Патенты с меткой «конструирования»

Прибор для конструирования металлоконструкций

Загрузка...

Номер патента: 86587

Опубликовано: 01.01.1950

Автор: Ментишинов

МПК: B43L 13/00

Метки: прибор, металлоконструкций, конструирования

...в зацеплепссп с зуочатым колесом 14 и пере 11 вигае 11 ОЙ руко 51 т 1 ой 13 по па. празл 511 още 11 16, прикрепленной к ползунку 12 В направлении, перпендикулярном поворотной линейке 10; прозрачной пластинки 17 с миллиметровой сеткой, пр 1 цладываемой к малой линейке 15,Для определения расстояния от геометрического центра узла металлоконструкции до заданной точки раскоса, например до начала раскоса, прибор накладывается на схематическц 11 чертеж узла так, чтобы центр кр 1 го 1 гоп ппалы 5 совпадал с геометрпчес 1 пм центром узла, а 1 пкала 3 Оыла параллельна основному (па фпг, 1 горизонтальному) элементу узла. Поворотом рукоятки 7 Т-образная пластина выдвигается по шкале 2 цлп 4 а Величину выступления горизонтального,1 лемеита...

Способ конструирования магнетронов с фигурными электродами

Загрузка...

Номер патента: 115866

Опубликовано: 01.01.1958

Автор: Паншин

МПК: H01J 25/58

Метки: электродами, магнетронов, фигурными, конструирования

...поверхностями электродов делается переменным.Для расчета профилей необходимо знать зависимость Н --(а), тогда, задавая профиль одного из электродов, рассчитывают второй.Из всевозможных сочетаний профилей электродов магнетрона, при которых удовлетворяются требования независимости азимутальных составляющих скоростей электронов от неравномерности осевой составляющей напряженности заданного неоднородного магнитного поля, практический интерес представляет сочетание цилиндрического анода с профилированным анодом. Магнетрон с такой конструкцией электродов свободен от недостатков, присущих магнетрону с цилиндрическими электродами, и может быть рассчитан для неоднородных магнитных полей, способных обеспечить хорошую магнитную фокусировку...

Способ конструирования многослойных j печатных платi

Загрузка...

Номер патента: 320088

Опубликовано: 01.01.1971

Авторы: Шинкарев, Миронов

МПК: G03F 1/00, H05K 3/46

Метки: печатных, конструирования, многослойных, платi

...электрическая модель (см. фиг. 2), состоящая из сопротивлений межслойных соединений 4 - 8 и сопротивлений печатных проводников 9 - 12.Для электрической модели любого вариан та теста характерно следующее соотношениеМ=К - 2 Р,где Л - максимальное числомежслойных соедине15 проводников;К - сумма чисел сопротивлений межслойных соединений и печатных проводников электрической модели теста;Р - число сопротивлений межслойных 20 соединений, соединенных лишь с одним сопротивлением печатного проводника электрической модели теста.В общем случае М представляет собой ряд 25 целых нечетных чисел 1, 3, 5, 7 и, для каждого значения которого число контролируемых межслойных соединений на единицу больше числа контролируемых печатных проводников. Измерив...

Способ конструирования монтажных плат устройств пневмоавтоматики

Загрузка...

Номер патента: 316875

Опубликовано: 01.01.1971

Авторы: Неборонов, Нефтехимии, Раутенштейн, Башкирский, Гришанин

МПК: F15C 5/00

Метки: плат, устройств, конструирования, монтажных, пневмоавтоматики

...прозрачной пластиной.Коммутирование многоэтажных плат происходит следующим образом. Из имеющегося набора выбирают в нужном количестве плос кие фигуры, соответствующие используемым1 редмет изоорстения Составитель О. ПовагоТскред Л. В. Куклив Корректорьп А, П. Васильева и Н, ф. Коваленко Редактор Л 1. Аникеева Заказ 3425/14 Изд, М 1449 Тираж 473 ПодписноеЦН 11 ИПИ Комитета по деле.;1 изопресеип 11 и откпье.л,1 и Совете Л 1 инистров СССРМосква, Ж, Рсу 1 скаи иао., д. 4,5 Т 11 погрп,":11, . р Сапунова, 2 в заданной схеме разрабатываемого устройства элементам; располагают их в нскоторой комбинации на Основанип, Ооеспечипяя этом возможность свободного доступа к узлам настройки элементов, необходимые за,оры между фигурами и выдеркивание сбпей...

Способ конструирования штаммов еsснеriснiа coli-продуцентов рестриктазы и метилазы е со r

Загрузка...

Номер патента: 941423

Опубликовано: 07.07.1982

Авторы: Косых, Баев, Бурьянов

МПК: C12N 15/00

Метки: coli-продуцентов, метилазы, рестриктазы, еsснеriснiа, штаммов, конструирования

...и нитратной форме, так в органи- фОческой форме в виде пептона, аминокислот, Нитраты восстанавливает донитритов. Белатину не разжижает,Уреазйая активность не обнаруживается,. Ийдол не образуетУстойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость к тетрациклину(30 мкг/мл) .Штамм Еясйег 1 сЫа со 11.В 834 (г,а )/И 3 характеризуется теми же морфо ЯВлогическими, культуральными и Физиологоб иохим ическими и риз на ками,Устойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость и стрептомицину:тонногобульона вносят 1 мл культуры 3 фЕ. со 11 В 834 и выращивают до плотности 0,4 (ФЭК, светофильтр 6, кювета0,5 см). После охлаждения клетки собирают центрифугированием и ресуспендируют в равном объеме 10 мИ ИаС 1,После 20-минутной инкубации во...

Рекомбинантная плазмидная днк, способ конструирования плазмидной днк и штамм-продуцент эндонуклеазы рестрикции

Загрузка...

Номер патента: 1130602

Опубликовано: 23.12.1984

Авторы: Кравец, Таняшин, Мороз, Кузьмин, Баев, Глатман, Солонин

МПК: C12N 15/00

Метки: плазмидной, рестрикции, днк, плазмидная, рекомбинантная, конструирования, штамм-продуцент, эндонуклеазы

...цитритов. Желатцну не разжижают.Уреаэцая активность не обнаруживается. Ицдол не образуют.Устойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость к ампициллину.Генетические признаки штамма:1 фЕсо НФ спи Есо цугес ВСэЪсВ,Г , гпу 1, 1 еп 6, рго А 2, Ьз 4,ГМ 1, агд Е, 1 ас 41, да 1 К 2, ага 14ху 1 5, шег, еэх.П р и м е р 1. Конструированиерекомбцнантной плаэмидцой ДНК р 1 ЬНЧ 86.Плазмцдную ДНК рЬКч 8 вьсцеляютиз штамма ВКИ ВД по методу(С 1 еюе 11, Не 1 пе 1 су, 1969, РНАЯ, 62,1159-1163) .2 мкг выделенной ДНК гидролиэуютрестриктазой Нжд 111 в 100 мкл раствора, содержащего 50 мИ трис-НС 1,рН 7,8, 10 мМ МИКСТ , 2 мМ 2-меркаптоэтанола, 20 мИ ИаС 1 при 37 ОС 1 ч.После прогревания реакционной смесипри 65 ОС в течение 10 мин проводятчкольцевание"...

Способ конструирования рекомбинатной плазмидной днк и штамм продуцент эндонуклеазы рестрикции

Загрузка...

Номер патента: 1074139

Опубликовано: 30.12.1984

Авторы: Кравец, Глатман, Баев, Кузьмин, Солонин, Таняшин, Мороз

МПК: C12N 15/00

Метки: плазмидной, рекомбинатной, продуцент, конструирования, днк, штамм, рестрикции, эндонуклеазы

...1159-1166).Рестрикционный анализ выделеннойплазмиды р 1 ЬКЧ 7 проводят. с помощьюэндонуклеаз Р 11,ВфИ,Есор .На втором этапе в полученную плазмиду Р 1 йЧ 74 вводят область иммуни-,тета фагас промотором ранних генов Рг и термочувствительным репрессором. Для этого выделяют ДНК фагас 1857 по методу (А,Р. Ка 1 яег,Нояпея 0.8. 1960, /, Мо 1 В 1 о 1392-415),мкг ДНК плазмиды р 1 ЬКЧ 7 и4 мкг ДНК фага 3 с 1 857 инкубируют вбуфере А (2 О мМ Трис-НС 0 рН 7,6,10 мМ МС 12,10 мМ дитиотреитола) сэндонуклеазной рестрикции Вд 1 11Гидролиз проводят в течение часапри 37 С, после чего гидролизат проверяют электрофорезом в О,97 агарозе в ацетатном буфере. ФрагментыДНК фага Л с 1857 (2 мкг) смешивают с линейной ДНК плазмидыр 1 РЧ 7 й (О, 2 мкг), добавляют...

Способ конструирования плазмидной днк, штамм -продуцент эндонуклеазы рестрикции и способ получения эндонуклеазы рестрикции

Загрузка...

Номер патента: 1040791

Опубликовано: 07.02.1985

Авторы: Мороз, Баев, Глатман, Кузьмин, Кравец, Таняшин, Солонин

МПК: C12N 15/00

Метки: плазмидной, штамм, конструирования, рестрикции, эндонуклеазы, продуцент, днк

...Физической структурыплазмидную ДНК выделяют ускореннымметодом (К 1 е 1 п Р,1 ейа 1, 1980,Р 1 азтпЫ, 8, 88-93) .Рестрикционный анализ проводят спомощью эндонуклеаз Р-1, Вя 1 11,11, Отобранные. клоны проверяютна присутствие системы рестрикциимодификации Есо 87. Для этого сравнивают эффективность посева (э.п.)фага; 0 на клетках, содержащихрекомбинантные плазмиды, а такжештаммах С 5183 (гь. -где ) и ) С 5183( г т+ ) с плазмидой рЬ 13. Наличие в клетках модификации устанавливают при снижении э.п. методом(Т. Ага, А.Ао 1 с 1, 3.Васй. 5, 18,1962) . Полученные данные представлены в табл. 2,Как видно из табл. 2, штамм3 С 5183/С 113 на четыре порядка ограничивает размножение фага Ъ0по сравнению со штаммом 1 С 5183( ГО ), не несущем плазмидуу...

Рекомбинантная плазмидная днк 435, кодирующая синтез днк лигазы фага т 4. способ ее конструирования и штамм. вкм в-1449-продуцент днк-лигазыфага т4

Загрузка...

Номер патента: 1122003

Опубликовано: 15.12.1985

Авторы: Солонин, Трояновский, Таняшин, Баев

МПК: C12N 15/00

Метки: конструирования, вкм, рекомбинантная, в-1449-продуцент, штамм, днк, кодирующая, лигазы, днк-лигазыфага, плазмидная, фага, синтез

...Е.со 1 С 600 с множественностью 1 в среде ЬВ (1 О г бактотриптона, 5 г дрожжевого экстракта, 10 г 11 аС 1 нал воды),зсодержащей 10 М МАЗО, Ливис клеток завершают добавлением в среду хлоро7 11 форма (1;100). После удаления обломков клеток центрифугированием (6000, 30 мин, 4 С) клеточные ДНК и РНК лизата гидролизуют одновременно панкреатическими ДНКазой и РНКазой (по 10 мкг/мл) при 20 С, 1 ч, Первичную очистку и концентрирование фага проводят с помощью полиэтиленгликоля 6000 (Зошашого К, Р ег а 1., Чт.го 1 огу, 40, 734-744, 1970). Окончательную очистку Фага проводят равновесным центрифугированием в 4 М СяС 1, 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 0,01 М МяС 1 (И 1 яоп С. С. ег а 1., Мо 1 ес.Сеп.Сепег 156,203-214, 1977). Очищенный препарат фага АМ...

Способ конструирования гибридной плазмиды, содержащей генетический код термостойкой альфа-амилазы

Загрузка...

Номер патента: 1200853

Опубликовано: 23.12.1985

Авторы: Сьюзен, Джонатан

МПК: C12N 15/00

Метки: альфа-амилазы, плазмиды, генетический, конструирования, термостойкой, код, содержащей, гибридной

...производящих дмилазуЕ, со 11, выдепешая как оисапа впримере 3, АТСС .д 31 789, вт.рдттттвается в течение ночи в среде, исттопьзуемой в ттрюере 2, ДНК плдз.птдц усиливается при помаши изтзестцой процедуры Клевеллд Д,Б. с. Испои зотздццем170 Т Г ХтОРДМссвтСОтД ЦД МИЛЛЦМЕтР.Для усцтлеция испо;ьз уст ся следующаясреда, г/л: П т РО 46,0, КП РО 4 3 02 42 Р 4с 1 аС 1 0,5, сПС 1 1,0 кдзвицатесЕаминокислоты 5,0, глюкоза 2,0,СдС 2 НО 0,015,;р.,О 4 7 Н (т0,2 сс 6, витамин В0,001,10 5 20 30 25 Б. Гибридная плазмида, стойкая к хлорамфениколу и ампициллину, полученная в части А, используется в каДНК плазмиды затем выделяетсяпри помощи стандартного метода осветления лизата Клевелла и Хелински. Изолированные плазмиды подвергаются очистке при помощи...

Вектор для клонирования генов, обеспечивающий регулируемую транскрипцию чужеродных генов, и способ его конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1275043

Опубликовано: 07.12.1986

Авторы: Семенова, Баев, Таняшин, Солонин

МПК: C12N 15/00

Метки: вектор, регулируемую, генов, конструирования, чужеродных, транскрипцию, клонирования, обеспечивающий

...в течение 10 мин во льду добавляют 50 мкл пан - креатической РНКазы (1 мг/мл), предварительно прогретой при 100 С в течение 5 мин, и 0,5 мл "лизирующей" смеси (0,3 мл 1 ОЕ тритон-Х, 7,5 мл М ЭДТА рН 8,0, 1,5 мл 1 М трис - НСЕ рН 8,0, 0,7 мл Н О). После инкубации2при постоянном помешивании стеклянной палочкой во льду в течение 10 мин получают осветленный лизат центрифугированием пробы в течение 1 ч при 17000 об/мин (КапегзЫ 2.). Полученный лизат разбавляют водой вдвое, обрабатывают равным объемом фенола, насыщенного 50 мМ тРис -НС 1, рН 8,0, при комнатной температуре в течение 10 мин, водную фазу собирают центриФугированием при 6000 об/мин. Остав - шийся в пробе Фенол удаляют эфирной экстракцией, а ДНК переосаждают 707. - ным спиртом.5...

Фагово-плазмидный вектор 131 и способ его конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1280009

Опубликовано: 30.12.1986

Авторы: Дебабов, Янковский, Ермакова, Фонштейн

МПК: C12N 15/00

Метки: фагово-плазмидный, вектор, конструирования

...дГ. ИЕЯ в составе гибридной молекулы является признак иммунностк к ФагуПравое плечо А р МУР 15 определяет иммунитет к фагу 434. Чтобы различить два типа фаговых частиц, выросших на газоне бактерий Ы 3350, их иммунитет проверяли с помощью спот-теста. Иэ фаговых частиц, способных к росту на бактериях О 358/ 3434 и ке способных к росту на бактериях Я 358 (1) при 30 С, т,е содержащих область 0009 6имукитета Фага 3 рС. РЕЯ, выделили ДНК, По данным расщепления рестриктазой Есо К 1 эта ДНК соответствовала искомому гибриду между фагамиЮЯ и р МУР 15, Один иэ полученных клонов обозначенных 4 р МУР 17, использовали для дальнейшего конструирования. На втором этапе конструирования Ваш Н 1 плечо Фазмицы 1 р МУР 17, содержащее все гены, необходимые...

Рекомбинантная плазмида 5, способ ее конструирования и штамм. 600 5 -продуцент сайт-специфической эндонуклеазы п

Загрузка...

Номер патента: 1294824

Опубликовано: 07.03.1987

Авторы: Прохорова, Смольянинов, Крамаров

МПК: C12N 15/00

Метки: штамм, плазмида, продуцент, сайт-специфической, конструирования, рекомбинантная, эндонуклеазы

...роторе 50,2 Тх. Зону, соответствующую сверхспиральной ДНК, отбирали, бромистый.этидий экстрагировалиизопропанолом, плазмидную ДНК осаждали этанолом, осадок растворяли в0,5 М ИаС 1 и дополнительно очищалиДНК-хроматографией на колонке с Биогелем А, Фракции, содержащиеДНК, объединяли, ДНК осаждали добавлением 2 объемов этанола, осадок отделяли центрифугированием, растворяли в НО и в таком виде использовалив дальнейшем. ДНК Р. стц 1 яаг 3.з выделяли после лизиса клеток лизоцимом,. как описано вьппе, с последующей фенольной деротеинизацией. После обработки фенолом водную фазу, содержащую ДНК, диализовали против 0,01 Инатрий-цитратного буфера (рН 7,5)инкубировали 5 ч при 25 С 50 мкгпанкреатической РНК-азы, затем вновьобрабатывали равным...

Рекомбинантная плазмидная днк уе psg94, кодирующая синтез производного белка оболочки вируса лейкоза крупного рогатого скота, способ ее конструирования и штамм дрожжей sасснаrомuсеs cererrial-продуцент производ

Загрузка...

Номер патента: 1337408

Опубликовано: 15.09.1987

Авторы: Рослер, Баев, Скрябин, Розенталь, Эльдаров, Брантл, Ланг

МПК: C12N 15/00

Метки: скота, производного, рекомбинантная, дрожжей, psg94, лейкоза, оболочки, синтез, cererrial-продуцент, штамм, вируса, sасснаrомuсеs, рогатого, кодирующая, днк, плазмидная, белка, производ, крупного, конструирования

...пентрцфуировлттця аглдокклеток сусценпцруют в том ж суфрав концентрации 3 х 10 клток/ьтцц,К 200 мл сусцензиц к:теток прибавляют 20 мкг плдзмидной ПНК УЕр 809 тк тОО мкл 507, раствора П.Э.1 . 4000выдерживают 1 ч при 30 мин. Пос.те0инкубируют 5 миц при 42 С. Суспензгттоосаждают пентрцфугированием 1 О с прц1 О тыс. аб./мин. Осадок сусцендцруют в 300 ыкл воды и высевяют цо100 мкл на часики с твердой се:тектив - )Внай средой (0,67 Х дрожжевых азотистых оснований, 2 Ж глюкозы, 20 мпт/лгистидицл, 22 бактолгара),Колонии трансформацтов поятляютсяца 2- децт пос:те пасетов)тот:. - 20чг.кую стлбклтность плазмцдь тЕРВС 94в трацсформацтах определяют клк процент клеток, сохранивших плазктдупри росте в селективных условкяхминимальной среде без лейпкттд,...

Способ конструирования рекомбинантных векторов усr р 2, усr р 3 и усr р 4

Загрузка...

Номер патента: 1364241

Опубликовано: 30.12.1987

Авторы: Анджей, Эва

МПК: C12N 15/00

Метки: векторов, рекомбинантных, усr, конструирования

...на этой средесоставила почти 95%, а количество копий на клетку ос" талось постоянным: 5-10 копий (см. пример 5 в табл. 1). Таким образом, глюкоза вновь дезактивирует АПН 2-промотор (АЭН 2"АУЯ) и реактивирует СЕИЗ"Функцию (СЕИ 3-АИ). Однако сами дрожжи во время культивирования на этаноле не могли больше аккумулиро-. вать УСКрг-плазмиду, Даже после 50 генераций на среде этанола УИВ+САА ко" личество копий не превьппало 8-12 копий на клетку (см. пример 6 в табл.3),П р и и е р 2. Получение УСЕ рзи УСЕ р 4-плаэмид схематически пред; ставлено на Фнг. 2. Вектор р 1 ПВ 207 содержит бактериальную рАТ 153-плаэмиду (34) с резистентнымн генами ампицилина (Арй) и тетрациклина (Тес" ) и7 136424 ОК 1 для селекции и стабильного роста в Е.со 11....

Рекомбинантная плазмидная днк рсек 10, кодирующая синтез фрагмента кленова днк-полимеразы 1 е. coli, и способ ее конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1392094

Опубликовано: 30.04.1988

Авторы: Петренко, Кузнеделов, Нетесова, Ривкин, Дегтярев, Кравченко

МПК: C12N 15/00

Метки: рсек, coli, днк-полимеразы, синтез, плазмидная, фрагмента, кодирующая, конструирования, рекомбинантная, днк, кленова

...фрагменты ДНК электрофорезом в 47.-ном полиакриламидном геле. Гель окрашивают в растворе бромистого этидия 2 мкг/мл, вырезают из геля зону, содержащую векторную часть ДНК плазмиды рСЕЕ 12, и выделяют ДНК из геля методом электроэлюции. 10 мкг плазмидной ДНК рС 155 гидролизуют 20 ед. рестрикционной эндонуклеазы ВашН 1 в 100 мкл буфера для гидролиза, содержащего 20 мМ трис-НС 1 рН 7,8, 10 мМ МяС 1, 50 мМ МаС 1, 2 мМ 2-меркаптоэтанола, при 37 С 1 ч. В полученную реакционную смесь добавляют 25 ЙАТР, ВСТР, ЙСТР и ТТР, до 0,05 мМ каждого, 10 ед. ДНК-полимеразы 1 и инкубируют 30 мин при 12 С. Реакцию останавливают добавлением Иа ЭДТА до концентрации 20 мМ, белок удаляют экстракцией водным фенолом, рН 8,0 и ДНК трижды переосаждают...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк per-33, кодирующей зрелый -интерферон человека

Загрузка...

Номер патента: 1417800

Опубликовано: 15.08.1988

Авторы: Норберт, Рудольф, Марк-Брус, Эва, Гюнтер, Петер

МПК: A61K 38/21

Метки: зрелый, кодирующей, днк, конструирования, интерферон, человека, per-33, рекомбинантной, плазмидной

...тупой конец фрагмента размером 90 Ьр легируют с тупым концом КВБ и получают молекулы, в которых содержат КВБ в направлении ориентации вниз от промотора. После реакции лигазу инактивируют в течение 10 мин при 70 фС, устанавливают концентрацию ТА-буфера и дополнительно переваривают с помощью 200 единиц Ндпй 111 и 10 единиц Есо К 1. 50В образующихся в реакции мульти- мерах наряду с желательной реакцией могут.лигироваться друг с другом как Есо К 1-концы, так и также Нпй 111- концы и снова превращаться в мономеры. Затем пробу разделяют на 6 Е-ном полиакриламидном геле и вырезают из геля промотор-операторный КВБ-фраг мент. размером 100 Ьр, который имеет 0 8Есо К 1- и Нпй 111-концы электрофоретически элюируют, чтобы отделить от избытка...

Способ конструирования плазмидного вектора рнс314 или рнс312, или рнс624

Загрузка...

Номер патента: 1443806

Опубликовано: 07.12.1988

Авторы: Пал, Дьердь, Имре

МПК: C12N 15/00

Метки: плазмидного, рнс312, рнс624, вектора, рнс314, конструирования

...геле,Концы молекулы содержащей однотяжевые участки, пслуча.ные при расщеплении ферментами ВашН 1 и НпГ 1,превращают в тупые концы субфрагмен з144380 том Кленова с помощью ДНК полимеразы 1,а затем рециркуляризируют Т индуцированной полинуклеотидной лигазой. Легированные ДНК трансфор 5 мируют в клетки НВ 101 и выделяют един:чные .:олонии. Получают плазмиду рНС 312, которую нельзя расщепитьэндонуклеазой ВашН 1, но можно линеаризировать ЕсоК 1 и получить фрагменты 10 1495 вр и )1 э вр после расщепления НпГ 1. Для получения вектора с большим числом копий подходящего для клонирования ДНК фрагментов с тупыми концами, плазмиду рНС 312 расщепля ют рестрикционными эндонуклеазами ЕсоК 1 и Нпй 111, а затем из агарозного геля выделяют фрагмент...

Вектор рмв 123 для получения фрагментов днк с произвольными липкими концами и способ его конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1446159

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Данилюк, Серпинский, Дегтярев, Синяков, Чижиков

МПК: C12N 15/00

Метки: рмв, концами, днк, фрагментов, произвольными, конструирования, вектор, липкими

...имеющий дополнительный Ро 1 1- сайт в плазмидной ДНК, выращивают . в 100 мп среды, содержащий 50 мкг/мпо апициллина, в течение 16 ч при 3 С на качалке (200 об/мин). Клетки собирают центрифугированием (6000 об/мин, 4 О 10 мин, 4 С), плазмидную ДНК рМВ 121 выделяют щелочным методом с последующей дополнительной очисткой в градиенте плотности СзС 1.5 мкг ДНК плазмиды рМВ 121 расщепляют 10 ед. эндонуклеазы рестрикции Рз 1 в 50 мкл раствора, содержащего буфер 1 и 50 мМ МаС 1, 1 ч прио37 С. Затем к реакционной смеси добавляют ИаС 1 до концентрации 150 мМ, 2-меркаптоэтанол до 20 мМ и 10 ед. эндонуклеазы рестрикции Яа 1 СТ, выдер-. живают 1 ч при 37 С. Реакционную смесь после добавления 6 мкл 0,4 М ЭДТА, рН 8,0 экстрагируют равным объемом...

Вектор рмв 124 для получения фрагментов днк с произвольными липкими концами и способ его конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1446160

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Чижиков, Дегтярев, Синяков, Серпинский, Данилюк

МПК: C12N 15/00

Метки: фрагментов, произвольными, вектор, днк, липкими, концами, конструирования, рмв

...добавляют ЙМТР., до концентрации 100 мкМ и НО до общего объема 100 мкл, прибавляют 1 ед, ДНК-полимераэы 1 (фрагмент Кленова) и выдерживают 30 мин при 20 С. Реакционную смесь разбавляют 5 мкл 0,4 М ЭДТА (рН 8;О) и экстрагируют водным фенолом и изоамиловым спиртом. ДНК осаждают двумя объемами этанола. 0,5 мкг полученной ДНК обрабатывают 2 ед. ДНК-лигазы фага Т 4 в 30 мкл буфера 2 в течение 16 ч прио10 С, Реакционную смесь используют для трансформации клеток Е.со 1 ВМН 7118. Суспензию клеток после трансфор - мации высевают на 1,5 Х агар, содержащий 45 мкг/мл ампициллина и 50 мкг/мл Х-Са 1. Из колоний, имеющих Ьас фенотип, выделяют плазмидную ДНК щелочным методом. Взр 1 и Взр 1 + Нпй 111 - гидролизаты полученной ДНК анализируют в 4 Х ПААГ....

Способ конструирования пространственных атомно-молекулярных моделей химических структур

Загрузка...

Номер патента: 1458884

Опубликовано: 15.02.1989

Автор: Микельсаар

МПК: G09B 23/26

Метки: структур, пространственных, атомно-молекулярных, конструирования, моделей, химических

...4 карт электронной плотности, центры модулей 5 ицентральные оси 6 пластмассовых соединительных стержней 2 маркируютрентгеноконтрастным веществом, приэтом сравнение контуров осуществляютпутем последовательного проецирования50сечений модели 3 на соответствующиекарты электронной плотности рентгеновским излучением,Кроме того, в качестве рентгеноконтрольного вещества используют смесь битумного лака с порошком оксидов или солей тяжелых металлов. Данный способ конструирования атомно-молекулярных моделей химичес" ких структур осуществляется следующим образом.В кассету (не показано) помещают первые слайды с изолиниями 4 карт электронной плотности, маркированными рентгеноконтрастным веществом, между слайдами и экраном рентгенов- ского аппарата...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей бычий гормон роста

Загрузка...

Номер патента: 1471949

Опубликовано: 07.04.1989

Авторы: Джон, Уолтер, Джозеф

МПК: C12N 15/00

Метки: кодирующей, гормон, роста, рекомбинантной, плазмидной, бычий, конструирования, днк

...Осуществляют процедуру такимже образом, как описано в примерах5(А) - (С), в которых использовалисьЕ, со 1 х КРЛ, Е. со 11 НВ 101, Е. со 11РР 50 или Е. со 1 ПРЯ иф Р, вместоЕ. со 1, Х 1776, Все условия идентичны и получают идентичные результаты.П р и м е р б. Для осуществления данного примера получают сДНК,кодирующую предшественник.гармонароста, как описано в примере 1. Вводят линкеры Нпй 111 и кДНК обрабатывают посредством Нпи 1 111 илиНзц 1, как описано в примере 4(А).Плазмиду рС 194, изолированнуюиз Б. ацгеце, используют в качествевектора, рС 194 расщепляют в зонеНпс 1 1 .1 посредством Нпй 111 илиНяц 1 и затем подвергают обработкещелочной фосфатазой,Полученную кДНК соединяют с расщепленной рС 194. Осуществляют трансформацив В. зцЬг 11...

Способ конструирования вектора pvm061

Загрузка...

Номер патента: 1479004

Опубликовано: 07.05.1989

Авторы: Кензо, Масаери, Есихиро

МПК: C12N 15/00

Метки: конструирования, вектора, pvm061

...полученныерЧ М 058, затем смеп 1 ивяют с 0,3 мкгФрагментов рКЕИ 045 длиной 5,0 тыс,оснований и обрабят 1,1 вают 400 ел.Т 4 ДНК-лигязы в э мкл лигазнаго буфера, содержащего 0,8 ммоль/л АТФ,при 2,5 С в течение б ч. Десятьмикролитров легированной смеси используют для трансформации Е, со 1штамма И 620 гесА, КККТ, Виотбирают резистентные к ямпипиллинутрансформанты, используя Х-гал, Появление белых колоний подтвердиловставление гена 1 асв сайт Нкпс 11,расположенный ниже от гена Ап 1 р 1, 25Эта трансформация дает плазмиды,несущие ген Тасв двух рязличнь 1 хориентациях. Плаэмиды с этой структурой обозначены рЧ М 06 (рТИ-ТТТ,А-). 30Есть несколько методов конструирования плазмид рТМ-ТТТ, соответствующих рамкам считывания Аи А Если имеются в наличии...

Векторная плазмидная днк polya15, предназначенная для клонирования чужеродных генов в клетках еsснеriснiа coli и bacillus spp., и способ его конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1476896

Опубликовано: 23.09.1990

Авторы: Добрица, Шевченко

МПК: C12N 15/00

Метки: векторная, плазмидная, клонирования, spp, генов, конструирования, bacillus, клетках, днк, еsснеriснiа, polya15, предназначенная, чужеродных

...0 С. На следую- тов, Зля трансформации берут в рабощнй день О, мл Са ф -клеток смешиваютту 0,5 мл суспензин полученных прото"с 0,05 мп ДНК (10 мкг/мп), инкубируют пластов, смешивают с ДНК, растворен-.1 ч при температуре ОС и 5 мин ной в ЯММР буфере,н добавляют 1,5 мппри температуре 42 С и затем перено- полиэтиленгликоля (ПЭГ). После разсят в пробирку с 1,5 мп среды ЬВ. 1 О бавления в 5 мп БММР буфера клеткиПосле 2 ч инкубации в этой среде при центрифугируют и ресуспендируют в37 С со встряхиванием клетки высева мл ЯММР буфера. Через 1,5 ч суспенют на чашки с индикаторными (Ьас) зию высевают на чашки Петри со средойсредами, содержащими тетрациклин ДМЗ. Чашки инкубируют при температурео(15 мкг/мл). В качестве индикаторных 5 37 С в течение 2...

Рекомбинантная плазмидная днк рук11, кодирующая рестриктазу и метилазу е corii, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент рестриктазы и метилазы е corii

Загрузка...

Номер патента: 1453896

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Бурьянов, Косых, Витенене

МПК: C12N 15/00

Метки: штамм, метилазы, еsснеriснiа, рук11, рестриктазы, плазмидная, рестриктазу, corii, бактерий, метилазу, рекомбинантная, конструирования, кодирующая, продуцент, днк

...штаммаЕ, соН В 834(рС 857),обусловлен тем,что штамм не содержит интерферируюих с ферментами Есо КП примесей исодержит плаэмиду с геном термочувст Овительного репрессора с 1 фага ляйбда,Содержаний рестриктаэы и метилазцЕсо К 11 в сконструированном штаммеравно 500000 ед, каждого фермента наг сырой биомассы клеток,Штами ЕвсИехсЫа со 1. ВКИ СК 2889 характеризуется следующими признаками;Иорфологические признаки.6 6ную как р 7 К 11 и содержащую в своем . составе трк фрагмента, которые обра,зуются при гидролизе плазмидной ДНК эндокуклеаэой рестрикции Рве 1Выделенную .ДНК р 7 К 11 трансформируют в штамм Е. со 11 В 834/рС 1857 Трансформаиты отбирают на среде, содержащей ампицкплин (50 мкг/мл) и канамкцин (25 мкг/мл). Плаэмида РС 1857 несет...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей синтез полипептидных субстанций против гепатита а

Загрузка...

Номер патента: 1469856

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Антонова, Фролов, Коврига, Вальяно, Серпинский, Царев, Свердлов, Кравченко, Рохлина, Овчинников, Дроздов, Ростапшов, Чернос, Снешков, Маркова, Чижиков, Петров, Балаян, Ажикина, Приходько, Арсенян, Анджапаридзе, Блинов, Кусов, Урманов, Василенко, Насташенко

МПК: A61K 39/29, C12N 15/00

Метки: конструирования, рекомбинантной, плазмидной, субстанций, полипептидных, против, кодирующей, днк, синтез, гепатита

...эндонуклеазой рестрикции Вя 11 и затем Рз 1, как описанов примере 1, Полученный больший фрагмент лигируют с Вя 11 - (ЛРцц 11)Рзг.фрагментом длиной 1243 п.о., вьделенным из плазмиды рНА 123. Лигазной смесью трансформируют компетентные клетки штамма Е,.со 1 НВ 101 и в клонах, содержащих плазмиду со встроенным фрагментом, определяют ориентацию последнего с помощью эндонуклеаз рестрикции ЕсоВ. и Ваш 1,Клоны, содержащие плазмиды с нужной ориентацией фрагмента, наращиваютв среде Мс, тетрациклином и р -индЬ- дилакриловой кислотой, синтезируемый гибридный белок, содержащий полный 7 ф-интерферон человека и фрагменты белков ОРЗ (со 11 О по 23,а.к.) и УР5 (спо 271 а.к.) ВГА, выделяют из бактериальных клеток и используют дпя иммунизации морских...

Рекомбинантная плазмидная днк рек-7-днк-зонд для идентификации штаммов чумного микроба,несущих плазмиду пестициногенности, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент днк-зонда для иде

Загрузка...

Номер патента: 1615181

Опубликовано: 23.12.1990

Авторы: Попов, Булгакова

МПК: C12Q 1/68, C12N 15/31

Метки: штаммов, бактерий, штамм, продуцент, микроба,несущих, плазмидная, еsснеriснiа, рек-7-днк-зонд, плазмиду, конструирования, рекомбинантная, днк-зонда, днк, чумного, идентификации, иде, пестициногенности

...Злюат экстрагиру ют Фечолом, хлороформом и обрабатываю эфиром. ДНК плазмиды рАТ 153(10 мкг) подвергают гидролизу рестриктазами Ипд 111 и ВапН 1 по методике, описанной ныше. Больший 15 (3,3 т.п,н,) из двух полученных в результате гидролиза фрагментов извлекают из геля. электроэлюцией. Злюаточищают от примесей агарозы и смешивают с злюатом, содержащим Нлпс 1 111- 20 "ВапН 1 - ррагмент рРзс, ДНК осаждают 96 Е-ным этаколом, промывают 70 Еньм зтанолом и подсушивают, Осадокрастворяют н буфере для легирования(5 ец,), Легирование проводят 1012 ч при 16 С.В. Анализ рекомбннактных плазмид 30 и получение штамма - продуцента Р 1- зонда для диагностики штаммов чумногомикроба,хлорамфениколом (С = 20 мкг/мл).ДНК плазмид рРзС и рАТ вьделяют.Клетки...

Вектор pfh 124 для получения фрагментов днк с произвольными “липкими” концами и способ его конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1552643

Опубликовано: 15.01.1991

Авторы: Синяков, Серпинский, Данилюк

МПК: C12N 15/00

Метки: днк, вектор, произвольными, конструирования, концами, фрагментов, липкими

...и минимальной длиной встроенного фрагмента.а) для определения рекомбинантов вектора рГН 124 с максимальной длиной встроенного фрагмента в этом векторе клонируют по Рз 1 1 и Ба 1 1-сайтам фрагмент ДНК полноразмерной копии гена интерлейкина - 2 человека, длиной 413 п.о.Дпя этого 0,25 пкмоль векторной ДНК, полученной иэ рРН 124, совместным расщеплением эндонуклеазами рестрикции РзС 1 (7 ед. 50 мМ МаС 1,ч, 37 С) и Ба 1 С 1 (О ед. 150,мМ ЮаС 1 1 ч, 37 С) и 3 пкмоль указанного фраг-. мента ДНК обрабатывают 20 ед. Т ДНК- лигазы в условиях, описанных выше. Полученной лигаэной смесью трансформируют клетки Е. со 1 1 М 103, Колонию+с Ьас фенотипом проводят через 4. пассажа, как описано в примере 2. После каждого пассажа выделенную иэ биомассы...

Рекомбинантная фаговая днк ра мз, кодирующая синтез слитого белка ангиогенин -пептид -галактозидазы и способ ее конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1552645

Опубликовано: 15.01.1991

Авторы: Коваленко, Мартвецов, Зарытова, Горн

МПК: C12N 15/00

Метки: синтез, днк, белка, пептид, рекомбинантная, галактозидазы, мз», кодирующая, слитого, конструирования, ангиогенин, фаговая

...для трансфекции.Компетентные клетки для трансфекции готовят следующим образом, Клетки Е,со 11 Л(103 иэ 50 мп среды 2 х УТ (16 г триптона, 10 г дроскеного экстракта, 5 г МаС 1 на 1 л воды) при тит-Мре 5;10 кл/мл осаждают центрифугированием, ресуспендируют в 25 мл сте-, рильного 50 пИ СаС 1 при 0 С, вновь Осаждают 10 мии 5000 я при +40 С, ре" суепендируют н 3,6 мп 50 11 СаС 1 при ОС, инкубрунт 30 мин при 0 С. К 200 мкл клеток добавляют 20 нг геТЕРОДУПЛЕКСНОй ДИ:(, инкубируют ЗО мин при 0 С, затем прогренают 2 мнп при 42 С, добавляют 200 мкл экспоненциальной Л 1103, 40 мкл 2% 7-яа 1 и 10 мкл 0,1 И 1 РТС и с 3 мл верхнего агара высенают на чашку с нижним ага" ром. Чеоез 12 ч образонынаются синие и белые колонии, Среди 603 белых колоний было...

Векторная плазмидная днк ртк 1261, предназначенная для интеграции чужеродного фрагмента в геном вируса осповакцины, и способ ее конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1640163

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Приходько, Чижиков, Серпинский, Микрюков, Урманов

МПК: C12N 15/79

Метки: ртк, 1261, фрагмента, днк, плазмидная, интеграции, осповакцины, конструирования, вируса, геном, чужеродного, векторная, предназначенная

...ДНК разделяют электрофорезом в 43-ном полиакриламидном геле (ПААГ) и выделяютбольший Фрагмент ДНК.20 мкг плаэмидной ДНК рПС 18 расщепляют ферментами Нпй 111 и,Есо К 1,55как описано, и выделяют Ндпй 1 ПЕсо К 1-полилинкер из 87-ного ПААГ.Линеариэованную плазмидную ДНКрТК 1285 Нхат 111 Есо К 1 и Ный 1114 Есо К 1-полилинкер сшивают ДНК-лигазой Фага Т 4 (1 е.а.) в 50 мИ трисНС 1, рН 7,5; 0,5 мИ АТР, 10 мМ 2-мерокаптоэтанола, 5 мМ И 8 С 1 при 8 С12 ч. Препарат ДНК осаждают спиртом.1/10 часть ДНК трансформируют вкомпетентные клетки штаюа Е,со 11НВ 101, Пдазмидную ДНК (рТК 1261)выделяют щелочным методом из положительно гибридизующейся п здп колонии Е.со 1 и подвергают рестрикционному анализу. Структуру полилинкераподтверждают...