня, Лосева, Цибиногин, Берзин, Борисова, Осе, Ульрих, Пушко, Грен, Розенталь, Сиаккоу, Озолс

МПК: C12N 15/51, C12N 15/48, C12N 1/21 ...

Метки: 56-103, кор, поверхности, скота, кодирующая, экспонированным, гепатита, антиген, днк, крупного, рогатого, конструирования, 51-3, эпитопом, лейкоза, плазмидная, вируса, рекомбинантная

...разбавляют в 4 раза дистиллированной водой и подвергаютф ра кциони рован и ю сульфатом аммония. 20Н ВсАд Ь - ВО/др 51(56 - 103) собирают восадке, полученном при 30 насыщениясульфатом аммония. Осадок растворяют в0,05 М трис-НС 1, рН 8,0, 0.15 М йаО, 0,1тритоне Хдо конечной концентрации .25белка 25 - 50 мг/мл, и 2 - 4 мл этого раствора наносят на колонку с сефарозой (1,6 х 100см), уравновешенную тем же буфером, нобез тритона Х. Фракции, проявляющиеНВсАд-активность, собирают и используют 30либо непосредственно, либо после концентрирования переосаждением 50-нымсульфатом аммония,П р и м е р 3. Определение НВсАд-активности методом РИД. 35Титр НВсАд определяют с помощью радиальной иммунодиффузии по Ухтерлони,Для этого готовят двухкратные...

Рекомбинантная плазмидная днк frblv f6, кодирующая слитый белок оболочки бактериофага и белок оболочки 51 вируса лейкоза крупного рогатого скота, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli прод

Загрузка...

Номер патента: 1744110

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Грен, Сиаккоу, Озолс, Пушко, Ульрих, Розенталь, Дрейлиня, Козловская, Платцер, Соминская, Пумпен

МПК: C12N 1/21, C12N 15/70, C12N 15/33 ...

Метки: конструирования, слитый, белок, днк, штамм, кодирующая, бактериофага, прод, оболочки, frblv, лейкоза, плазмидная, рекомбинантная, вируса, рогатого, бактерий, крупного, еsснеriснiа, скота

...50 мМ трис-НС, рН 7,5; 10 мММдС 2, 10 мМ дитиотрейтол, 50 Ы АТР и 10ед, Т 4 ДНК-лигазы, в течение 12 ч при 4 С,Фрагмент инактивируют нагреванием при650 С в течение 15 мин, К реакционной смесидобавляют 100 мкл клеток Е,соИ ВВ 1, обработанных 100 мМ СаС 2 (конечная концентрация - 5 х 10 клеток/мл), длятрансформации клеток,Отбор клонов осуществляют путем экспресс - выделения ДНК и ее рестрикционного анализа, а также секвенирования.Плазмида с ожидаемой последовательностью получает наименование рГРВ Ч-Р 6,Конструирование рекомбинантнойплазмидной ДНК рЕРВ ЧзР 6,2 мкг плазмиды рРРВ Ч-Г 6, выделенной стандартным методом, расщепляют 3.ед, растриктазы Есо 781 и 3 ед, рестриктазыЗзр 1 в 25 мкл раствора А, содержащего100 мМ трис-НС, рН 7,5; 50 мМ...

Способ оценки радиационного воздействия

Загрузка...

Номер патента: 1747490

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Владимиров, Шерлина, Белохвостов, Семухина, Воскресенский

МПК: C12N 15/12, C12N 1/21

Метки: оценки, радиационного, воздействия

...добавляя 3 объема охлажденного до -20 С этанола, Осадок собирают центрифугированием, Полученный препарат ДНК вновь растворяют в малом объеме (0,1-0,2 мл) ТЕ-буфера (10 мМ трис-Н С (рН 8,0), 1 м М ЭДТА-Ма) и переосаждают еще один раз тремя объемами этанола. Очищенную низкомолекулярную ДНК растворяют в 20-30 мкл ТЕ-буфера, проверяют, нанося 2-3 мкл пробы на ПАГ для электрофореза и, убедившись в наличии ДНК, используют ее в качестве малого )Л-Фрагмента для конс-руирования рекомбинантной молекулы В 58. В качестве ВГ-формы ДНК бактериофага М 13 вр 8 берет препарат фирмы АгпегзЬаа (Великобритания) в концентрации 1 мг/мл. 2 мкг ЯГ-формы ДНК бактериофага М 13 гпр 8 смешивают с рестриктазой Япа (15 ед) в буфере 1(20 мМ КС,10 мМ трис-НС(рН 8,0),...

Рекомбинантная плазмидная днк pil-221, кодирующая человеческий интерлейкин-2, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент человеческого интерлейкина-2

Загрузка...

Номер патента: 1761805

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Кравченко, Данилюк, Синяков, Кьамынина, Сандахчиев

МПК: C12N 15/26, C12N 1/21

Метки: интерлейкин-2, человеческий, pil-221, бактерий, рекомбинантная, интерлейкина-2, конструирования, продуцент, кодирующая, человеческого, днк, штамм, еsснеriснiа, плазмидная

...ДНК-полимеразы (фрагмент Кленова) и выдерживают еще 10 мин при 10 С. 10мкл смеси используют для трансформациикомпетентных клеток Е.со 3 М 10 . Из колоний, имеющих фенотип Ар, Тс, выделяютплазмидную ДНК, обозначенную рВ, ипроводят Маги (Есор -ЯаО )-рестрикционный анализ, Правильность структуры нуклеотидов в области сайтов Есори ЯаОподтверждают методом Максама-Гилберта.П р и м е р 2, Конструирование рекомбинантной плазмиды рВ 1:2,20 мкг репликативной формы ДНК фагаМ 1 з гра гидролизуют в 100 мкл буфера 2 50ед, рестриктазы Есор1 ч при 37 С. Есор-Есор-фрагмент (198 п,о,) выделяют в 6%ПААГ,1 мкг ДНК плазмиды рВ -2 гидролизуют в 20 мкл буфера 2 рестриктазой Есогвописанных выше условиях, Смесь 0,25пкмоль линейной формы рВ:2,пкмоль(Есор -Есор...

Штамм бактерий bacillus амylоliquеfасiеns-продуцент амилазы bacillus liснеnifоrмis

Загрузка...

Номер патента: 1788966

Опубликовано: 15.01.1993

Авторы: Вольфович, Орлова, Козлов, Народицкая, Йомантас, Дебабов, Болотин, Рябченко, Сорокин, Баев, Стеркин, Попов

МПК: C12N 1/21

Метки: амylоliquеfасiеns-продуцент, liснеnifоrмis, бактерий, штамм, bacillus, амилазы

...маркеров плазми1. Устойчивость к эритромицину клеток В.агпу 1 оИцце 1 асепз (В), содержащих плаэмиду рВАТАМ 2, анализируют на среде с содержанием эритромицина 5 - 20 мкг/мл. Данные клетки растут на средах с такой концентрацией эритромицина.2. Наличие секретируемой термостэбильной а -амилазы в клетках В,агпу 1 оИцце 1 асепз (В), содержащих плазмиду рВАТАМ 2, устанавливают следующим образом: клетки из отдельных клонов наносят микробиологической петлей на чашку Петри с твердым 1 В-агаром, содержащим 0,15% амилопектиназура, в виде точек или полос и инкубируют при 37 С 18 - 24 час. Вокруг выросшей массы клеток образуется прозрачная зона гидролизованного амилопектиназура. Клетки исходного штамма - реципиента В.ату 1 оИс 1 цеГасепз (В),...

Рекомбинантная плазмидная днк рр1, определяющая синтез гибридного белка,обладающего антигенными свойствами вируса иммунодефицита человека 1, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент

Загрузка...

Номер патента: 1816797

Опубликовано: 23.05.1993

Авторы: Шуленин, Гараев, Бобков

МПК: C12N 15/48, C12N 1/21

Метки: конструирования, определяющая, рр1, белка,обладающего, еsснеriснiа, продуцент, вируса, иммунодефицита, гибридного, человека, свойствами, рекомбинантная, бактерий, антигенными, синтез, плазмидная, штамм, днк

...ДНК проводят методом равновесного центрифугирования в градиенте плотности СзС 1 с бромистым этидием (1 мкг/мл),Для получения плазмиды рР 1 фрагмент Н 1 пб 111 - Е.сой 1 плазмиды рйТЗ переклонируют в вектор рцй 290 по сайту Нпб 111, С этой целью 10 мкг ДНК плазмиды инкубируют с 30 ед. эндонуклеазы Е.соЯ в буфере, содержащем 100 мМ йаС 1, 10 тМ МдМ 12, 10 аМ трис-НС 1 рН 7,5, 1 щМ ДТТ, в течение 1 ч при 37 С. Затем добавляют 1/10 объема ЗМ ацетата йэ и осаждают ДНК 2,5 объемами этилового спирта на ценрифуге (10000 д, 10 мин, 4 С). Осадок высушивают и растворяют в буфере 10 мМ трис-НС 1 рН 8,0 и 5 мМ ЭДТА. Полученный препарат лигируют с 50 мМ адаптора Е.сой-Нпд 11 с помощью ДНК-лигазы фага Т 4 (30000 единиц/мл),из расчета 1 мкл...

Рекомбинантная плазмидная днк pue 41, кодирующая фрагменты белков оболочки gp 120 и gp 41 вируса иммунодефицита человека типа i и штамм бактерий escherichia coli продуцент фрагментов белков оболочки gp 120 и gp

Номер патента: 1766070

Опубликовано: 30.01.1994

Авторы: Дедкова, Киприянов, Офицеров, Серпинский

МПК: C12N 15/48, C12N 1/21

Метки: продуцент, оболочки, вируса, человека, escherichia, плазмидная, днк, штамм, фрагменты, белков, бактерий, фрагментов, иммунодефицита, типа, рекомбинантная, кодирующая

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pUE 41, кодирующая фрагменты белков оболочки gp120 и gp41 вируса иммунодефицита человека типа 1 размером 5700 н. п. и мол. м. 3,7, содержащая- Bam HI - Hind III - фрагмент плазмидной ДНК pUR292 размером 5180 н. п. ;- Bgl II - Hind III - фрагмент плазмидной ДНК pBH 10 размером 520 н. п. ;- уникальный сайт рестрикции Hind III;- гены и генетические маркеры;- ген bla - обеспечивающий синтез -лактамазы;- ген lacz - обеспечивающий синтез -галактозидазы;- фрагмент гена env ВИЧ - 1, обеспечивающий синтез полипептида, обладающего антигенным...

Способ переноса генов в растения, штамм бактерий agrobacterium tumefaciens для переноса генов в растения и рекомбинантная векторная плазмидная днк рак 320 neo для переноса генов в растения

Номер патента: 1427833

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Андрианов, Пирузян, Калиев

МПК: C12N 15/84, C12N 1/21

Метки: плазмидная, растения, днк, рекомбинантная, векторная, штамм, переноса, рак, генов, tumefaciens, бактерий, agrobacterium

1. Способ переноса генов в растения с помощью плазмид Agrobacterium, включающий инфицирование растений бактериями, несущими две плазмиды, одна из которых - мутантная неонкогенная Ti-плазмида A. tumefaciens, индуцирующая перенос в растительные клетки мутантной неонкогенной Ti - T - ДНК, не вызывающая опухолевой пролиферации клеток растений, а другая -Ri-плазмида дикого типа A. rhizogenes, вызывающая у чувствительных растений фотогормоннезависимую пролиферацию корней, состоящих только из генетически однородных трансформированных растительных клеток, включивших в геном Ri - T - ДНК, получение трансформированных генетически однородных клеток растений, включивших в геном одновременно Ri - T - ДНК и мутантную Ti - T - ДНК, регенерацию из...

Рекомбинантная плазмида pcu 201 и штамм escherichia coli к 12 с 600, продуцирующий термостабильную -глюкозидазу

Номер патента: 1547312

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Царейкина, Юрьев, Великодворская, Пирузян, Метт, Могутов

МПК: C12N 15/52, C12N 1/21

Метки: термостабильную, плазмида, рекомбинантная, escherichia, штамм, глюкозидазу, продуцирующий

1. Рекомбинантная плазмида pCU 201, содержащая ген термостабильной -глюкозидазы, состоящая из плазмиды pBR 322, в Bam HI сайт которой клонирован фрагмент ДНК размером 4,1 тпн, полученный при частичном гидролизе рестриктазой Sau-3А ДНK Clostridium thermocellum и содержащий в своем составе ген термостабильной при 60oС -глюкозидазы.2. Штамм Escherichia coli К 12 С 600, содержащий плазмиду pCU 201, коллекция Центрального музея промышленных микроорганизмов института ВНИИ генетика, продуцирующий термостабильную -глюкозидазу.

Способ получения трансгенных растений, рекомбинантная плазмидная днк ptivy4, предназначенная для получения трансгенных растений и штамм бактерий agrobacterium tumefaciens, используемый для трансформации растений

Номер патента: 1547316

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Пирузян, Метт, Юсибов, Андрианов

МПК: C12N 1/21, C12N 15/84

Метки: agrobacterium, растений, предназначенная, трансгенных, рекомбинантная, плазмидная, штамм, бактерий, трансформации, используемый, tumefaciens, ptivy4, днк

1. Способ получения трансгенных растений, заключающийся в том, что листовой материал растения инфицируют штаммом Agrobacterium tumefaciens, селекционируют по признаку устойчивости к канамицину, отбирают и укореняют трансгенные растения, отличающийся тем, что, с целью ускоренного укоренения трансгенных растений при черенковании, для инфицирования используют штамм Agrobacterium tumefacens ВКПМ В - 4428, несущий ген глюкозоизомеразы Escherichia coli, а отбор трансгенных растений проводят с помощью блоттинг-гибридизации геномной ДНК растений с радиоактивным зондом гена глюкозоизомеразы и определения ферментативной активности глюкозоизомеразы e. coli с помощью цистеин-карбозольного метода.2. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTi VY 4,...

Штамм дрожжей saccharomyces cerevisial продуцент белка гена поверхностного антигена ( hbsag ) вируса гепатита b и способ его получения

Номер патента: 1524484

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Легчилина, Грановский, Арман

МПК: C12N 15/51, C12N 1/21

Метки: cerevisial, белка, поверхностного, штамм, гена, saccharomyces, вируса, продуцент, гепатита, антигена, hbsag, дрожжей

1. Штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae ВКПМ У-754 - продуцент белка гена поверхностного антигена (HBsAg) вируса гепатита B.2. Способ получения штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae - продуцента белка гена поверхностного антигена (HBsAg) вируса гепатита B путем скрещивания, отбора по признаку гетерозиса, трансформации и селекции гибридов по продуктивности белка HBsAg, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода белка HBsAg за счет стабилизации системы клетка - плазмида, плазмидой pNMVG 39 - 54 трансформируют линии клеток, полученные скрещиванием штаммов S cerevisiae ДВУ 746 и 1R 22В, селекцию проводят по признакам гетерозиса, митотической "сверхстабильности" плазмиды и повышенной продуктивности белка HBsAg и отбирают...

Рекомбинантная плазмидная днк plt 9, кодирующая полипептид со свойствами лимфотоксина человека, рекомбинантная плазмидная днк plt 16, используемая для конструирования днк plt 9, и штамм бактерий escherichia col

Номер патента: 1561510

Опубликовано: 30.07.1994

Авторы: Филиппов, Шахов, Добрынин, Панина, Болдырева, Коробко, Турецкая, Недоспасов, Чумаков

МПК: C12N 1/21, C12P 21/02, C12N 15/19 ...

Метки: человека, escherichia, штамм, лимфотоксина, свойствами, бактерий, используемая, днк, полипептид, плазмидная, конструирования, кодирующая, рекомбинантная

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pLT 9, кодирующая полипептид со свойствами лимфотоксина человека, с мол.м. 2,64 мДа и размером 4,06 т.п.о., содержащаяHind III - Kpn I - фрагмент ДНК плазмиды p 6А23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, геном -лактамазы и терминатором транскрипции фага лямбда размером 3, 4 т.п.о.;Kpn I - Hind III - фрагмент с синтетическим сайтом инициации трансляции и полусинтетическим геном лимфотоксина человека размером 0,64 т.п.о.;генетический маркер - ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость клеток E.coli к пенициллиновым антибиотикам;

Штамм бактерий escherichia coli-продуцент фрагмента кленова

Номер патента: 1602055

Опубликовано: 30.10.1994

Авторы: Загребельный, Хомов, Ривкин, Кравченко, Петренко, Дегтярев

МПК: C12N 1/21

Метки: бактерий, штамм, кленова, фрагмента, escherichia, coli-продуцент

Штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-3825 - продуцент фрагмента Кленова.

Рекомбинантная плазмидная днк pur 290 s e, кодирующая гибридный полипептид -галактозидаза-ns 1-белок вируса клещевого энцефалита, и способ ее конструирования

Номер патента: 1679798

Опубликовано: 27.08.1995

Авторы: Горн, Пугачев, Плетнев, Ямщиков

МПК: C12N 15/33, C12N 15/52, C12N 1/21 ...

Метки: кодирующая, конструирования, клещевого, полипептид, днк, энцефалита, рекомбинантная, 1-белок, плазмидная, вируса, гибридный, галактозидаза-ns

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pUR 290 S E, кодирующая гибридный полипептид галактозидаза NSI-белок вируса клещевого энцефалита, размером 6447 п.о. и мол.м. 4,25 МД, содержащая: Hin d III Sal I-фрагмент ДНК плазмиды pUR 290 размером 5200 п.о. Hind III-конец которого достроен фрагментом Кленова ДНК-полимеразы 1 E.coli; Alu I Msp I-фрагмент ДНК-плазмиды pTBE 2 размером 109 п.о. Alu I-конец которого заменен на Sal I-конец; Msp I Cfr 10 I-фрагмент ДНК-вируса клещевого энцефалита размером 572 п.о. Cfr 10 I Hind III фрагмент ДНК-плазмиды p621-11 размером 540 п.о. Hind III EcoRI синтетический фрагмент ДНК,...

Рекомбинантная плазмидная днк, кодирующая синтез hbs ag вируса гепатита b, и штамм вируса осповакцины продуцент hbs ag вируса гепатита b

Номер патента: 1515698

Опубликовано: 10.09.1995

Авторы: Денисова, Лидеман, Гродницкая, Гибадулин, Долгушина, Дзюбенко

МПК: C12N 15/51, C12N 1/21

Метки: плазмидная, продуцент, осповакцины, кодирующая, штамм, вируса, рекомбинантная, гепатита, синтез, днк

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК rLD 206, кодирующая синтез HBs Ag вируса гепатита В, мол.м. 7,3 МД, размером 11,1 т.п.о. содержащая плазмидную ДНК вектора RUI размером 7,7 т.п.о. две копии EcoRI-фрагмента плазмиды pLD 1 с фрагментом генома вируса гепатитов B подтипаAdW размером 1,35 т.п.о. под контролем промотора белка 7,5 кД ВОВ размером 350 п.о. и общим размером 3,4 т. п. о. уникальные сайты для эндонуклеаз рестрикции: 4BamHI, 3 EcoRI, xba1 и hind 111; генетические маркеры: ampr устойчивость к ампициллину.2. Штамм вируса осповакцины ГКВ N 2126 продуцент HBs Ag вируса гепатита B.

Штамм бактерий bacillus subtilis продуцент белка а staphylococcus aureus

Номер патента: 1602056

Опубликовано: 27.10.1995

Авторы: Михайлов, Дубовая, Такаева, Добрица, Носков

МПК: C12N 1/21, C12N 15/00

Метки: staphylococcus, белка, штамм, продуцент, bacillus, бактерий, aureus, subtilis

Штамм бактерий Bacillus subtilis ВКМ N CR-303 Д продуцент белка А Staphylococcus aureus.

Рекомбинантная плазмидная днк рмм 9, кодирующая синтез белка a staphylococcus aureus, способ ее конструирования и штамм бактерий bacillus subtilis продуцент белка a staphylococcus aureus

Номер патента: 1524485

Опубликовано: 20.11.1995

Авторы: Носков, Такаева, Дубовая, Михайлов, Добрица

МПК: C12N 15/31, C12N 1/21

Метки: бактерий, subtilis, днк, конструирования, staphylococcus, белка, bacillus, рекомбинантная, синтез, aureus, плазмидная, рмм, продуцент, штамм, кодирующая

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pMM 9, кодирующая синтез белка A Staphylococcus aureus, размером 6,7 т. п. н. содержащая: Pst I-EcoR I-фрагмент векторной плазмиды pPL 608 размером 4,7 т. п. н. EcoR I-Pst I-фрагмент хромосомы Staphylococcus aureus Cowani размером 2,0 т. п. н. несущий ген белка A с собственным промотором; cat-ген хлорамфениколацетилтрансферазы без промотора; Kmг-ген устойчивости к канамицину; уникальные сайты рестрикции EcoR I; Pst I; круг хозяев - грамположительные бактерии.2. Способ конструирования плазмиды pMM 9, кодирующей белок A, заключающийся в том, что смесь ДНК Staphylococcus aureus Swant I и плазмиды pBR 327 гидролизуют рестрикционной эндонуклеазой Pst I, фрагменты соединяют ДНК-лигазой, смесью...

Рекомбинантная плазмидная днк ртnf 22, содержащая полусинтетический ген фактора некроза опухоли человека промежуточная плазмида для конструирования рекомбинантной плазмидной днк ptnf 31, кодирующая полипептид с

Номер патента: 1438240

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Турецкая, Недоспасов, Болдырева, Шингарова, Шахов, Добрынин, Кравченко, Коробко, Филиппов, Чувпило

МПК: C12N 1/21, C12N 15/28

Метки: днк, содержащая, промежуточная, плазмида, кодирующая, полусинтетический, фактора, опухоли, полипептид, плазмидная, плазмидной, ген, конструирования, человека, рекомбинантная, ртnf, рекомбинантной, некроза

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTNF 22, содержащая полусинтетический ген фактора некроза опухоли человека, - промежуточная плазмида для конструирования рекомбинантной плазмидной ДНК pTNF 31, с мол.м. 3,6 MD (5,95 т.п.о. ), содержащая:Bam I - Hind III-фрагмент ДНК плазмидного вектора PVR 291 с промотором, оператором и измененным геном -галактозидазы, кодирующим 1027 аминокислотных остатков размером 5,35 т.п.о.;Bam I - Msp I-фрагмент синтетической ДНК с участком, инициации трансляции Escherichia coli, инициирующим кодоном ATG и 31 N-концевым кодоном фактора некроза опухоли размером 120 тыс. п.о.;Msp I - Hind III-фрагмент ДНК рекомбинантного фага l 422 с...

Рекомбинантная плазмидная днк ртnf 33, кодирующая полипептид со свойствами фактора некроза опухоли человека, и штамм бактерий escherichia coli продуцент полипептида со свойствами фактора некроза опухоли человека

Номер патента: 1438241

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Кравченко, Чувпило, Шахов, Филиппов, Недоспасов, Турецкая, Коробко, Болдырева, Шингарова, Добрынин

МПК: C12N 15/28, C12N 1/21

Метки: полипептид, продуцент, фактора, рекомбинантная, ртnf, бактерий, escherichia, некроза, человека, полипептида, кодирующая, опухоли, свойствами, плазмидная, штамм, днк

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTNF 33, кодирующая полипептид со свойствами фактора некроза опухоли человека, с мол.м. 2,93 MD и размером 4,85 т. п.о., содержащаяPst I / Pvu II-фрагмент ДНК плазмиды pGA 23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, с геном дигидрофолатредуктазы и частью гена -лактамазы размером 1,83 т.п.о.,Pst I /Xho I-фрагмент ДНК плазмиды pTNF 3 с геном хлорамфениколацетилтрансферазы, терминатором транскрипции фага l, частью гена -лактамазы и частью гена фактора некроза опухоли человека, кодирующего аминокислотную последовательность 4 (Ser)-157 (Leu) размером...