Патенты с меткой «полипептида»

Способ получения полипептида

Загрузка...

Номер патента: 793385

Опубликовано: 30.12.1980

Авторы: Сумпеи, Таданори, Ясуо

МПК: C07K 14/585

Метки: полипептида

...в 5 мл Н-метилпирролидона (1:1 рибавляют 122 мг 050,а затем при охлаждении 146 мг ДЦК, растворенного в 3 мл ДМФ, и перемешивают в течение ночи. Выпавший осадок удаляют и к маточнику прибавляют ВОС-свободное основание, полученное выше, и прибавляют 100 мг ОБТ, потом смесь перемешивают 5 дней прио30 С. К реакционной смеси прибавляют воду. Отфильтровывают образовавшийся при этом осадок, промывают водой, затем сушат, получают 2,6 г-Мет-Лей-Гли-Тр-Взй -Тир-ВзЕ ( СР) - -Тр-ВзС -Глн-Асн-ОВз 1-Фе- Асн-Лиз-С 8 Сбз-Фе-Гис-Тр-Вз -Фе-Про-Глн-ТрВз 1 -Ала-Иле-Гли-Вал-Гли-Ала-Про-йН в качестве сырого продукта.1,0 г этого продукта обрабатываю 25 мл фтористого водорода, 0,1 г метионина и 2 мл анизола при -5 С в течение 60 мин при охлаждении смесью...

Способ получения искусственного гена интерферона 2 человека и способ получения полипептида с активностью интерферона микробиологическим синтезом

Загрузка...

Номер патента: 1092176

Опубликовано: 15.05.1984

Авторы: Быстров, Ямщиков, Колосов, Болдырева, Коробко, Беликов, Буткус, Сиволобова, Серпинский, Полякова, Каюшин, Северцова, Попов, Чувпило, Кравченко, Синяков, Добрынин, Берлин, Сандахчиев, Шубина

МПК: C12N 15/00

Метки: интерферона, гена, активностью, синтезом, искусственного, человека, полипептида, микробиологическим

...вставки.Другой способ заключается в выделе нии соответствующим образом подготовленных половин структурного гена и одновремевяой вставке их в векторную ДНК.,В этом случае в качестве вектора используют большой Ве 11 Яа 1 1-Фрагмент плазмиды рРК 14, который выделяют электрофорезом в 57-ном полиакриламидном геле (ПАГ). Чтобы получить И-концевой фрагмент, ДНК плазмиды рЬе 1 Р (7-250), 2 сначала расщепляют рестриктазой Нпд 111, а послеобработки Я -нуклеазой гидролизуют рестриктазой ВД 11, и малый фрагмент выделяют электрофорезом в 57-ном ПАГ.Аналогичным образом для получения С-концевого фрагмента ДНК плазмиды рЬе 1 Р (251-501) гидролизуют рестриктазой ЕсоК 1, липкие концы достраивают ДНК-полимеразой 1 Е, сой после чего гидролизуют...

Способ получения полипептида, обладающего иммуногенными свойствами нв а

Загрузка...

Номер патента: 1625332

Опубликовано: 30.01.1991

Авторы: Мари-Луиз, "пьер, Элиан, Рольф, Ив

МПК: C12N 15/51

Метки: свойствами, обладающего, иммуногенными, полипептида

...рБЧБ ЙЬгг в СНО. Трансформируют клетки СНО ЙЬКг плазмидой р 878 ЙИг, продукт. этих клеток испытывают методом радиоиммуноанализа (КТА) в поверхностном слое клеточных культур. 603 клоновйМг представляет собой НВБ Асф, Скорость синтеза НВЯ А 8 была относительно. низкой между 1 и 20 мг/10клеток в течение 24 ч.1625332 5 10 15 20 25 30 35 40 45 идентична иммунологической силе вак 50 55 Увеличение последовательностейНВБ.Культивирование клонов СНОНВБ Ая в присутствии метотриксате(МТХ), аналога фолиевой кислоты вингибиторе ЙЫт обуславливает увеличение числа воспроизведений генаЙМг, что приводит к увеличению количества Фермента ЙИг,Концентрации МТХ составляют 50,100 или 140 нМ на первом этапе и1,5, 10 или 25 мкмоль на втором этапе.Суммарно...

Способ получения полипептида, обладающего свойствами фактора высвобождения гормона роста

Загрузка...

Номер патента: 1651787

Опубликовано: 23.05.1991

Авторы: Гонал, Эмиль

МПК: C07K 1/08

Метки: фактора, свойствами, полипептида, обладающего, гормона, высвобождения, роста

...независимо. проверенных на частоту достигается с использованием градиентаСНЗСЫ в 0,1 ь-ной ТФА, Затем центральный разрез подвергают лиофилизации с образованием желаемого пептида,имеющего чистоту выше 98 Х.П р и м е р 2. Синтез пептида,имеющего ту же последовательностьаминокислотных остатков, но в видесвободной кислоты, т.е. Бег 7,8,19,А 1 а 9,15,18,28, Агя 12,21, 1.ец 13,26,27 - СРР (1-29)-ОН, отвечающегоформуле:. Н-Туг-Л 1 а-Азр-А 1 ае-РЬе-Бег-Бег-А 1 а- Туг-Аг 8-Аг К-Ь ец. е ц-Л 1 а-С Тп.ец-А 1 а-Бег-ЛгЯ-Лг 8-1.ец.ец-С 1 ц-С 1 ц-Ьец-Еец-А 1 а-Аг 8-ОН,проводят ступенчатым методом с использованием пептидного синтезатораВесЬпап 990 на хлорметилированнойсмоле, имеющей интервал замещения0,35-0,5 ммоль/г смолы, СоединениеВОС-Агц .(ТОБ) со...

Способ получения полипептида со свойствами проурокиназы и штамм бактерий еsснеriсна coli продуцент полипептида со свойствами проурокиназы (варианты)

Загрузка...

Номер патента: 1695827

Опубликовано: 30.11.1991

Авторы: Ясуо, Тосио, Мунеку, Кен, Тецузои, Еити, Рейко, Казуо, Наганори, Мидори

МПК: C12N 15/58

Метки: бактерий, штамм, еsснеriсна, полипептида, проурокиназы, свойствами, варианты, продуцент

...ДНК, служащей н качествефона. 2 мкл реакционной смеси гидролизуют Я 1-нуклеазой, инкубируют прио,26 С в течение 30 мин, Реакцию завершают добавлением 10 мкл 0,25 Х трисНС 1 (рН 8, О) .4. Трансформация Е.со 1 з(Х 103.10 мкл указанной реакционной смеситрансформируют Е.со 13(Х 103,5. Классификация мутантов.С использованием зонда - олигонук-",пеотида, использовавшегося н качествезатравки, Фаговые бляшки классифицируют гибридизацией бляшек для определе.ния мутантного Фага. Бляшки переносят50с мягкой агаровой среды на нитроцеллюлозный Фильтр, нагревают н вакуумев течение 2 ч при 80 С и гибридизируютв течение ночи и растворе. Фильтр55промывают и мутантно-Фагонь(е бляшки,дающие положительные сигналы, изолируют, Мутантный Фаг дает...

Рекомбинантная плазмидная днк 14, кодирующая полипептид, со свойствами лейкоцитарного интерферона 2 человека, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент полипептида со свойствами лейкоцитарного интерферона 2 человека

Загрузка...

Номер патента: 1703691

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Филиппов, Гилева, Чувпило, Коробко, Добрынин, Кравченко

МПК: C12N 15/21, C12N 1/21

Метки: рекомбинантная, штамм, полипептида, еsснеriснiа, кодирующая, днк, плазмидная, лейкоцитарного, свойствами, бактерий, продуцент, полипептид, человека, интерферона

...Из гибридизующихся с этой пробой клонов выделяют плазмидную ДНК, строение которой подтверждают рестриктным анализом с помощью рестриктаз Наб, Мзри Най+ЯаОК раствору 10 мкг ДНК плазмиды Р 6 А 23/Яа в 80 мкл буфера В без МаСГприбавляют 20 ед. каждой из рестрикционных нуклеаз Яаф и Крп и инкубируют 90 мин при 37 С, Анализ полноты гидролиза и выделение векторного Крп/ЯаГ-фрагмента (3,4 т,п о) проводят при помощи электрофореза в 1 -ном геле легкоплавкой агароэы, Одновременно 10 мкг ДНК плазмиды р ецГт 17 в 100 мкл буфера В обрабатывают 1,5 ч при 37 С 20 ед, каждой из рестриктаэ 89 г и ЯаГ, после чего фрагмент величиной около 500 п,о., содержащий синтетический ген а 2 интерферона, выделяют при помощи электрофореза в 5 ь-ном...

Рекомбинантная плазмидная днк р 9 f мд, кодирующая гибридный полипептид р199 asp pro cys cys vp1 200 213 pro pro ser pro vp1 131 152 pro cys gly и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гибридного полипептида р199 asp pro cys gly vp1 200 213 pro pro ser pro vp1 131 152 pro cys gly

Загрузка...

Номер патента: 1730151

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Добрынин, Дрягалин, Болдырева, Иванющенков, Чепуркин, Некрасова, Бурдов, Филиппов, Коробко, Микульскис

МПК: C12N 15/42, C12N 1/21

Метки: плазмидная, продуцент, р199, кодирующая, гибридный, штамм, м.д, рекомбинантная, полипептида, полипептид, днк, бактерий, еsснеriснiа, гибридного

...кодирует иммуногенный пептид Р 199, который представляет собой белок фактора некроза опухолей человека, слитый через дипептид АзрРго с последовательностями антигенных детерминант подтипа Аг 2 вируса ящура,Для получения бактериального штамма - продуцентов иммуногенного полипептида5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Р 199 плазмидой р 9 ЕМО трансформируюткомпетентные клетки Е. соИ 3620050.Полученный таким образом штамм Е.соИ ВКПМ Вхарактеризуется следующими признаками,Морфологические признаки, Клеткимелкие утолщенной палочковидной формы,грамотрицательные, неспороносные,Культуравьные признаки. Клетки хорошо растут на простых питательных средах.При росте на агаре "Дифко" колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящиесерые, край ровный. При...

Способ получения полипептида, обладающего активностью фактора некроза опухоли человека

Загрузка...

Номер патента: 1739855

Опубликовано: 07.06.1992

Авторы: Мицие, Ясуджи, Юнити, Мосааки

МПК: C12N 15/28

Метки: фактора, обладающего, некроза, человека, активностью, полипептида, опухоли

...20 мкг/мл,5. Конструирование рекомбинатных.плазмид,6120 мкл раствора олиго(дЦ)-концевой к-ДНК смешивают с равным объемомраствора олиго(дГ)-концевой ДНКрВК 322, инкубируют при 65 С в течение5 мин и при 57 С в течение 120 миндля достижения ренатурации.6, Отбор организмов-хозяев.Полученными плазмидами трансформируют клетки штамма Е.со 1 Х 1776,культивируют при 37 С в 20 мл Ь-бульона (состав: 10 г триптона, 5 г дрожжевого экстракта, 5 г хлористогонатрия и 1 г глюкозына 1 л, рН 7,2),содержащего 100 мкг/мп диаминопимелиновой кислоты и 40 мкг/мл тимидина, дотех пор, пока мутность, измеряемая при600 нм, не достигнет 0,5. Клетки собираюто, центрифугированием при 4, С, промывают10 мл 10 мМ буфера трис-ИС 1 (рН 7,3),содержащего 50 мМ...

Способ получения гибридного полипептида, содержащего нв а

Загрузка...

Номер патента: 1746887

Опубликовано: 07.07.1992

Авторы: Тереза, Мишель, Нигел

МПК: C12N 15/30, C12N 15/51

Метки: гибридного, содержащего, полипептида

...синтетический рге 8 2 пептид: 0,08 мкгСинтетический рге 8 2 пептид:0,08 мкгрге 2-8 частица дрожжей, управляемая Я Составитель Н.КузенковаТехред М.Моргентал Корректор О.Кундрикзуется следующей аминокислотной последовательностью; хоМеР 61 п-Тгр-Азп-Бег-ТЬг-Аа-РЬе - Нз - 618-А 1 а.ецп-Азр-Рго-Аг 9-.а-А Г 9-61 у.ец-Туг-Р пе-Р го-А 1 ауу-Яего -Бег-Зегу-ТЬг-Ча 1-Азп-Рго-Аа-РгР Азп-Ие - А 1 а-Яег-Н 1 з-Ие-Яег-Зег-Зег-бег - Аа -Аг 9-ТЬгу-Аз р-Рго-Ча 1-ТЬг-Азп.Функциональным производным Рге 82-3 согласно предлагаемому способу является производное, у которого аминокислота аланин (6 СТ) в положении 45 модифицирована с помощью сайт-специфического мутагенеза на треонин (АСТ),Рекомбинантная плазмидная ДНК состоит из последовательности, кодирующей...

Способ получения полипептида со свойствами фактора некроза опухоли

Загрузка...

Номер патента: 1762761

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Хитоси, Рюдзи, Катухиса, Юнити, Хиротада

МПК: C12N 15/28

Метки: некроза, опухоли, фактора, полипептида, свойствами

...-6 В, предварительно уравновешенную с помощью 20 мМ буфера трис-НС (рН 7,8). После промывки колонки тем же буфером для удаления неадсорбированных компонентов, требуемый полипептид элюируют с использованием линейного градиента концентрации йаС от 0 до 0,3 М в том же буфере, Каждую фракцию подвергают ДСН-полиакриламидному гельэлектрафорезу и фракции, содержащие палипептид, имеющий молекулярную массу около 17 килодапьтонов, собирают и обьединя ют.Обьединенную фракцию диализируютотносительно 20 мМ буфера трис-НС (рН7,8), а затем ее снова подвергают хроматографии в колонке ДЭАЭ-сефароза С:6 В описанным образом, но элюирование проводятв условиях более слабого градиента концентрации МаС.Фракции, содержащие целевой полипептид собирают,...

Способ получения полипептида со свойствами гирудина и штаммы дрожжей sасснаrомyсеs cerevisiae, экспрессирующие предшественник гирудина

Загрузка...

Номер патента: 1774950

Опубликовано: 07.11.1992

Авторы: Жан-Пьер, Поль, Ив, Жерар

МПК: C12N 15/81, C12N 15/15

Метки: свойствами, гирудина, полипептида, штаммы, дрожжей, экспрессирующие, предшественник, cerevisiae, sасснаrомyсеs

...р и м е р 3. ДНК рТ 6897 служит длятрансформации дрожжей Т 6 Узр 4 (Маб,цга 3-251-373-328, Ьз,-15) в цга+.Трансформированную колонию реплицируют и используют для посева не менее10 мл питательной среды и 0,5% казаминокислот. После 20 ч культивирования клеткиподвергают центрифугированию, надосадочную часть подвергают диализу дистиллированной водой и концентрируютвыпариванием (центрифу ирование в вакууме),Параллельно обрабатывают таким же"образом культуру Р 6 У 1 зр 4, трансформированную рТ 6886, и культуру Т 6 Узр 4, трансформированную плазмидой не несущейпослецовательность гирудина (Т 6 У 1 зр 4РТ 6856). Сухие остатки поглощают 50 мклводы и 20 мкл кипятят в присутствии 2,8%ЯОЯ и 100 ммоль меркаптоэтанола, затемпомещают на гель...

Способ получения полипептида со свойствами гирудина

Загрузка...

Номер патента: 1776276

Опубликовано: 15.11.1992

Авторы: Жерар, Алэн, Натали, Ив

МПК: C12N 15/15

Метки: свойствами, гирудина, полипептида

...действии ДНК лигазы фага Т 4. Плазмида рТ 6883 имеет только один сайт Вце 11, расположенный выше промотора гена феромона. Плазмиду рТ 6883 (20 мг) обрабатывают Вд 1, потом подвергают гидролизу нуклеазой Ва 131 (1,4 единицы, 10 минут). Обработанную таким образом ДНК очищают последовательными экстракциями фенолом и хлороформом - изоамиловым спиртом, за.тем фракцию 5 мг) подвергают действию полимеразы Кленова, чтобы получить максимальное количество свободных концов. Обработанную таким образом ДНК лигируют с нефосфорилированными линкерами ВавН 1 /5,С 66 АТССС 6/ в присутствии лигазы фага Т 4. После трансформации Е.со 1106 и селекции на устойчивость к ампициллину выделяют плэзмиду рТ 6892, делецированную в области 5, располагающейся сбоку...

Рекомбинантная плазмидная днк plt21, кодирующая полипептид со свойствами лимфотоксина человека, и штамм бактерий escherichiacol продуцент полипептида со свойствами лимфотоксина человека

Загрузка...

Номер патента: 1709731

Опубликовано: 30.07.1993

Авторы: Коробко, Добрынин, Шингарова, Давыдов, Чумаков, Филиппов, Бумялис, Янулайтис

МПК: C12N 15/77, C12N 15/12

Метки: продуцент, днк, рекомбинантная, свойствами, штамм, плазмидная, plt21, человека, лимфотоксина, бактерий, escherichiacol, полипептида, кодирующая, полипептид

...лимфотоксинэ человека . промывку смолы смесью тетрагидрофуранвплазмидой р Т 21 трансформируют момпв-пиридий- вода(5;3:2). После окончания синтентные клетки Е.со Ы 20050, . теза защитные группы удаляют последоеаПолученный таким образом цтамм тельной обработкой тиофенолятомЕ,со 3620050/р Т 21 характеризуетсяеле+ 55 триэтиламмония и конц, аммиаком. Придующими признаками. зтом происходит Отделение алигонуклеаотиМорфологические признаки, Клетки да от носителя. 5-Диметоксвтритильнуюмелкие, утолщенной палочковиднай формы, группу удаляют кислотной обработкой играмотрицательные. неспоронасныволигануклеотид бчищают электрофорозом в20% ПААГ, содержащем 7 М мочевину. Вы- Аликвоту реакционной смеси используют ход 1-5 о.е, для трансформации...

Рекомбинантная плазмидная днк pur 291-hav 22, кодирующая синтез гибридного полипептида антигенных детерминант вируса гепатита а с -галактозидазой

Номер патента: 1380209

Опубликовано: 30.12.1994

Авторы: Приходько, Насташенко, Дроздов, Кусов, Арсенян, Свердлов, Ажикина, Рохлина, Василенко, Грабко, Балаян, Овчинников, Чижиков, Царев, Петров

МПК: C12N 15/51

Метки: гепатита, 291-hav, плазмидная, кодирующая, детерминант, вируса, антигенных, рекомбинантная, галактозидазой, гибридного, синтез, полипептида, днк

РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК PUR 291-HAV 22, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ ГИБРИДНОГО ПОЛИПЕПТИДА АНТИГЕННЫХ ДЕТЕРМИНАНТ ВИРУСА ГЕПАТИТА А С -ГАЛАКТОЗИДАЗОЙ, имеющая длину 5589 п.о. и содержащая: Pst - линеаризованную плазмиду pUR 291 с промотором, оператором и структурным геном полной -галактозидазы; последовательность генома вируса гепатита А длиной 389 п.о., кодирующую белок VPI с 4 по 133 аминокислоту и локализованную с 5167 по 5556 п.о. влево от EcoRI-сайта, ген устойчивости к ампицилину в качестве генетического маркера, участки узнавания уникальными эндонуклеазами рестрикции, расположенные на следующих расстояниях...

Рекомбинантная плазмидная днк pur 292 hav 23, кодирующая синтез гибридного полипептида антигенных детерминант вируса гепатита а с -галактозидазой

Номер патента: 1380211

Опубликовано: 30.12.1994

Авторы: Царев, Кусов, Ажикина, Петров, Балаян, Овчинников, Насташенко, Чижиков, Василенко, Свердлов, Грабко, Дроздов, Приходько, Рохлина, Арсенян

МПК: C12N 15/51

Метки: рекомбинантная, галактозидазой, плазмидная, гепатита, полипептида, кодирующая, вируса, синтез, антигенных, днк, гибридного, детерминант

РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК PUR 292 - HAV 23, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ ГИБРИДНОГО ПОЛИПЕПТИДА АНТИГЕННЫХ ДЕТЕРМИНАНТ ВИРУСА ГЕПАТИТА А С -ГАЛАКТОЗИДАЗОЙ, имеющая длину 8572 п.о. и содержащая Pst-линеаризованную плазмиду pUR 292, с промотором, оператором и структурным геном полной -галактозидазы; последовательность генома вируса гепатита А длиной 3372 п. о. , кодирующую синтез непрерывного полипептида с частью белка VP4 (с 38 аминокислоты), белков VP2, VP3, VP1 и некоторых неструктурных белков (по 11-67 аминокислоту), ген устойчивости к ампицилину в качестве генетического маркера, участок узнавания уникальной...

Рекомбинантная плазмидная днк ртnf 33, кодирующая полипептид со свойствами фактора некроза опухоли человека, и штамм бактерий escherichia coli продуцент полипептида со свойствами фактора некроза опухоли человека

Номер патента: 1438241

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Шахов, Коробко, Добрынин, Чувпило, Шингарова, Кравченко, Филиппов, Недоспасов, Турецкая, Болдырева

МПК: C12N 1/21, C12N 15/28

Метки: некроза, полипептид, полипептида, днк, рекомбинантная, кодирующая, escherichia, продуцент, бактерий, опухоли, ртnf, человека, штамм, фактора, плазмидная, свойствами

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTNF 33, кодирующая полипептид со свойствами фактора некроза опухоли человека, с мол.м. 2,93 MD и размером 4,85 т. п.о., содержащаяPst I / Pvu II-фрагмент ДНК плазмиды pGA 23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, с геном дигидрофолатредуктазы и частью гена -лактамазы размером 1,83 т.п.о.,Pst I /Xho I-фрагмент ДНК плазмиды pTNF 3 с геном хлорамфениколацетилтрансферазы, терминатором транскрипции фага l, частью гена -лактамазы и частью гена фактора некроза опухоли человека, кодирующего аминокислотную последовательность 4 (Ser)-157 (Leu) размером...