Штамм гриба gliосlаdiuм сатеnulатuм gilмаn. ет аввотт для получения препарата против грибных возбудителей картофеля

Скачать ZIP архив.

Текст

(57) Использование; микробиологическая промышленность, сельское хозяйство, производство средств защиты растений против возбудителей заболеваний, в частности грибных фитпптлг нд 1 феля, Сущность изобретения; штамм 611 ос 1 ас 1 цв сатепцатцв 6 вапп ет, АЬЬоц. ВНИИСХМВИЗР Дкультивируют на картофельноглюкозном агаре при 25 С в течение 2 - 3 недель, смывают опоры с агара, Титр биопрепарата 6,5 10 конидий в 1 мл. Норма расхода - 10 мл на 1 кг картофеля. Обработка полученным препаратом клубней картофеля снижает развитие болезни, возбудителем которой является Гцзагцв ЯавЬцс 1 пцв, на 81,3, а препаратом на основе известного штамма Вас 11 цз вусо 1 сез лишь на 51,4, 5 табл. СВт Изобретеяйству, в час обу защитьспользовано ей ка то ел 1 ам ный измо а под регистрационным ый с поверхности имптомами фузаделе ский обра сного в Л енин градвание шта пределит овусетез" 1 п еагсЬ. Нею ма прово-л ю 6 .и.а и Со ц и с 1 е 1 Ь 1, 1971,р.644.Штамм 6 оса е 1 АЬЬои, ВНИИС к классу Оец 1 егов роду 61 с 1 ас 1 цв. б 1 цв сатепц 1 атцв 611 вапп ХМ-ВИЗР Дотносится усез, порядку Моп 1 а 1 ез,ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССРГОСПАТЕНТ СССР) ПИСАНИЕ ИЗО АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬ(71) Институт экспериментальной ботаники им,В.Ф, Купревича и Главный ботанический сад АН СССР(72) Н,А. Дорожкин, Т.П. Алексеева, Ю.М, Плотникова, В,М. Гораль, Н.В, Лаппа, Т.Г. Омельянец, Г.П. Мельник и Г,Т, Архипчук (56) Микология и фитопатология, 1989, т.23, в.2, 167-172.Микробиолот.50, М 6, 63 - 67.Асса РЬусоран,23, М 1-2, 133-135.Авторское свидетельство СССР М 1771639, кл. А 01 И 63/00, 21.05.90. (54) ШТАММ ГРИБА 61 ОС А 01 ОМ САТЕН)1.АТ)М 61 МАКИ ЕТ АВВОТТ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ПРОТИВ ГРИБНЫХ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ КАРТОФЕЛЯ гический журнал, 1988 1 Ь,е 1 Ептово 1 о 91 са, 1988 е относится к сельскому хоости к биологическому спорастений, и может быть ротив грибных возбудител р ф я,Цель изобретения - получение нового штамма 611 ос 1 асцгп са 1 епц 1 асцв 6 вапп ет АЬЬоп В Н И И СХМ-В ИЗ Р Д, облада ющего широким спектром антагонистической активности по отношению к ряду грибов, возбудителей клубневых гнилей картофеля, а также микопаразитной активностью по отношению к возбудителю фузариоза, вертициллиоза, резиновой гнили.Это достигается тем, что в качестве ан- тагониста грибов, возбудителей клубневых гнилей картофеля используется штамм 61 ос 1 айцв сатепц 453, депонирован лекции микроорга 27 апреля 1990 го номером Д, вь клубня сорта Нев риозной гнили, от ской области,Идентифици р дилось по ЯцЬгавапап "Нур от.А 9 г 1 сц 1 ыгд 1 Йе 61 вапп, ес АЬЬо 1 т, объединенной колв В НИ И СХМ-В ИЗ Р, О н СШтамм имеет следующую характеристику,1. Кул ьтурал ьно-морфологические признаки,На картофельно-глюкоэном агаре колония клочковато-пушистая, белая, с оливково-зелеными концентрическими зонамиспороношения в центре колонии, Конидиеносцы шероховатые около 100 мкм длиной.Кисточка трехярусная, веточки 15 - 20 х 4 мкм,метулы 7 - 10 х 2,5 мкм, фиалиды 10 - 20 х 2мкм, Конидии зллипсоидные, 4 - 8 хЗ - 4 мкм,гладкие, светло-зеленные в длинных слизистых колонках.Линейный рост колонии на агаризованных средах;1.На сусло-агаровой среде - на 5-ыйдень роста - 21 мм, на 10-ый день - 30 мм,на 20-ый день - 90 мм;2.На картофельном агаре - на 5-ый деньроста - 28 мм, на 10-ый - 44 мм, на 20-ыйдень - 80 мм;З,На среде Чапека на 5-ый день роста -21 мм, на 10-й день - 33,5 мм, на 20-ый день- 63,5 мм;4.На овсянном агаре на 5-ый день роста- 24,5 мм, на 10-ый день - 43 мм; на 20-ыйдень - 75 5 мм5,На картофельно-глюкозном агаре на5-ый день роста - 30 мм, на 10-ый - 45,5 мм,на 20-ый день - 90 мм.Спорообразование гриба на агаризованных средах на 21-ый день роста1,На сусло-агаровой среде - 6,5 х 10 ко 6нидий в 1 мл;2,На агаре Чапека - 7,2 х 10 конидий в 15З,На картофельно-глюкозном агаре -6,5 х 10 конидий в 1 мл;64,На картофельном агаре - 4,4 х 10 конидий в 1 мл;5,На овсяном агаре - 1,2 х 10 конидий в71 мл.Спорообразование начинается на 5-ыйдень роста, максимум спорообразования на21 день,11, Физиолого-биохимические свойства,Из источников углерода усваивает глюкозу, галактоэу, сахарозу,мальтозу, фруктоэу, арабиноэу, рамнозу, Хорошо усваиваетнитратный, нитритный и аммонийный азот.Растет в широких пределах рН от 2,0 до9,0,Продукт синтезируемый штаммом неустанавливался.Признаки штамма устойчивые.Штамм периодически пересевается ихранится в пробирках на картофельно-глюкозной среде и сусло-агаровой среде притемпературе 20 - 25 С, Штамм 01 осабц е сатеп ц 1 аЕцеОИеапп. ет АЬЬотт, ВНИИСХМ ВИЗР Д не патогенен для теплокровных животных.П р и м е р 1. Отбор штаммов грибов-ан 5 тагонистов к возбудителю фузариоэа картофеля Ецзаг це заеЬцс 1 пце ЕцсМ,Основным и наиболее опасным патогеном картофеля при хранении является грибЕозагце заеЬцс 1 пое ЕосЕ. В связи с этим10 отбор грибов-антагонистов проводился кнаиболее вирулентному штамму ЕцзагцезащЬцспце Еос 1. 34Материалы и методы,Объектами исследования служили гри 15 бы рода ОИос 1 ас 1 цщ, Еозаг 1 цщ, Моп 1 егеИа,Сабозрог 1 це, Чегт 1 с 1111 ое, Репс 1 ое,Тгсбос 1 аб 1 цщ, Зсоро 1 аг 1 орз 1 з, РаесИощусези дрвыделенные по общепринятой методике из клубней картофеля из разных обла 20 25 ЗО3540 45 50 55 стей Советского Союза, Всего проанализировано свыше 200 штаммов грибов.Штаммы предполагаемых антагонистов выращивали на картофельно-глюкозно-агаровой среде в течении 20 суток в чашках Петри, затем из образовавшегося газона вырезали блоки 0,5 см в диаметре.Тест-объект Е.защЬос 1 пцщ культивировали на картофель-глюкозном агаре в течение 14 суток. Из выросших культур готовили посевную суспензию с титром 1 х 10 макронидий в 1 мл. 0,1 мл суспензии Е,защЬцспое высевали газоном на поверхность застывшего картофельно-глюкозного агара в чашках Петри. В центре засеянныхтесг-объектом чашек Петри располагали блок с предполагаемым антагонистом. Чашки Петри оставляли при комнатной температуре 22-25 С. Учет результатов опыта проводили на 6-е сутки,Среди исследованных штаммов нами отобраны иэоляты, дающие зону задержки роста тест-культуры рабиусом не менее 10 мм (табл.1). Высокой антагонистической активностью по отношению к возбудителю фузариоза Е.защЬос 1 пощ обладали грибы рода 6 Ис 1 аб 1 ое и РаесИ 1 ощусез, причем в отдельных случаях наблюдалось нарастание колонии антагониста на колонию тест-кул ьтуры,Наибольшей антагонистической активностью по отношению к Е.защспощ обладает штамм Иос 1 айцщ сасепо 1 атощ ОИщапп ес АЬЬоп. Д,П р и м е р 2, Для анализа изменения репродуктивной активности Е.защЬцспце под действием грибов-антагонистов проводили учет количества конидий тест-культуры в зоне ингибиции и в контроле (культура Е.защЬцс 1 пощ без антагониста) при помощи камеры Горяева, 183 б 90740 45 50 55 Данные приведены в табл.2,Наибольшее снижение репродуктивной способности Р,завЬцс 1 пцв наблюдалось под действием гриба 611 ос 1 ад 1 цв сатепц 1 атцв Д.П р и м е р 3. Микопаразитные свойства 611 ос 1 ад 1 цв сасепц 1 атцв Дпо отношению к возбудителям клубневых гнилей картофеля.Для изучения микофильных свойств предметные стекла, покрытые тонким слоем картофельно-глюкозного агара, инокулировали одновременно (противоположные стороны) микопаразитом и тест-грибом. Совместные культуры инхубировали а стерильных чашках Петри на влажных фильтрах при температуре 25 С, В качестве тест-культур были взяты; Рц заг 1 ц в завЬцс 1 пцв, 6 еотг 1 сЬцв сапд 1 дцв, ЧегОс 1 И 1 цв 1 атег 3 т 1 цв, Через 5 - 7 дней препараты окрашивали метиленовой синькой, микроскопировали и проводили исследования с помощью светового микроскопа 3 е 3 и, Установлено, что под воздействием 61 осадцв саепца 1 цв Дпроисходит разрушение конидий Р.завЬцс 1 пцв, наблюдались случаи обвивания гифой микопаразита гиф Чегос 11 цв 1 атег 1 т 3 цв и Р,завЬцс 3 пцв, их параллельный рост, при этом происходят изменения в цитоплазме гиф тест-культур, их вакуолизация, сужение, разрыв. При помощи сканирующего микроскопа обнаружены контактные органы этого микопараэита, представленные длинными, тонкими ветвями, обвивающие гифу хозяина (тест-культуру), а также специализированные органы - конические апрессории, внедряющиеся в гифу хозяина, разрушая локально его оболочку.П р и м е р 4. Использование штамма 613 ос 1 ад 3 цв сатепцашв Дпри получении препарата.Для размножения штамм культивировали в пробирках на картофельно-глюкозном или сусловом агаре в течение 2 - 3 недель при температуре 25 С, Препарат используют в виде суспензии спор. Для этого в пробирку с культурой гриба добавляют стерильную воду до верхнего уровня среды и встряхивают до образования суспензии. Подсчет конидий в полученной суспензии проводят в счетной камере Горяева, после чего доводят концентрацию до 10 конидий6в 1 мл воды. Титр биопрепарата б,5 х 10 коб нидий в 1 мл.При хранении штамма в холодильнике при температуре 5 - 10 С в пробирках на картофельно-глюкозном агаре пересев требуется раз в год. Приготовленный биопрепарат суспензия штамма) используется в 5 10 15 20 25 30 35 течении 24 часов, Норма расхода 1 О мл на 1 кг картофеля,П р и м е р 5. Использование препарата (штамма) 611 ос 1 ад 1 цв сатепц 1 а 1 цв Дпри проверке его антагонистической активности по отношению к Рцзаг 1 цв завЬцс 1 пцв 34 (табл,3).Исследования проводили путем искусственного заражения клубней картофеля суспензией конидий грибов Р,завЬцс 1 пцв и предполагаемых антагонистов грибов рода 61 осад 1 цв, Инфицировали картофель суспензией конидий в соотношении 1:1, Титр суспензии 1 х 10 конидий в 1 мл,Г 3 ромытые. обработанные спиртом и обожженные над спиртовкой клубни повреждали штампом на глубину 10 мм в пуповинной части.В полученные углубления пипеткой вводили до полного наполнения приготовленную суспензию, Для каждого образца брали по 10 клубней. В контрольные образцы с механическими повреждениями вводили стерильную воду совместно с суспензисй гриба Г.завЬцс 3 пцв в соотношении 1:1, Клубни укладывали в выстланные фильтровальной бумагой зксикаторы, нижняя часть которых заполнялась стерильной водой, Эксикаторы накрывали крышками и помещали в термастат или помещение с температурой 23 - 25 С и в холодильные камеры с температурой 5 С,Учет загнивания клубней проводили через 10 дней после их продольного разреза через точку механического повреждения. Измеряли диаметр и глубину загнивания, с последующим вычислением площади некроза,Двухфакторный дисперсионный анализ данных по площади некроза картофеля при заражении возбудителем фузариоза совместно с грибами рода Гцзагцв позволяют говорить о достоверности различий и о более высокой антагонистической активности 6.сайепц 1 айцв Д. Препарат (штамм) 6,сатепцатцв снижает развитие болезни как при высоких температурах, так и при низких (5 С).П р и м е р б, Использование штамма 613 ос 1 ад 1 цв сатепц 1 а 1 цв Ддля подавления развития сухой фузариоэной гнили клубней картофеля по сравненио с Васйцз вусо 3 дез (прототип).В табл.4 приведены данные по развитию патологического процесса в клубнях, инфицированных Е,завЬцс 1 пцв, при внесении в гриб-суспенэию бактерии Вас 1 Нцз вусо 3 дез б 83 (прототип) и предлагаемого штамма 613 ос 1 эд 3 цв сатепц 1 этцв Д.1836907 Таблица 1 Антагонистическая активность грибов рода 6 Иосабцгп иРаесПопусев по отношению к возбудителю фуэариоэакартофеля Рцэагцв эавбцс 1 пцп ЕцсК. М 34 1 п чтго Из результатов опыта следует, что использованием штамма 6,сатепц 1 атцп Д ведет к более значительному снижению развития болезни на 81,3 О, при примененйиВасИ 1 цв гпусоЫез эта величина составляет514 ф,П р и м е р 7, Антагонистическая активность 6 Иосаб 1 цгл саепц 1 аоип Дпо отношению к грибам возбудителям клубневыхгнилей картофеля по сравнению с ВасИцзгпусоЫеэ 133 (прототип),Методика проведения опыта описана, выше, Повторность опыта б-кратная,Из данных табл,5 видно, что предлагаемый штамм 6 Иосайцпз сатепц 1 атца Д обладает большим антагонистическим эффектом по отношению к фитопатогенным грибам картофеля. а также более широким спектром действия по сравнению с ВасИ 1 цэ пчусоОез 133.5 Таким образом, использование штамма6 Иос 1 асИцгп сатепца 1 цгп Д, обладающего антагонистическим и микопаразитным действием в отношении фитопатогенных грибов, позволяет расширить арсенал 10 биологических средств борьбы с возбудителями клубневых гнилей картофеля.Формула изобретения Штамм гриба 6 Иос 1 аб 1 цгп сасепцавгп6 Ивапп ет АЬЬоп ВНИИСХМ-ВИЗР Д15 для получения препарата против грибныхвозбудителей картофеля.1836907 10 Таблица 2 Таблиц Влияние грибов рода 61 осабоа на развитие болезни клубней картофеля сорта Огоне при разных температурах, инфицированных возбудителем фузариоза Р,завЬоспищ 3412 1836907 Таблица 4 Развитие болезни,Ва иант опыта 100 Рцзаг 1 цв завЬцс 1 пци (контроль) Вас 1 цз: вусоЫез + Р.завЬцспцвОосас 3 цв сатепц 1 атцв 0-43+ Р,завЬцс 1 пцв 48,6 18,7 Таблица 5 Зона отс тствия оста г иба по а и с, мм Текст-культура В.в сосез и ототип О.сатепцамв -43 15,0+ 2,0 17,0 +2,0 18,0 + 1,5 14,0 + 2,0 Рцзаг 1 цв завЬцс 1 пцгп Рцзаг 1 цв ачепасецгп Гцзаг 1 цгп сцвогцв Гцзагцв зо 1 ап 1 5,0 + 1,0 4,0 + 1,0 13,0 ф. 2,5 5,0 -ф. 1,0 10,0 +2,0 Составитель Н. ДорожкинТехред М,Моргентал Корректор М, Максимишинец Редактор Заказ 2846 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Рцзагцв зо 1 ап 1 чаг.агуасецвЕцзагцв охузрогцвГцзагцгп 9 гавеп 1 агцвГцзаг 1 цгп 1 атегт 1 цвРжова ех 1 цца чаг,ех 1 ццаОео;гсЬцв сапйдцвВ 11 егпаг 1 а э 11 егпатаЧегт 1 сцв 1 атегтцвТг 1 сЬосасцв азрегцвЯсорцагорзз Ьгечсац 1 з 25,0 + 0,0 18,7 +1,0 38,8 ф 2,0 23,7 + 0,95 40,0 + 0,0 202 й 1,6 19,5 + 2,0 21,0+ 1,0 32,0 ф 2,0 21,0 + 1,0 35,0 ф 1,1 21,0 0,365 34,3 + 0,7 20,0 ф 0,0

Смотреть

Заявка

4865244, 10.09.1990

ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БОТАНИКИ ИМ. В. Ф. КУПРЕВИЧА, ГЛАВНЫЙ БОТАНИЧЕСКИЙ САД АН СССР

ДОРОЖКИН НИКОЛАЙ АФАНАСЬЕВИЧ, АЛЕКСЕЕВА ТАТЬЯНА ПАВЛОВНА, ПЛОТНИКОВА ЮЛИЯ МАРКОВНА, ГОРАЛЬ ВИКТОР МАРТЫНОВИЧ, ЛАППА НИНА ВЛАДИМИРОВНА, ОМЕЛЬЯНЕЦ ТАИСИЯ ГРИГОРЬЕВНА, МЕЛЬНИК ГАЛИНА ПАВЛОВНА, АРХИПЧУК ГАЛИНА ТИМОФЕЕВНА

МПК / Метки

МПК: A01N 63/00, C12N 1/14

Метки: сатеnulатuм, картофеля, gilмаn, препарата, возбудителей, гриба, gliосlаdiuм, аввотт, грибных, против, штамм

Опубликовано: 30.08.1993

Код ссылки

<a href="http://patents.su/6-1836907-shtamm-griba-gliosladium-satenulatum-gilman-et-avvott-dlya-polucheniya-preparata-protiv-gribnykh-vozbuditelejj-kartofelya.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Штамм гриба gliосlаdiuм сатеnulатuм gilмаn. ет аввотт для получения препарата против грибных возбудителей картофеля</a>

Похожие патенты