Патенты с меткой «кодирующая»

Электронно-лучевая кодирующая трубка

Загрузка...

Номер патента: 116715

Опубликовано: 01.01.1958

Автор: Прозоровский

МПК: H01J 31/16

Метки: кодирующая, трубка, электронно-лучевая

...развертывающего напряжения синусоидальной формы, необходимо иметь две кодирующих трубки, включаемые поочередно на время хода прямого хода пучка и выключаемые на время обратного хода,На чертеже показано примерное расположение отверстий в трубке при использовании кривой сину=оидальной формы,Г 1 ри прп"сценки синусоидальной развертки (или другого гида нелинейного напряжения) центры отверстий 1, 2, 3, 4, 5, 6 и 7, образу 1 ощих строчку селекторного электрода, расположены на различных расстояниях одип от другого, зависящих от степени использования синусоиды. При таком расположении отверстий в трубке используется тот участок синусоиды, на котором напряжение возрастает соответственно закону изменения скорости движения следа...

Кодирующая электронно-лучевая трубка

Загрузка...

Номер патента: 117145

Опубликовано: 01.01.1958

Авторы: Бабенко, Шмаков, Бялик

МПК: H01J 31/02, H04N 9/16

Метки: электронно-лучевая, кодирующая, трубка

...дмет изобретени Кодирующая элобразования непрерные кодированные,клоняющую систему редназначенная для преизображения в дискретэлектростатическую оттлич ающаяся тем,ектронно-лучевая трубка, пявных изменений сигналовключающая магнитную илии коллектор электронов, о Особенность изобретения случевой трубке мелко структличающиеся по прозрачночертежомМелкоструктурная сетка РЭ располагается в трубкеняющей системой ОПу и ОП, которая может быть либо мбо электростатической, и коллектором К. Сетка перехваэлектронов, испускаемых электронным прожектором, причзависит от места прохождения сетки электронным пучком.Каждая зона сетки соответствует зоне постоянного цвенасыщенности цвета на цветовой диаграмме. Положениеция зон равном прозрачности подбираются...

Рекомбинантная плазмидная днк 435, кодирующая синтез днк лигазы фага т 4. способ ее конструирования и штамм. вкм в-1449-продуцент днк-лигазыфага т4

Загрузка...

Номер патента: 1122003

Опубликовано: 15.12.1985

Авторы: Баев, Таняшин, Трояновский, Солонин

МПК: C12N 15/00

Метки: кодирующая, конструирования, синтез, в-1449-продуцент, рекомбинантная, днк, штамм, лигазы, днк-лигазыфага, плазмидная, вкм, фага

...Е.со 1 С 600 с множественностью 1 в среде ЬВ (1 О г бактотриптона, 5 г дрожжевого экстракта, 10 г 11 аС 1 нал воды),зсодержащей 10 М МАЗО, Ливис клеток завершают добавлением в среду хлоро7 11 форма (1;100). После удаления обломков клеток центрифугированием (6000, 30 мин, 4 С) клеточные ДНК и РНК лизата гидролизуют одновременно панкреатическими ДНКазой и РНКазой (по 10 мкг/мл) при 20 С, 1 ч, Первичную очистку и концентрирование фага проводят с помощью полиэтиленгликоля 6000 (Зошашого К, Р ег а 1., Чт.го 1 огу, 40, 734-744, 1970). Окончательную очистку Фага проводят равновесным центрифугированием в 4 М СяС 1, 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 0,01 М МяС 1 (И 1 яоп С. С. ег а 1., Мо 1 ес.Сеп.Сепег 156,203-214, 1977). Очищенный препарат фага АМ...

Рекомбинантная плазмидная днк уе psg94, кодирующая синтез производного белка оболочки вируса лейкоза крупного рогатого скота, способ ее конструирования и штамм дрожжей sасснаrомuсеs cererrial-продуцент производ

Загрузка...

Номер патента: 1337408

Опубликовано: 15.09.1987

Авторы: Баев, Розенталь, Эльдаров, Брантл, Ланг, Рослер, Скрябин

МПК: C12N 15/00

Метки: sасснаrомuсеs, рогатого, рекомбинантная, конструирования, белка, оболочки, кодирующая, синтез, производного, производ, cererrial-продуцент, лейкоза, дрожжей, крупного, psg94, плазмидная, днк, штамм, скота, вируса

...пентрцфуировлттця аглдокклеток сусценпцруют в том ж суфрав концентрации 3 х 10 клток/ьтцц,К 200 мл сусцензиц к:теток прибавляют 20 мкг плдзмидной ПНК УЕр 809 тк тОО мкл 507, раствора П.Э.1 . 4000выдерживают 1 ч при 30 мин. Пос.те0инкубируют 5 миц при 42 С. Суспензгттоосаждают пентрцфугированием 1 О с прц1 О тыс. аб./мин. Осадок сусцендцруют в 300 ыкл воды и высевяют цо100 мкл на часики с твердой се:тектив - )Внай средой (0,67 Х дрожжевых азотистых оснований, 2 Ж глюкозы, 20 мпт/лгистидицл, 22 бактолгара),Колонии трансформацтов поятляютсяца 2- децт пос:те пасетов)тот:. - 20чг.кую стлбклтность плазмцдь тЕРВС 94в трацсформацтах определяют клк процент клеток, сохранивших плазктдупри росте в селективных условкяхминимальной среде без лейпкттд,...

Рекомбинантная плазмидная днк рсек 10, кодирующая синтез фрагмента кленова днк-полимеразы 1 е. coli, и способ ее конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1392094

Опубликовано: 30.04.1988

Авторы: Кравченко, Ривкин, Кузнеделов, Дегтярев, Петренко, Нетесова

МПК: C12N 15/00

Метки: рекомбинантная, синтез, днк-полимеразы, рсек, днк, плазмидная, конструирования, кленова, coli, кодирующая, фрагмента

...фрагменты ДНК электрофорезом в 47.-ном полиакриламидном геле. Гель окрашивают в растворе бромистого этидия 2 мкг/мл, вырезают из геля зону, содержащую векторную часть ДНК плазмиды рСЕЕ 12, и выделяют ДНК из геля методом электроэлюции. 10 мкг плазмидной ДНК рС 155 гидролизуют 20 ед. рестрикционной эндонуклеазы ВашН 1 в 100 мкл буфера для гидролиза, содержащего 20 мМ трис-НС 1 рН 7,8, 10 мМ МяС 1, 50 мМ МаС 1, 2 мМ 2-меркаптоэтанола, при 37 С 1 ч. В полученную реакционную смесь добавляют 25 ЙАТР, ВСТР, ЙСТР и ТТР, до 0,05 мМ каждого, 10 ед. ДНК-полимеразы 1 и инкубируют 30 мин при 12 С. Реакцию останавливают добавлением Иа ЭДТА до концентрации 20 мМ, белок удаляют экстракцией водным фенолом, рН 8,0 и ДНК трижды переосаждают...

Рекомбинантная плазмидная днк 33, кодирующая метилазу s 11, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент метилазы s 11

Загрузка...

Номер патента: 1532585

Опубликовано: 30.12.1989

Авторы: Поляченко, Дебов, Лунин, Грубер, Никольская-Санович, Лопатина, Карягина

МПК: C12N 15/00

Метки: продуцент, еsснеriснiа, рекомбинантная, днк, кодирующая, плазмидная, метилазу, метилазы, штамм, бактерий

...Бяо 11 в клетках, несущих плазмиду с 1 33, не происходит.Плазмидную ДНК о 33 подвергают рестрикционному анализу.Характеристика штамма.2585 6Е. со 1, трансФормированных плазми"дой й 33.ШтаммТ 15 чения характера метилирования Яяо 11 20 25 30 40 45 50 55 5 153Клетки прямые, палочковидные, неподвижные, грамотрицательные, лактозопозитивные. При рассеве на чашкис 1,3%-ным МПА рост в виде отдельных,колонии, иногда в К-форме с неровными5краями. Хорошо растет на плотных ижидких питательных средах (МПА, МЛБ,1.В-бульон и ЬВ-агар).Физиолого-биохимические признаки,сКлетки растут в пределах 4-45 Спри оптимуме рН 6,8-7,5. Штамм разлагает глюкозу, лактозу, маннит с образованием кислоты, не .разлагаетсахарозу, сбраживает мальтозу, ксилозу,...

Рекомбинантная плазмидная днк 24, кодирующая синтез рестриктазы и метилазы s 11 и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент рестриктазы и метилазы s 11

Загрузка...

Номер патента: 1539205

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Лопатина, Грубер, Дебов, Карягина, Никольская-Санович, Поляченко, Лунин

МПК: C12N 15/00

Метки: синтез, продуцент, штамм, еsснеriснiа, плазмидная, днк, метилазы, бактерий, кодирующая, рестриктазы, рекомбинантная

...при 10000 я 15 мин, затем 1 О мкл супернатанта добавляют впробу, содержащую 1 мкг бактериофага 3 в 10 мкл буфера А. Пробу инкубируют 1 ч при 37 С, после чегоанализируют электрофорезом в 1,2 Еном агарозном геле. Картина рестрикции в случае штамма Е, со 1 Р 8200,несущего плазмиду с 1 24, характерназля рестриктазы Бзо 11.1 мкг плазмидной ДНК й 24, выделенной из штамма Е.со 1 Р 8200, обрабатывают 1 О ед. рестриктирующей эндонуклеазы Бво 11 в буфере А в течение 2 ч при 37 С. Электрофорез показывает, что ДНК плазмиды й 24 при такой обработке не фрагментируется, вто время как плаэмида р 11 С 19 даеткартину гидролиза, типичную для плазмиды рЦС 19, обработанной рестриктаэой Бво 11. Эти данные свидетельствуют о защите мест узнавания...

Рекомбинантная плазмидная днк pifn тrр, кодирующая синтез человеческого иммунного интерферона

Загрузка...

Номер патента: 1433019

Опубликовано: 15.09.1990

Авторы: Новохатский, Чернов, Ершов, Мелков, Виноградова, Крыкбаев, Кузнецов, Царев, Арсенян, Аспетов, Овчинников, Свердлов, Монастырская, Ростапшов, Честухин

МПК: A61K 38/21

Метки: днк, т"рр, синтез, человеческого, иммунного, кодирующая, интерферона, плазмидная, рекомбинантная

...буфере.Х 1 мкг полученного фрагмента до 50бавляют 0,1 мкг синтетических олигодезоксирибонуклеотидов, полученныхпутем химического синтеза, 2 мкг выделенного электроэлюцией большого, ЕсоВ 1-Рв 1 фрагмента рВВ 322 с триптофановым промотором и лигируют вприсутствии .10 ед ДНЕ"лигазы Фага Т 4в растворе, содержащем 0,5 мМ АТР и,буФер, состав которого был приведен вьппе .Лнгазной смесью трансформируют компетентные клетки Е,со 11 К 12, которые высевают на чашки, содержащие ЬВ-агар с тетрациклипом. Из полученных клонов выделяют плаэмиды и структура встроенных генов подтверждается рестриктным анализом н спквенсом.Полученную генно-инженерную конструкцию анализируют по эффективности синтеза иммунного интерферона после трансФормации...

Рекомбинантная плазмидная днк рук11, кодирующая рестриктазу и метилазу е corii, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент рестриктазы и метилазы е corii

Загрузка...

Номер патента: 1453896

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Косых, Бурьянов, Витенене

МПК: C12N 15/00

Метки: рестриктазы, бактерий, плазмидная, рестриктазу, кодирующая, штамм, днк, рекомбинантная, рук11, метилазу, продуцент, конструирования, метилазы, еsснеriснiа, corii

...штаммаЕ, соН В 834(рС 857),обусловлен тем,что штамм не содержит интерферируюих с ферментами Есо КП примесей исодержит плаэмиду с геном термочувст Овительного репрессора с 1 фага ляйбда,Содержаний рестриктаэы и метилазцЕсо К 11 в сконструированном штаммеравно 500000 ед, каждого фермента наг сырой биомассы клеток,Штами ЕвсИехсЫа со 1. ВКИ СК 2889 характеризуется следующими признаками;Иорфологические признаки.6 6ную как р 7 К 11 и содержащую в своем . составе трк фрагмента, которые обра,зуются при гидролизе плазмидной ДНК эндокуклеаэой рестрикции Рве 1Выделенную .ДНК р 7 К 11 трансформируют в штамм Е. со 11 В 834/рС 1857 Трансформаиты отбирают на среде, содержащей ампицкплин (50 мкг/мл) и канамкцин (25 мкг/мл). Плаэмида РС 1857 несет...

Рекомбинантная фаговая днк ра мз, кодирующая синтез слитого белка ангиогенин -пептид -галактозидазы и способ ее конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1552645

Опубликовано: 15.01.1991

Авторы: Коваленко, Зарытова, Мартвецов, Горн

МПК: C12N 15/00

Метки: ангиогенин, галактозидазы, синтез, мз», фаговая, кодирующая, пептид, белка, днк, слитого, конструирования, рекомбинантная

...для трансфекции.Компетентные клетки для трансфекции готовят следующим образом, Клетки Е,со 11 Л(103 иэ 50 мп среды 2 х УТ (16 г триптона, 10 г дроскеного экстракта, 5 г МаС 1 на 1 л воды) при тит-Мре 5;10 кл/мл осаждают центрифугированием, ресуспендируют в 25 мл сте-, рильного 50 пИ СаС 1 при 0 С, вновь Осаждают 10 мии 5000 я при +40 С, ре" суепендируют н 3,6 мп 50 11 СаС 1 при ОС, инкубрунт 30 мин при 0 С. К 200 мкл клеток добавляют 20 нг геТЕРОДУПЛЕКСНОй ДИ:(, инкубируют ЗО мин при 0 С, затем прогренают 2 мнп при 42 С, добавляют 200 мкл экспоненциальной Л 1103, 40 мкл 2% 7-яа 1 и 10 мкл 0,1 И 1 РТС и с 3 мл верхнего агара высенают на чашку с нижним ага" ром. Чеоез 12 ч образонынаются синие и белые колонии, Среди 603 белых колоний было...

Рекомбинантная плазмидная днк 36к-pvh, кодирующая синтез иммуногенного белка 36к вируса осповакцины штамма ливп, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент этого белка

Загрузка...

Номер патента: 1661215

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Щелкунов, Чикаев, Муравлев, Чешенко, Малыгин, Рязанкина

МПК: C12N 15/38, C12N 1/20

Метки: белка, штамм, ливп, рекомбинантная, вируса, кодирующая, иммуногенного, плазмидная, продуцент, осповакцины, штамма, синтез, бактерий, еsснеriснiа, 36к-pvh, днк, этого

...от 35 вет в гибридизации с Р-зондом, выделяют32плазмидную ДНК, обозначенную 36 К-рчН,содержащую в своем составе фрагмент вирусной ДНК 1029 п.н. с геном белка 36 К,Анализ совпадения рамок трансляции40 гена ас 7 и гена белка 36 К в клонах, содержащих рекомбинатную плазмидную ДНК,осуществляют с помощью доказательствасинтеза этими клонами химерного белка смол, м. 145 - 150 КД, Для этого клетки из45 отдельных клонов, дающих положительныйответ в реакции гибридизации с Р-зондом,32высевают в 5 мл .В, содержащего 40 мкг/млампициллина, и растят в течение 16 ч. Затем0,35 мл ночной культуры вносят в 0,5 мл50 свежего ЬВ, содержащего 40 мкг/мл ампициллина, растят до плотности суспензии0,6-0,7 ОЕ/мл при 600 нм и добавляют...

Рекомбинантная плазмидная днк р1емз, кодирующая синтез в субъединицы холерного токсина, способ ее конструирования и штамм бактерий viвriо сноlеrае продуцент в-субъединицы холерного токсина

Загрузка...

Номер патента: 1505022

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Ливанова, Смирнова, Смирнов, Ильина

МПК: C12N 15/00

Метки: субъединицы, бактерий, рекомбинантная, продуцент, плазмидная, холерного, сноlеrае, штамм, кодирующая, viвriо, конструирования, днк, р1емз, токсина, синтез, в-субъединицы

...инкубируот 18 ч гГи 37 С, В каче-. зеконтроля используют исходный штамм /, 1505022С 1)01 егае С 197 сегрупп д )акже )/ эгилбензтидзолин-сульфанд. Через 30с 1)оегде 569 В н качестве этдл.,с ого штал 1- мин экспозиции при комнаной тепеГ)д)ума - продуцента холерного то:синд. ре при постоянном встряхивании измеряютКолонии штаммов С 197, КМ 93 и 569 В оптическу 0 плотность раствора при 405 нмпереносят методом реплик на чашки с 1%- 5 Чувствительность метода в данной серииным отмытым синкдзным дгаром, содержа- опытов составляет 1 нг, В соответствии сощим 1/ отмытых в синкдз Ом бульоне установленной чунс)вигР. ьностью и ГооФ%эритроциее бард д;"осРГ)ы инкубируст 13 с етом числя ныро ших о процессе культи 011) 39 С )дл, еают ггое 10,5;, СинказнО-...

Рекомбинантная плазмидная днк 22, кодирующая синтез интерферона -11 человека, и штамм бактерии рsеudомоnаs sp. -продуцентинтерферона -11 человека

Загрузка...

Номер патента: 1703690

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Народицкая, Свердлов, Долганов, Юрин, Стронгин, Царев, Евдонина, Стеркин, Скворцова, Цыганков, Козлов, Еремашвили, Монастырская, Чистосердов

МПК: A61K 37/66, C12N 1/21, C12N 15/21 ...

Метки: продуцентинтерферона, рекомбинантная, днк, плазмидная, интерферона, бактерии, кодирующая, штамм, рsеudомоnаs, синтез, человека

...вводят плазмиду 8751, которая обеспечивает устойчивость к триметаприму,Высев конъюгатов производят на минимальную агаризованную солевую среду Адамса, содержащую следующие компоненты: глюкоза 4 мг/мл; тизмингидрохло 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 рид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; лейцин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл; стрептомицин 75 мкг/мл; триметаприм 75 мкг/мл, В этих условиях вырастают только коньюгаты Е.со 1 С 600 (К 751, рИЧ 22), Затем проводят коньюгацию между Е,со 1 С 600(В 751, рЧМ 22) и Рзеобоаопаз зр, 31 с дефектным геном йг А Коньюгаты вырастают на минимальной агариэованной солевой среде следующего состава: глюкоза 4 мг/мл; тиамингидрохлорид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл, стрептомицин 200 мкг/мл,...

Рекомбинантная плазмидная днк 14, кодирующая полипептид, со свойствами лейкоцитарного интерферона 2 человека, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент полипептида со свойствами лейкоцитарного интерферона 2 человека

Загрузка...

Номер патента: 1703691

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Чувпило, Филиппов, Кравченко, Добрынин, Коробко, Гилева

МПК: C12N 15/21, C12N 1/21

Метки: интерферона, штамм, плазмидная, бактерий, полипептида, свойствами, рекомбинантная, лейкоцитарного, днк, еsснеriснiа, продуцент, кодирующая, человека, полипептид

...Из гибридизующихся с этой пробой клонов выделяют плазмидную ДНК, строение которой подтверждают рестриктным анализом с помощью рестриктаз Наб, Мзри Най+ЯаОК раствору 10 мкг ДНК плазмиды Р 6 А 23/Яа в 80 мкл буфера В без МаСГприбавляют 20 ед. каждой из рестрикционных нуклеаз Яаф и Крп и инкубируют 90 мин при 37 С, Анализ полноты гидролиза и выделение векторного Крп/ЯаГ-фрагмента (3,4 т,п о) проводят при помощи электрофореза в 1 -ном геле легкоплавкой агароэы, Одновременно 10 мкг ДНК плазмиды р ецГт 17 в 100 мкл буфера В обрабатывают 1,5 ч при 37 С 20 ед, каждой из рестриктаэ 89 г и ЯаГ, после чего фрагмент величиной около 500 п,о., содержащий синтетический ген а 2 интерферона, выделяют при помощи электрофореза в 5 ь-ном...

Рекомбинантная плазмидная днк -1 1-13, кодирующая синтез фибробластного интерферона ( i) человека, способ ее конструирования, штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент i-интерферона человека

Загрузка...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Трухан, Дебабов, Козлов, Лившиц, Изотова, Алексенко, Янулайтис, Костров, Стронгин, Гервинскас, Бумялис, Евдонина, Носовская, Юрин, Плотникова, Подковыров, Болотин, Лапидус, Борухов, Машко, Лебедева, Мочульский, Рыжавская, Стеркин, Скворцова

МПК: C12N 1/21, C12P 21/00, C12N 15/23 ...

Метки: днк, фибробластного, плазмидная, интерферона, 1-13, i-интерферона, бактерий, еsснеriснiа, продуцент, кодирующая, конструирования, рекомбинантная, человека, синтез, штамм

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...

Рекомбинантная плазмидная днк 2-19, кодирующая синтез интерлейкина-2 человека, способ ее конструирования штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент интерлейкина-2 человека

Загрузка...

Номер патента: 1703693

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Козлов, Циманис, Мочульский, Скворцова, Стеркин, Авот, Романчикова, Мазель, Дебабов, Носовская, Трухан, Косиков, Костров, Машко, Стронгин, Юрин, Черновская, Грен

МПК: C12N 15/26, C12N 1/21

Метки: синтез, бактерий, 2-19, еsснеriснiа, штамм, плазмидная, кодирующая, продуцент, интерлейкина-2, днк, человека, рекомбинантная, конструирования

...ДНК длиной =750 п.нвырезает и проводят элюцию ДНК. Для достройки о,;ноцепочечных концов ДНК с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы 1 Е со, выделенный из геля фрагмент обоа;э; .пгают в пробе объемом 20 мкл, содер,кэ.,ей 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 10 мМ МдС 1:, по ЗО мкМ дезоксирибонуклеозидтрифосфатов Реакцию останавливают прогреванием, ДНК из смеси переосаждают этанолом и растворяют в 20 мкл,Полученный препарат фрагмента плазмиды рАА 1213-23 В используют на дальнейших этапах конструирования для интеграции кодирующей части интерлейкиначеловека в векторную плазмиду рВВ 124 В.3 мкг ДНК плазмиды рВВ 124 В расщепляют рестриктазой ВагпН в пробе обьемс . 12 мкл, содержащей буфер для рестрикци:- Реакцию останавливают фенольной...

Рекомбинантная плазмидная днк ртнуз14, кодирующая полипептид со свойствами тимозина человека, рекомбинантная плазмидная днк ртну12 промежуточный продукт для ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli

Загрузка...

Номер патента: 1707078

Опубликовано: 23.01.1992

Авторы: Коробко, Амосова, Добрынин, Филиппов, Болдырева

МПК: C12N 15/21, C12N 15/12

Метки: днк, бактерий, еsснеriснiа, штамм, ртнуз14, кодирующая, полипептид, человека, плазмидная, тимозина, рекомбинантная, промежуточный, свойствами, продукт, ртну12, конструирования

...ауо Гача т М; - .и. Э УГ эез :. 1 ан,леатдсд дып а якт . даг д- а знык ", ос 4 дамидитн ьнл методомпПОН. С 1 Чд 1 а УУИн; - , д эп;.;-ь 1 ечат 3- . - -,д 5 гч .".щью защ;щ чы,, , тПЬ, дхтр 1 та з пил 2 азси ул с: д, п 1:асед 1 ЗОПРОП,ГатУлича)-фаСФ 1 ТОВ Эт. В 1 Раданы тетрээплал С 1 уев предадет е масшта бе 0 5.0 7 мл 1 агь 1.п;,;ь уя в каче;тве час егя посистпа стеа (газмрр пар 500 А, размер частиц 40-8; лл) отаоол 1 у через13 .суцичатчу и связь гри-оед няют перваа нулеаз 1 д аа звечп 111 эгрузка 20 -.лсль, 11 с па "ьз уат "итрасотар м паг,е рад 1ач тенг э ииВедает ПраЫЬу .а ЛЬ СмрСЬ" ТЕТРИС ИД гафуран - пиридич - дода 5 3 2) После -о чания синтеза защитные гр)псы удаляют последовательной обработкой тиофено- ЛЯтаМ то 11 зт 1 Лаь...

Рекомбинатная плазмидная днк рвgнтrр 3, кодирующая гормон роста крупного рогатого скота, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гормона роста крупного рогатого скота

Загрузка...

Номер патента: 1708847

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Свердлова, Горбулев, Чернов, Чупеева, Рубцов, Баев, Шульга, Голова, Позмогова, Садиев, Скрябин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: рекомбинатная, днк, гормон, рвgнтrр, скота, роста, рогатого, бактерий, гормона, продуцент, кодирующая, крупного, плазмидная, штамм, еsснеriснiа

...20 вМ, Реакционную смесь экстрагируют равным объемом смеси фенол:хлороформ. ДНК из водной фазы осаждают спиртом, высушивают, растворяют в водефракционируют в 1 Д агарозном геле, Нужный фрагмент ДНК (Рчц И - Есой - фрагмент размером 680 п,о.) элюируют из легкоплавкой агарозы с помощью стандартной процедуры осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде,0,5 мкг Рчц 1 - Есой - фрагмента инкубируют в 10 мкл срднесолевого буфера с 5 ед. рестриктазы Н 1 пб И 1 в течение 1 ч при 37 С, ДНК из реакционной смеси осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде.Для получения вектора из плазмиды зуп/рВй 327 4 мкг ДНК гидролизуют в 20 мкл инкубационной смеси на основе среднесолевого буфера, содеожащей 15 ед. Рчц И и 20 ед, Н 1 пб 1 И, в...

Рекомбинантная плазмидная днк pga9, кодирующая синтез белка,обладающего антигенными свойствами вируса иммунодефицита человека первого типа, способ ее конструирования, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент

Загрузка...

Номер патента: 1708848

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Бобков, Гараев, Колот, Бобкова, Казеннова

МПК: C12N 15/48, C12N 15/70

Метки: иммунодефицита, синтез, рекомбинантная, pga9, антигенными, еsснеriснiа, вируса, штамм, типа, плазмидная, кодирующая, продуцент, человека, первого, днк, бактерий, конструирования, белка,обладающего, свойствами

...ген устойчивости к канамицину, и раг-участок СоА выделяют из плазмиды рАК 25. Для этого рАК 25 подвергают гидролизу рестриктазой Е,сой 1, ин кубируя 20 мкг ДН К рАК 25 с 20 ед, 10 фермента в присутствии 50 мМ МаС 3, 10 мММцС 32 10 мМ трис-НС 3, рН 7,5, 1 мМ ДТТ в течение 2 ч г.ри 37 С с последующим прогреванием при 75 С в течение 15 мии. Далее гидрслизовзииую ДНК разделяют в 0,8% 15 дгзрозном геле и выделяют нужный фрагмент ДНК, используя бумагу ДЕ 81.В качестве вектора используют плазмиду р 630, полученную следующим образом.Клетки бактерий Е.со 3 НВ 101, содержа щие плазмидную ДНК рОВ 290 выращиваютв 200 мл бульона до титра 1 х 10 клеток/мл. Клетки осаждают центрифугирсванием(5000 ц,5 мии,4 С) и ресуспендируют в 35 мл раствора,...

Рекомбинантная плазмидная днк, кодирующая кор-антигенвируса гепатита в, лишенный днк 39с концевых аминокислот с экспонированным на его поверхности эпитопом pre s 1-55, способ ее конструирования и штамм бактерий

Загрузка...

Номер патента: 1713930

Опубликовано: 23.02.1992

Авторы: Цибиногин, Пушко, Озолс, Пумпен, Петровский, Борисова, Лосева, Берзин, Грен, Осе

МПК: C12N 1/21, C12N 15/70, C12N 15/51 ...

Метки: кор-антигенвируса, поверхности, лишенный, рекомбинантная, аминокислот, бактерий, экспонированным, концевых, кодирующая, гепатита, эпитопом, плазмидная, 1-55, конструирования, днк, штамм

...и инкубируют 30 мин при . 4 С, Лизат осветляют центрифугированием 30(10 000 д, 4 С, центрифуга). НВс Ад Ь - рге 52 (1-55) очищают следующим образом, Ли. зат подвергают фракционированию сульфатом аммония. НВс Ад Ь - рге 52 (1-55) собирают в осадке, полученном при 30% 35 насыщения. сульфатом аммония. Осадок растворяют в 0,04 М фосфате натрия, рН 8,0;0,15 М йаС, 0,1 тритоне Х 100 до конечйой концентрации белка 25-50 мг/мли 6-7 мл этого раствора наносят на колонку с Сефа-. 40 розой С 4 В (2,1 х 75 см), уравновешенную .тем же буфером, но без тритона Х 100, Фрак- ции. проявляющие НВсАд-активность, собирают и используют либо непосредственно, либо после концентриро вания переосаждением 50%-ным сульфатом аммония.Определение...

Рекомбинантная плазмидная днк 10fmd, кодирующая гибридный белок р204-as р с с vpi200-213 р р s р ( 131-160) и штамм бактерий еsснеriснiа coli -продуцент гибридного белка р204а р с с v pi200-213-р р s р vpi 131-160

Загрузка...

Номер патента: 1724691

Опубликовано: 07.04.1992

Авторы: Иванющенков, Чепуркин, Филиппов, Бурдов, Коробко, Добрынин, Микульскис, Болдырева, Дрягалин, Некрасова

МПК: C12N 15/42, C12N 1/21

Метки: гибридный, белок, еsснеriснiа, 10fmd, 131-160, кодирующая, рекомбинантная, белка, плазмидная, продуцент, р204а, бактерий, штамм, р204-as, гибридного, днк, pi200-213-р, vpi200-213

...Р 204, который представляет собой белок фактора1724691 некроза опухолей человека, слитый черездипептид АзрРго с последовательностьюантигенной детерминанты подтипа А 22 вируса ящура..Для получения бактериального штамма- продуцента иммуногенного полипептидаР 204 плазмидой р 10 РМО трансформируюткомпетентные клетки Е, соИ 3620050,Полученные таким образом штаммы Е.соИ 3620050/р 10 РМО (В КПМ В) характеризуются следующими признаками.Морфологические признаки.Клетки мелкие утолщенной палочковидной формы, грамьтрицательные, неспороносные.Культуральные признаки.Клетки хорошо растут.на простых питательных средах, При росте на агаре "Дифко"колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящие, серые, край ровный, Приросте в жидких средах (на...

Фрагмент днк, кодирующий гормон роста овцы, рекомбинантная плазмидная днк роgнтrр11, кодирующая синтез гормона роста овцы, штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гормона роста овцы

Загрузка...

Номер патента: 1730150

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Садиев, Скрябин, Баев, Горбулев, Шульга, Рубцов, Сагадиев

МПК: C12N 15/18, C12N 1/21

Метки: роgнтrр11, плазмидная, фрагмент, синтез, кодирующий, кодирующая, гормона, бактерий, днк, овцы, рекомбинантная, штамм, еsснеriснiа, роста, продуцент, гормон

...работы отобрали плазмиду, содержащую Есой 1-Н 1 пб И 1-фрагмент с геном ГР КРС размером 601 п.ообозначенную рВОН Ва 112;П р и.м е р 2. Получение фрагмента ДНК,кодирующего ГР овцы.А) Клонирование фрагмента ДНК, коди рующего ГР КРС, в векторе М 13(фиг, 6).10 мкг плазмидной ДНК рВОНВа 12гидролизовали рестриктазами Есой 1 и НпбИ 1 в 50 мкл инкубационной смеси следующего состава: 50 вМ йаС 1, 10 вМ 5 трисНС 1. рН 7,5,10 вМ МяС 2, 1 еМ дитиот-рейтола(ДТТ), 10 ед; рестриктазы Есойи 10 ед. рестриктазы Н 1 пбИ, в течение 2 ч при 37 С.Проводили разделениефрагментов ДНКв 1агарозном геле и выделяли из геля фрагмент раз мером 601 п,оиспользуя стандартный метод.5.мкг ДНК репликативной формы бактериофага М 13 вр 8 гидролизовалирестриктазами...

Рекомбинантная плазмидная днк р 9 f мд, кодирующая гибридный полипептид р199 asp pro cys cys vp1 200 213 pro pro ser pro vp1 131 152 pro cys gly и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент гибридного полипептида р199 asp pro cys gly vp1 200 213 pro pro ser pro vp1 131 152 pro cys gly

Загрузка...

Номер патента: 1730151

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Микульскис, Некрасова, Добрынин, Чепуркин, Филиппов, Бурдов, Иванющенков, Болдырева, Коробко, Дрягалин

МПК: C12N 15/42, C12N 1/21

Метки: штамм, бактерий, кодирующая, р199, м.д, еsснеriснiа, днк, рекомбинантная, полипептид, полипептида, гибридный, плазмидная, продуцент, гибридного

...кодирует иммуногенный пептид Р 199, который представляет собой белок фактора некроза опухолей человека, слитый через дипептид АзрРго с последовательностями антигенных детерминант подтипа Аг 2 вируса ящура,Для получения бактериального штамма - продуцентов иммуногенного полипептида5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Р 199 плазмидой р 9 ЕМО трансформируюткомпетентные клетки Е. соИ 3620050.Полученный таким образом штамм Е.соИ ВКПМ Вхарактеризуется следующими признаками,Морфологические признаки, Клеткимелкие утолщенной палочковидной формы,грамотрицательные, неспороносные,Культуравьные признаки. Клетки хорошо растут на простых питательных средах.При росте на агаре "Дифко" колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящиесерые, край ровный. При...

Рекомбинантная плазмидная днк blv 51-3, кодирующая кор антиген вируса гепатита в с экспонированным на его поверхности эпитопом blv 51 (56-103), вируса лейкоза крупного рогатого скота способ ее конструирования и

Загрузка...

Номер патента: 1742331

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Платцер, Грен, Борисова, Пумпен, Ульрих, Осе, Озолс, Берзин, Лосева, Дрейлиня, Сиаккоу, Пушко, Розенталь, Цибиногин

МПК: C12N 15/48, C12N 15/51, C12N 1/21 ...

Метки: антиген, гепатита, кодирующая, конструирования, рогатого, плазмидная, 56-103, кор, крупного, экспонированным, лейкоза, скота, днк, 51-3, эпитопом, рекомбинантная, вируса, поверхности

...разбавляют в 4 раза дистиллированной водой и подвергаютф ра кциони рован и ю сульфатом аммония. 20Н ВсАд Ь - ВО/др 51(56 - 103) собирают восадке, полученном при 30 насыщениясульфатом аммония. Осадок растворяют в0,05 М трис-НС 1, рН 8,0, 0.15 М йаО, 0,1тритоне Хдо конечной концентрации .25белка 25 - 50 мг/мл, и 2 - 4 мл этого раствора наносят на колонку с сефарозой (1,6 х 100см), уравновешенную тем же буфером, нобез тритона Х. Фракции, проявляющиеНВсАд-активность, собирают и используют 30либо непосредственно, либо после концентрирования переосаждением 50-нымсульфатом аммония,П р и м е р 3. Определение НВсАд-активности методом РИД. 35Титр НВсАд определяют с помощью радиальной иммунодиффузии по Ухтерлони,Для этого готовят двухкратные...

Рекомбинантная плазмидная днк frblv f6, кодирующая слитый белок оболочки бактериофага и белок оболочки 51 вируса лейкоза крупного рогатого скота, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli прод

Загрузка...

Номер патента: 1744110

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Пушко, Дрейлиня, Озолс, Соминская, Платцер, Розенталь, Пумпен, Грен, Ульрих, Козловская, Сиаккоу

МПК: C12N 15/70, C12N 15/33, C12N 1/21 ...

Метки: вируса, крупного, плазмидная, конструирования, кодирующая, рекомбинантная, белок, днк, слитый, рогатого, прод, лейкоза, бактерий, бактериофага, штамм, frblv, еsснеriснiа, оболочки, скота

...50 мМ трис-НС, рН 7,5; 10 мММдС 2, 10 мМ дитиотрейтол, 50 Ы АТР и 10ед, Т 4 ДНК-лигазы, в течение 12 ч при 4 С,Фрагмент инактивируют нагреванием при650 С в течение 15 мин, К реакционной смесидобавляют 100 мкл клеток Е,соИ ВВ 1, обработанных 100 мМ СаС 2 (конечная концентрация - 5 х 10 клеток/мл), длятрансформации клеток,Отбор клонов осуществляют путем экспресс - выделения ДНК и ее рестрикционного анализа, а также секвенирования.Плазмида с ожидаемой последовательностью получает наименование рГРВ Ч-Р 6,Конструирование рекомбинантнойплазмидной ДНК рЕРВ ЧзР 6,2 мкг плазмиды рРРВ Ч-Г 6, выделенной стандартным методом, расщепляют 3.ед, растриктазы Есо 781 и 3 ед, рестриктазыЗзр 1 в 25 мкл раствора А, содержащего100 мМ трис-НС, рН 7,5; 50 мМ...

Рекомбинантная плазмидная днк рек 8, кодирующая фибринолизин yersinia реsтis, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент фибринолизина yersinia реsтis

Загрузка...

Номер патента: 1751206

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Булгакова, Попов

МПК: C12N 15/12

Метки: рекомбинантная, фибринолизин, реsтis, плазмидная, фибринолизина, еsснеriснiа, кодирующая, yersinia, продуцент, бактерий, штамм, рек, конструирования, днк

...и подсушивают, Осадок растворяют в буфере для лигировдния (0,066 М трис-НС 1, рН 7,5; 5 мМ МЫС 2, 5 мМ дитиотрейтола и 1 мМ АТФ) с добавлением ДНК лигэзы фага Т(5 ед). Лигировдние проводят 10-12 ч при 16 С.1751206В, Анализ рекомбиыантыых плазмид и форм (ЗДТА) лиэоцим, Обломки клетоквыделение клона, несущего рекомбинанг- осаждают. Супернэтант, содержащийагоную плаэмиду рЕК 4, вые частицы, используют для заражения.Полученную смесь ДНК испольэуютдля Культуру Е, соИ К 802 (110 кл/мл) сметрвнсформации клеток Е. соИ К 802. Транс шиваот с 0,1 мл фаголиэата и инкубируот 1формировайные клетки подраи 1 иваот 1 чэс ч при 28 С, полученную смесь разводятв бульоне СВ и высевают на агэризировэн-бульоном 1.В в 10 раз и 0,1 мл высевают наную среду 1,В с...

Рекомбинантная плазмидная днк pst20, кодирующая альфа интерферон человека в растениях табака

Загрузка...

Номер патента: 1751207

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Крашенинникова, Смирнов, Теверовская, Пухальский

МПК: C12N 15/21, C12N 15/84

Метки: интерферон, альфа, плазмидная, днк, человека, кодирующая, pst20, табака, растениях, рекомбинантная

...трех штаммов и наносят на нитроцеллюлозный фильтр, который помещают на полноценную питательную среду на 18 ч при 300 С, Бактерии сйывают с фильтра и, высевают на селективную среду. содержащую ампициллин (100 мкг/мл), рифампицин (100 мкг/мл),.спектиномицин (100 мкг/мл) и стрептомицин (100 мкг/мл), Выросшие через 3 сут колоний на селективной среде при 30 С очищают на той же среде до отдельных колоний й выделяют из клеточной биомассы тотальную ДНК, 10 мкг ДНК переваривают с 20 ед, рестриктазы ВавН 1 1 ч.при 37 С, фракциоййруют путем электрофореза в 0,7 агарозном геле и переносят на нитроцеллолознь 1 й.фйльтр по методу Саузерна. Проводят гйбридизацию иммобилизованной на фильтре ДНК с Р-меченной ДНК .32плазмиды рЯТ 20, отмывают фильтр от...

Рекомбинантная плазмидная днк pfrblv f6, кодирующая белок оболочки бактериофага и белок 51 вируса лейкоза крупного рогатого скота, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент белка обо

Загрузка...

Номер патента: 1751208

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Пумпен, Козловская, Сиаккоу, Розенталь, Дрейлиня, Пушко, Грен, Платцер, Ульрих, Бреде, Соминская, Озолс

МПК: C12N 15/33, C12N 15/70

Метки: оболочки, бактериофага, кодирующая, рекомбинантная, лейкоза, бактерий, белок, рогатого, продуцент, вируса, обо, еsснеriснiа, крупного, pfrblv, штамм, белка, конструирования, днк, скота, плазмидная

...при фильтрыинкубируютсмоноклональны 65 С. После очистки ДНК В 9 И 1 - ВагпН фраг- ми анти- др 51 антителами глАК 14 в развемента на агарозном геле ДНК растворяют в дении 1:500 на буфере ТВЯ, содержащем20 мкл воды, Заполнейие концов проводят 55 50 мМ трис-НС 1, рН 7,5, 0,15 М МаС 1, 0,1%в 100 мкл раствора Б, содержащего 0,05 М тритон Х 100, 1% БСА, в течение 15 ч притрис-НС 1, рН 7,5, 0,01 М 9 С 12, 0,01 М дитиот С, После трехкратной отмывки буферомрейтол,0,025 М МаС 1, 100 мкМ сАТР, ОСТР, ТВЯ фильтры инкубируют 2 ч при 200 С снТТ 1- и ОСТР и 10 ед, ДНК-полимеразы Е. коньюгатом пероксидазы с антителами просоИ (фрагмент Кленова, в течение 1 ч при тив иммуноглобулинов мыши в разведении1:500. Фильтры отмывают буфером ТВЯ (3 - но. Иньекции...

Рекомбинантная плазмидная днк phiv 24-5, кодирующая слитый белок кор-антигена вируса гепатита в и белок оболочки вируса иммунодефицита человека, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент слитого белка кор-ант

Загрузка...

Номер патента: 1751209

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Озолс, Ульрих, Порстман, Лосева, Берзин, Розенталь, Цибиногин, Лэтч, Борисова, Петцольд, Грен, Дрейлиня, Осе, Меринг, Пумпен

МПК: C12N 15/33, C12N 15/70, C12N 15/51 ...

Метки: человека, продуцент, слитого, кор-антигена, белка, еsснеriснiа, рекомбинантная, плазмидная, слитый, оболочки, белок, вируса, штамм, кодирующая, иммунодефицита, 24-5, бактерий, кор-ант, днк, гепатита

...клеток к реакци-онной смеси добавляют 100 мкл клеток Е.соП ЯВ 1, обработанных 0,1 М СаС 12 (конечная концентрация - 5 х 10 клеток/мл).9Отбор клоновосуществляют путем рестрикционного анализа плазмидной ДНК,выделенной экспресс-методом. Плаэмида сожидаембй рестрикционной картой получает наименование рНИ 24-5,2. Штамм-продуцент Е. соИ К 802 (рН24 - 5),Штамм-продуцейт получают трансформацией клеток Е. со 11 К 802 рекомбинантнойплазмидной рНИ 24-5, Клетки выращиваютдо оптической плотности ОП 65 о 4-5 в солевой среде М 9 с добавкой, г/л: каэаминовыекислоты 10; глюкоза 2; ампициллин. 0,02,Клетки собирают центрифугированием и лизируют в четырехкратном обьеме буфера,содержащего 0,05 М трис-НС 1, рН 8,0; 0,15М ИаС 1, 0,1% тритон Х 100,...

Рекомбинантная плазмидная днк phiv 41-22, кодирующая кор антиген вируса гепатита в с экспонированным на его поверхности фрагментом белка 41 вируса иммунодефицита человека, способ ее конструирования и штамм бакт

Загрузка...

Номер патента: 1751210

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Порстманн, Лосева, Петцольд, Озолс, Дрейлиня, Грен, Лэтч, Ульрих, Пумпен, Розенталь, Борисова, Берзин, Меринг, Цибиногин, Осе, Пушко

МПК: C12N 5/10, C12N 15/51, C12N 15/48 ...

Метки: плазмидная, гепатита, бакт, рекомбинантная, конструирования, штамм, экспонированным, антиген, вируса, кодирующая, иммунодефицита, днк, кор, 41-22, человека, белка, поверхности, фрагментом

...С 1 4 В (2,1 х 75 см), уравновешенную тем же буфером, но без тритона Х. Фракции, проявляющие РВсАд - активность, собирают и используют либо непосредственно, либо после концентрирования переосаждением 50-ным сульфатом аммония.3. Определение НВсАд - активности Методом РИД,Титр НВсАд определяют с помощью рэдиал ьной иммунодиффузии (Р ИД), Дл я этого готовят двукратные серийные разведения клеточного лизата и титруют против анти-НВс антител человека, В качестве 510 стандарта используют очищенный НВсАд, полученный из рекомбинантных бактерий (1 мг/мл). Результаты титрования методом х 0,75 мм, Злектрофорез проводят в теЗО чение 15 ч при силе тока 7 мА. После злектрофореэа белки переносят нэ нитроцеллюлозные фильтры, инкубируют с моноклональными...