Способ определения цитотоксичности дифтерийного токсина

Номер патента: 860764

Авторы: Рахимова, Абзалова, Самойлова, Газизова

Скачать ZIP архив.

Текст

ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 210979 (21) 2820777/28-13с присоединением заявки Йо(51)М. Кл. А 61.К 35/74 Государственный комитет СССР но делам изобретений и открытий(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ ДИФТЕРИИНОГО ТОКСИНА антибиотиков) с десятикратным шагом от 10 " до 10 " . По 1 мп каждого разведения токсина вносят в 4 пробирки с клеточной культурой. Для контроля клеточной культуры 8 пробирок оставляют без токсина, заменив ростовую среду на поддерживающую. Штатив с опытными и 4 контрольными пробирками помещают в рефрижератор с температурой 10 С на 3 ч для синхронизации клеточной культуры. Остальные 4 контрольные пробирки (беэ токсина) сразу ставят в термостат при 37 С. После проведенной синхронизации клеточные культуры переносят в термостат при 37 С. Через б ч (т.е. через 3 ч после окончания синхронизации) проводят первое чтение цитотоксического эффекта, наблюдая опытные клеточные культуры в сравнении с контрольными под микроскопом при малом увеличении (об. 8 х, ок. 10 х).ЦТЭ оценивают плюсами по проценту гибели клеток: 100, 75, 50 (+1). 25 (+) клеток монослоя. Отсутствие цитотоксического эффекта отмечают минусом (-).Результаты сравнительного титрования нативного дифтерийного токсина с, 335 Уфимского НИИВС на обычной Изобретение относится к области медицины, а именно к способам определения цитотоксичности дифтерийного токсина.5Известен способ определения цито- токсичности дифтерийного токсина путем совместной инкубации его с клеточной культурой с последующим подсчетом количества дегенерированных клеток Г 1Однако этот способ недостаточно точен и довольно длителен.Цель изобретения - повышение точности способа и ускорение его,это достигается тем, что для оп ределения цитотоксичности дифтерий- ного токсина его инкубируют совместно с клеточной культурой с последующим подсчетом количества дегенерированных клеток, причем в качестве 20 культуры используют 18-часовую однослойную культуру амниотического эпителия человека, инкубацию ведут вначале при 10"С в течение 3 ч, затем продолжают при 37 С, а подсчет количества дегенерированных клеток проводят через б и 24 ч.П р и м е р. Испытуемый дифтерийный токсин разводят поддерживающей средой (средой 199 беэ сыворотки и 30,ъ.ф . гин титуэпидемиологи860764 формула изобретения Составитель Л. Морозова Редактор Т. Колодцева Техред С. Мигунова КорректорС. ШекмарТираж 687 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Заказ 6430/1 Филиал ППП фНатентф, г. ужгород, ул. Проектная, 4 Таким образом, предлагаемай способ определения цитотоксичности дифтерийного токсина более чувствителен и протекает быстрее. Способ определения цитотоксичности дифтерийного токсина путем совместной инкубации его с клеточной культурой с последующим подсчетом количества дегенерированных клеток, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности способа и ускорения его, в качестве культуры используют 18-часовую однослойную культуруамниотического эпителия человека, инкубацию ведут вначале прн 10 фС в течение 3 ч, продолжают при 37 С, аподсчет количества дегенерированныхклеток проводят через 6 и 24 ч.Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Васенович М.И., Левченко Л.А.Методика титрования дифтерийного токсина и анатоксина в культуре тканифибробластов куриного эмбриона, сб.Инструктивно-методические материалыпо вопросам контроля и стандартизациибиологических препаратов, М., 1965,с, 52-56.

Смотреть

Заявка

2820777, 21.09.1979

КАЗАНСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ

ГАЗИЗОВА ГУЛЬНАР РИЗАУТДИНОВНА, САМОЙЛОВА РАИСА ЕГОРОВНА, АБЗАЛОВА АННА АФАНАСЬЕВНА, РАХИМОВА ФЛЮРА РАКИПОВНА

МПК / Метки

МПК: A61K 35/74

Метки: цитотоксичности, токсина, дифтерийного

Опубликовано: 07.09.1981

Код ссылки

<a href="http://patents.su/3-860764-sposob-opredeleniya-citotoksichnosti-difterijjnogo-toksina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения цитотоксичности дифтерийного токсина</a>

Похожие патенты