Способ определения ионов кальция в мышечных волокнах

Номер патента: 1328731

Авторы: Машанский, Сабинин, Ли, Кузнецов, Томилин

Скачать ZIP файл.

Текст

Смотреть

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 9) (1) СО МИТЕТ ССС Й И ОТНРЫ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИК АВТОРСКОМУ СВИД.:ТЕЛЬСТВУ(2 (2 (4 (7 нос милин Сабиская В.Г полосаделени,1) 3702723/28-142) 17.02.846) 07.08.87. Бюл. Кф 291) Институт цитологии АНи Институт токсикологии(56) Самосудова Н.В., ЛюдкоВзаимосвязь между поперечнотой структурой мышцы и распем в ней кальция. - Цитолог21, 4, с. 391-396. СПОСОБ ОПРЕДМЛЕНИЯ ИОНОВ КАЛЬМЫШЕЧНЫХ ВОЛОКНАХЦель изобретения - повышение точспособа за счет полного выявления ионов кальция в митохондриях, саркоплазматическом ретикулуме и 1 и А зонах. Для этого ткань замораживают, помещают в ацетон, охлажденный до температуры твердой углекислоты. Далее объект помещают в смесь ацетойа аралдитом, концентрация которого постепенно повышалась до 1007., Последний этап в чистом аралдите проводят в вакууме. Срезы окрашивают 2-2,5 Е-ным. раствором пироантиманата калия. Ионы кальция определяют по наличию элек- .фЖ тронно-плотного осадка.8731 Составитель М.ПознякТехред А. Кравчук Корректор А.Тяско Редактор П.Гереши Заказ 3479/47 Тираж 776 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Б, Раушская наб д, 4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 1 132Изобретение относится к медицине, а именно к области цитохимических исследований для анализа распределения ионов кальция и других двухвалентных ионов приизлучении быстро протекающих внутриклеточных процессов например, мышечных повреждений, вызванных действием фосфорорганических инсектицидов а также процессов возбуждения нервных клеток и мьппечных волокон в норме.Цель изобретения - повьппение точности способа за счет полного выявления ионов кальция в митохондриях, саркоплазматическом ретикулуме и 1 и А зонах путем пропитки срезов в вакууме и окрашивания их в 2-2,57-нам растворе пироантимоната калия.Способ осуществляют следующим образом.Металлическим стержнем, охлажденным до температуры жидкого азота, проводят быстрое замораживание участка диафрагмальной мышцы крысы, нарко. тизированной гексеналом. Замороженный кусочек диафрагмы быстро помещают в ацетон, охлажденный до температуры твердой углекислоты, в котором выдерживают в течение 5 ч для замещения витрифицированной воды из объекта с последующим постепенным в течение 1 ч) повышением температуры до комнатной. Далее объект помещают в смесь ацетона с аралдитом, концентрация которого постепенно повьппалась до 1007 по следующей схеме: 3 ч. ацетона на 1 ч аралдита, т.е. 3:1, далее 1:1; 1:3; чистый аралдит. В каждой смеси объект выдержива.ют в течение 2 ч. Последний этап в чистом аралдите проводят в вакуумной камере (рабочий вакуум 10 торр).Далее осуществляют полимеризацию при60 С и резку на ультрамикротоме, вванночку ножа которого заливают2-2,57-ный раствор пироантимонатакалия в дистиллированной воде. Просмотр срезов осуществляют в электрон"ном микроскопе. Ионы кальция определяют по наличию электронно-плотногоосадка.Использование предлагаемого способа позволяет сохранить основные компоненты объекта в неизменном виде,закрепив в смоле исследуемые ионыдо момента соприкосновения их с водными раствора, что создает условияболее полного и точного выявленияисходной локализации ионов в близком 20 к нативному сОстОянию что можетбыть полезно при изучении динамикипротекания различных патологическихпроцессов в живом Организме. 25 Формула изобретения Способ определения ионов кальцияв мьппечных волокнах, путем эамораЗ 0 живания ткани жидким азотом; обезвоживания в ацетоне охлажденном твер,цой углекислотой, пропитки в смолахи приготовления срезов, о т л и -ч а ю щ и й с я тем, что, с целью 35повьппения точности способа за счетполного выявления ионов кальция в митохондриях, саркоплазматическом ре"тикулуме и 1 и А зонах, пропитку проводят под вакуумом, а срезы окраши О вают 2-2,57.-ным раствором пироантиманата калия, при этом ионы кальцияопределяют по наличию электронноплотного осадка.

Заявка

3702723, 17.02.1984

ИНСТИТУТ ЦИТОЛОГИИ АН СССР, ИНСТИТУТ ТОКСИКОЛОГИИ

МАШАНСКИЙ ВИКТОР ФЕДОРОВИЧ, ТОМИЛИН НИКОЛАЙ ВЛАДИМИРОВИЧ, КУЗНЕЦОВ ВАЛЕРИЙ ГЕОРГИЕВИЧ, ЛИ СЕРГЕЙ ЕРОВИЧ, САБИНИН ГЕОРГИЙ ВЛАДИМИРОВИЧ

МПК / Метки

МПК: A61B 10/00, G01N 33/48

Метки: волокнах, кальция, ионов, мышечных

Опубликовано: 07.08.1987

Код ссылки

<a href="http://patents.su/2-1328731-sposob-opredeleniya-ionov-kalciya-v-myshechnykh-voloknakh.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения ионов кальция в мышечных волокнах</a>

Похожие патенты