Способ получения тиротропина

Номер патента: 858835

Авторы: Рышка, Кандыба, Крушинская, Кивилшене, Жемайтите

Скачать ZIP архив.

Текст

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТИРОТРОПИНА Изобретение относится к фармацевтической (эндокриновой) промышленности и может быть использовано для производства гормональных препаратовИзвестен способ получения тиротропина путем экстракции свежемороженных гипофизов крупного рогатого скота, 27 раствором хлористого натрия с последующей очисткой ацетоном, ацетатом свинца и трихлоруксусной кисло 10 той. Полученный целевой продукт диализируют и лиофилизируют.Выход составляет 0,45 г/кг при активности 1 ЕД/мг 11.Однако недостатком известного15 способа является его длительность (280 час) и низкая удельная активность целевого продукта.Цель изобретения - расширение30 сырьевой базы и повышение активности целевого продукта.Поставленная цель достигается тем, что в способе получения тиротропина путем экстракции животного сырья с последующей очисткой и вьщелениеч целевого продукта, в качестве источника сырья используют отходы,полученные после производства адренокортикотропного гормона, которыеэкстрагируют водно-спиртовым раствором при рН 5,0-9,0 в присутствииаммиачно-ацетатного буфера, сорбируют на карбоксиметилсефадексе,дадееэлюируют тем же экстрагентом и осаждают целевой продукт 75-90 Х-нымспиртом. П р и м е р 1. 1,2 кг отходов, полученных после экстракции 2 кг гипофизов свиней подкисленным ацетоном, экстрагируют 4 л 703 спирта, содержащего 1 ОХ ацетата аммония, рН 8,б 5, в течение Э час. По окончании экстракции экстракт отделяют от отходов и осаждают доведением концентрации спирта до 803. Выпавший сырец тиротропина промывают858835 42 У этилового спирта, После сорбциигормона из раствора колонку промывают 0,25 М аммиачно-ацетатным буфером, а тиротропин элюируют 30 мл 1 Маммиачно-ацетатного буфера с рН 7,00,содержащим 507, спирта. Элюат охлаждают до 5 С и при перемешиваниидобавляют 120 мл абсолютного спирта,Через 12 ч осадок отделяют центриФугированием, промывают 2 раза 967. -ным спиртом, затем ацетоном и сушатдо удаления запаха ацетона. Вес порошка - 118 мг, активность - 11ЕД/мг. Выход составляет 650 ЕД изв кг гипофизов,Предлагаемый способ позволяетиспользовать отходы от производстваадренокортикотропного гормона, сократить продолжительность технологического процесса в 2 раза, увеличитьвыход целевого продукта с 200 ЕД/кгдо 600 ЕД/кг, а также повыситьудельную активность целевого продукта с 1 ЕД/мг до 1 ОЕД/мг,Формула изобретения ВНИИПИ Заказ 7395/13 Тираж 687 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 спиртом, ацетоном и сушат на воздухе.Вес сырца 5,2 г, активность 0,6 ЕД/мгБерут 5 г сырца тиротропина и растворяют в 0,8 л 0,1 М аммиачно-ацетатного буфера с рН 6,25 и проводят сорбцию через колонну объемом 50 мл,наполненную КМ-се 4 идексом С,уравновешенным тем же буфером, По окончании сорбции колонну промывают исходным буфером, заполняют элюируюшейсмесью, состоящей из равных объемов2 М аммиачно-ацетатного буфера иэтилового спирта, закрывают и выдерживают 20 час. Затем тиротропин элюнруэт и осаждают 3 объемами спирта. Выпаший осадок тиротропина промывают этиловым спиртом, ацетоном и сушатна воздухе. Выход тиротропина составляет 1100 ЕД/кг гипофизов, активность 3 ЕД/мг. 0,55 г тиротропинарастворяют в 0,05 л 0,005 М натрийглицинового буфера с рН 9,5 и пропускают через колонну обвемом 25 мл,наполненную ДЭА:сефацелем, уравновешенным тем же буфером. По окончаниисорбции колонну промывают 50 мл исходного буфера, затем 50 мл 0,1 Мнатрий-глицинового буфера с рН 9,5и элюируют гормон 0,05 М аммиачноацетатным буфером с рН 6,25, Тиротропин из элюата осаждают 5 объемамиспирта, Выпавший осадок промываютспиртом, ацетоном и сушат на воздухе, Выход тиротропина составляет600 ЕД/кг гипофизов, активность -15 ЕД/мг,П р и м е р 2, Берут 800 г отходов, полученных после экстракции2 кг свежезамороженных передних долей гипофизов крупного рогатого скота подкисленным ацетоном, заливают4 л экстрагирующей смеси, состоящейиз 2 М аммиачно-ацетатного буферас рН=7,00 и этилового спирта,взятых в соотношении 1:1, Суспензиюперемешивают в течение 3 час, нерастворимую часть отделяют центрифугиро"ванием, а недосадочную жидкость разбавляют 3 объемами воды. Полученныйраствор пропускают через колонкуобъемом 15 мл КМ-сефадекса С,.уравновешенного 0,25 М аммиачно-ацетатным буфером с рН 7,00, содержащим Способ получения тиротропина пу тем экстракции животного сырья споследующей очисткой и выделениемцелевого продукта, о т л и ч а ю -щ и й с я тем, что с целью расширения сырьевой базы и повышения активности целевого продукта, в качествеисточника сырья используют отходы,полученные после производства адренокортикотропного гормона, которыеэкстрагируют водно-спиртовым раствором при рН 5,0-9,0 в присутствииаммиачно-ацетатного буфера,сорбируютна карбоксиметилсефадексе, далееэлюируют тем же экстрагентом и осаждают целевой продукт 75-903-ным 45 спиртом е Исто ники информации принятые во внимание при экспертизе

Смотреть

Заявка

2797098, 17.07.1979

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ТЕХНОЛОГИИ КРОВЕЗАМЕНИТЕЛЕЙ И ГОРМОНАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ

РЫШКА ФЛОРИАН ЮЗЕФОВИЧ, КРУШИНСКАЯ ВЕРА ВЛАДИМИРОВНА, КАНДЫБА ЕФИМ ИЛЬИЧ, КИВИЛШЕНЕ ВИДА ВЛАДОВНА, ЖЕМАЙТИТЕ АЛЬДОНА ПЕТРОВНА

МПК / Метки

МПК: A61K 38/22

Метки: тиротропина

Опубликовано: 30.08.1981

Код ссылки

<a href="http://patents.su/2-858835-sposob-polucheniya-tirotropina.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения тиротропина</a>

Похожие патенты